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INTRODUCCIN

Marco teorico:
El proceso por el cual las clulas degradan las molculas de alimento para
obtener energa recibe el nombre de RESPIRACIN CELULAR.
Este implica el desdoblamiento del cido pirvico (producido por la gluclisis)
en dixido de carbono y agua, junto a la produccin de molculas de adenosn
trifosfato (ATP).
En otras palabras, la respiracin celular supone un proceso metablico
mediante el cual las clulas reducen el oxgeno y producen energa y agua.
Estas reacciones son indispensables para la actividad celular.
La liberacin de energa se desarrolla de manera controlada. Una parte de
dicha energa se incorpora a las molculas de ATP que, gracias a este proceso,
pueden utilizarse en procesos endotrmicos como el anabolismo (el
mantenimiento y desarrollo del organismo).
Es posible dividir la respiracin celular en dos tipos: la respiracin aerbica y
la respiracin anaerbica.
La respiracin aerbica, cuenta con la presencia de oxgeno, la etapa siguiente
de la degradacin de la glucosa es la respiracin, es decir la oxidacin
escalonada del cido pirvico a dixido de carbono y agua.
Se cumple en dos etapas: el ciclo de Krebs y el transporte de electrones y la
fosforilacin oxidativa (estos dos ltimos procesos transcurren acopladamente).
En las clulas eucariotas estas reacciones tienen lugar dentro de las
mitocondrias; en las procariotas se llevan a cabo en estructuras respiratorias de
la membrana plasmtica.
La respiracin anaerbica, consiste en que la clula obtiene energa de una
sustancia sin utilizar oxgeno; al hacerlo, divide esa sustancia en otras; a la
respiracin anaerbica tambin se le llama fermentacin. Probablemente la
respiracin anaerbica ms conocida sea la de las lavaduras de la cerveza,
que son hongos unicelulares.
Existen dos tipos de respiracin anaerbica: la fermentacin alcohlica y la
fermentacin lctica.
Fermentacin alcohlica
El cido pirvico formado en la gluclisis se convierte anaerbicamente en
etanol.
En el primer caso se libera dixido de carbono, y en el segundo se oxida el
NADH y se reduce a aceltaldehdo.
Este tipo de fermentacin ocurre en levaduras y algunas bacterias.
Produce CO2 y alcohol etlico, ambos son usados en la produccin del pan y
de
la
cerveza.
Alcohlica: 2 cido pirvico + 2 NADH = 2 etanol + 2 CO2 + 2
NAD+

Fermentacin lctica
Es una ruta metablica anaerbica que ocurre en el citosol de las clulas, en la
cual se oxida parcialmente la glucosa para obtener energa y donde el producto
de desecho es el cido lctico.
Este proceso lo realizan muchas bacterias, hongos y muchos tejidos animales.
En el caso de las clulas musculares, la fermentacin lctica, se produce como
resultado de ejercicios extenuantes durante los cuales el aporte de oxgeno no
alcanza a cubrir las necesidades del metabolismo celular. La acumulacin del
cido lctico en estas clulas produce la sensacin de cansancio muscular que
muchas veces acompaa a esos ejercicios.
En esta reaccin el NADH se oxida y el cido pirvico se reduce
transformndose en cido lctico
Lctica: 2 cido pirvico + 2 NADH = 2 cido lctico + 2 NAD+

OBJETIVOS:
1 Comprende los procesos de respiracin celular.
2 Investiga el efecto de un antimetabolito en la respiracin celular.
3 Demuestra la accin de algunos carbohidratos como los facilitadores de
la respiracin anaerbica.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Materiales:
Materiales del laboratorio

9 tubos de ensayo pequeos


9 tubos de base grandes
Agua destilada
Solucin de glucosa al 5%
Solucin de fructuosa al 5%
Solucin de sacarosa al 5%
Solucin de almidn al 5%
3mL de NaF 0.01 molar
3 mL de NaF 0.10 molar
Pipetas
Gradilla
Varilla de vidrio
Plumn marcador para vidrio
Incubadora a 37C

Materiales del estudiante

Levadura seca
Regla milimetrada

Procedimiento:
Fabricacin de un Respirmetro artesanal
Se llen con agua uno de los pequeos tubos de ensayo (en el experimento se
us la suspensin de levaduras y las otras sustancias en lugar de agua). Se
invirti el tubo de ensayo sobre el tubo de base plana. Se hizo rpidamente, de
tal manera que se derrame la menor cantidad posible de lquido del tubo de
ensayo. Hubo una burbuja de aire y se midi con la regla graduada en
milmetros; este contuvo clulas de levadura respirando, el dixido de carbono
se tendi a acumular y se desplaz as ms lquido. Despus de un rato, el
volumen de la cmara de aire constituy una medida de la cantidad de
respiracin a la que tuvo lugar.

Preparacin de las muestras experimentales


1. Preparacin de muestras utilizando diferentes carbohidratos
Se rotularon los tubos de ensayo numerndolos del 1 al 5 por el lado
curvo, se mantuvieron boca abajo mientras se inscriba el nmero. Se
llen como indica la siