Respiracin celular

Laboratorio 8
BIOL 3051L

Objetivos
Entender que es la respiracin celular,
su importancia y los pasos principales
de la misma.
Diferenciar entre la respiracin aerbica
y la anaerbica.
Diferenciar entre la fermentacin lctica
y alcohlica, y conocer sus aplicaciones.
Objetivos
Entender como ocurre la fermentacin
alcohlica al usar distintos carbohidratos.
Medir la respiracin aerbica en varios
organismos.
Conocer como se lleva a cabo una titilacin.
Respiracin
La respiracin celular es una serie de
reacciones por las cuales la clula
degrada molculas orgnicas y produce
energa.
Usualmente:

C
6
H
12
O
6
C O
2
+ H
2
O + Energa (ATP)
glucosa
Respiracin (cont)
ATP ADP
La respiracin celular sigue distintas
rutas dependiendo si en la clula hay
oxigeno o no.
Respiracin aerbica (oxigeno),
Respiracin anaerbica (sin oxigeno)
En ambos primero ocurre gluclisis
Gluclisis
Ocurre en citoplasma
Todos los organismos vivos llevan a
cabo la gluclisis
Glucosa + 2Pi + 2ADP +2NAD
+

2 cidos pirvicos + 2ATP +
2NADH + 2H
+

Gluclisis (cont)
En ausencia de oxgeno, luego de la
gluclisis, se lleva a cabo la fermentacin
(respiracin celular anaerbica)
Bacterias (respiracin celular anaerobia)
Humanos (respiracin celular aerbica y
anaerbica)
Respiracin celular aerbica
Es el conjunto de reacciones en las
cuales el cido pirvico producido
por la gluclisis se transforma en
CO
2
y H
2
O (36 ATP)
Eucariota (mitocondria: ciclo de
Krebs y cadena de transporte de
electrones)
Mitocondria
Mitocondria :ciclo de Krebs
y cadena de transporte de
electrones
Cadena de transporte de electrones
Es un sistema multienzimtico ligado a
membrana que transfiere electrones desde
molculas orgnicas al oxgeno.
Los electrones producidos en gluclisis y en el
ciclo de Krebs, pasan a niveles mas bajos de
energa y se libera energa que se usa para
formar ATP.
Cadena de transporte
Respiracin celular anaerbica
Ocurre en clulas que no tienen
oxigeno
Menos eficiente pues solo produce 2
ATP
Existen dos tipos:
1. Fermentacin lctica
2. Fermentacin alcohlica
Fermentacin lctica
cido pirvico + NADH + H
+
cido lctico + NAD
+
Ocurre en algunas bacterias: aprovechando
esta propiedad se produce yogurt, crema
agria y quesos.
Algunos protozoarios
Msculo esqueletal humano (cuando hay
deficiencia de oxgeno), la acumulacin de
cido lctico causa el dolor caracterstico.
Fermentacin lctica
Yogurt
Fermentacin alcohlica
Ocurre en levaduras, otros hongos y
algunas bacterias, produciendo alcohol
(etanol) y CO
2
. Se usa para obtener
varios alimentos como el pan, la
cerveza y el vino.

cido pirvico acetaldehdo + CO
2
Acetaldehdo + NADH + H
+
etanol + NAD
+
Fermentacin alcohlica
Cerveza
Vino
Pan
Resumen (Respiracin)
Diferencias entre respiracin celular
aerbica y anaerbica
La diferencia bsica es la cantidad de
molculas de ATP que se producen.
En la respiracin celular anaerbica, los
hidrgenos (electrones) pasan al piruvato
para formar el cido lctico y el etanol,
mientras que en la aerbica, los hidrgenos
pasan a la cadena de transporte de
electrones para formar ATP
Diferencias entre respiracin (cont)
En la respiracin aerbica, el piruvato, al
pasar por el ciclo de Krebs, produce
hidrgenos adicionales que pasan tambin a
la cadena de transporte de electrones para
formar ATP.
Por lo anterior, en la respiracin aerbica se
termina con 36 ATP mientras que en la
anaerbica se extraen 2 ATP
Ejercicio 1. Respiracin anaerobia
A. Fermentacin alcohlica en levaduras
La levadura es capaz de llevar a cabo
respiracin aerobia y anaerobia
Sacharomyces cerevisiae (pan, cerveza)
Fermentacin alcohlica produce; bixido
de carbono (efervescencia en cerveza y
crecimiento del pan) y alcohol (presente en
cerveza y vinos)
Procedimiento
1. Prepare una suspensin de levadura
por laboratorio mezclando:
Un paquete de levadura
2 g de sacarosa o melaza
100 ml de agua tibia
2. Rotule 4 tubos del 1-4. Aada y
mezcle bien lo siguiente:
Procedimiento (cont)
Tubo 1: 2 ml de solucin de sacarosa + 2
ml de suspensin de levadura
Tubo 2: 2 ml de solucin de galactosa +
2 ml de suspensin de levadura
Tubo 3: 2 ml de solucin de maltosa + 2
ml de suspensin de levadura
Tubo 4: 2 ml de solucin de lactosa + 2
ml de suspensin de levadura
Procedimiento (cont)
3. Para cada tubo:
a. Llene una pipeta graduada con la solucin
del tubo
b. Tape el extremo con el dedo mientras sella el
lado opuesto con papel de parafina
c. Utilizando la pipeta pasteur, llene la pipeta
graduada con la solucin hasta que se
desborde
d. Invierta la pipeta, colocndola en el tubo de
ensayo
Procedimiento (cont)
4. Durante la fermentacin, el CO
2
subir
y se acumulara en el extremo superior
de la pipeta. Anote la produccin de
CO
2
en cada pipeta a intervalos de 5
minutos por 20 minutos (mirar tabla).
Esta formacin de gas es lo que va a
medir (en ml) y anotar en la siguiente
tabla:
Procedimiento (cont)
Tabla 1. Resultados produccin de CO
2
en la fermentacin
Tiempo (en
minutos)
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4
5
10
15
20
Procedimiento (cont)
5. Cul fue la produccin final de CO2
(ml/20 minutos) para cada tubo?
6. Que tipo de fermentacin ocurri?
7. La levadura puede usar diferentes
carbohidratos para la fermentacin?
Analice los resultados segn la
composicin qumica de los azcares
usados.
8. Que pasaba si no sellaba con parafina
ambos extremos de la pipeta?
Ejercicio 2. Respiracin aerbica
A. Respiracin celular en plantas y animales
Recuerde que en la respiracin celular se
produce CO
2
, agua y 36 ATP.
Se usarn organismos que viven en agua
dulce, que al liberar CO
2
producen cido
carbnico en el agua (medicin con
fenoltalena)
Se compara la respiracin celular en una
planta acutica en oscuridad y en luz para
determinar si se lleva a cabo respiracin
celular en todo momento.
Procedimiento
1. Determine los volmenes de los organismos
que se van a utilizar en este experimento, y
anote la informacin en la tabla 2. Los
pasos a seguir para determinar el volumen
del organismo son los siguientes:
a. Aada el organismo a un vaso (beaker)
pequeo con 50 ml de agua
b. Haga una marca donde queda el menisco
c. Remueva el organismo
Procedimiento
d. Con una pipeta completamente llena, aada
agua hasta llegar a la marca
e. La lectura en la pipeta ser el volumen del
organismo
f. Repita para cada organismo

2. Rotule cinco vasos (150 ml) de 1-5, y aada
lo siguiente a cada uno:
1: 100 ml de agua + 1 pez o camarn
2: 100 ml de agua + 1 caracol grande
Procedimiento (cont)
3: 100 ml de agua + 5 cm de Elodea fresca.
4: 100 ml de agua + 5 cm de Elodea fresca.
5: 100 ml de agua.
Nota: es importante tratar el agua con anticloro
antes de aadir los animales
Procedimiento (cont)
3. Tape la boca de los vasos con papel de aluminio,
excepto el vaso 4 que se cubrir por completo para
mantener la Elodea en oscuridad.
4. Coloque el vaso 3 cerca de la bombilla.
5. Despus, de 30 minutos remueva los organismos y
devulvalos a los recipientes correspondientes en la
mesa del instructor.
6. Transfiera 25 ml de la solucin del vaso 1 a un vaso
pequeo.
7. Aada cuatro gotas de fenolftalena y mezcle.

Procedimiento (cont)
8. Llene la pipeta de titilacin con la solucin de
0.0025 M de NaOH.
9. Titule hasta observar un color rosa plido
persistente, dejando caer gotas de la
solucin de NaOH en el vaso mientras
mueve este de forma giratoria para
mezclar. Previo a este punto, podr
observar que al aadir gotas de NaOH se ve
un color rosado que desaparece.
10. Anote la cantidad de NaOH que se utiliz en
la tabla 2
Procedimiento (cont)
11. Repita el proceso con los otros vasos.
12. Calcule la produccin de CO
2
para cada
vaso utilizando la siguiente ecuacin:

Produccin de CO
2
= [ml NaOH (experimental) ml NaOH (control*)] X 2.5 ml NaOH
Volumen del organismo (ml)

* Al titular agua del vaso 5.
Procedimiento (cont)
13. Coloque los resultados en la tabla 2.
Tabla 2. Resultados respiracin celular aerbica en plantas y animales
Vaso de
precipitado
Organismo NaOH
(ml)
Volumen del
organismo
(ml)
Cantidad
de CO
2

(ml)
1 Pez o
camarn
2 Caracol
3 Elodea (en
luz)
4 Elodea (en
oscuridad)
5 Agua
(control)
Procedimiento (cont)
14. Cul organismo tiene un metabolismo ms alto?
15. Cul organismo tiene un metabolismo ms bajo?
16. Qu indican los resultados?
17. Compare los resultados de Elodea en la oscuridad y
en la luz. Cul tiene una mayor tasa de respiracin
celular? Por qu?
18. Identifique lo siguiente para este experimento:
hiptesis, variables dependiente e independiente,
rplicas, control.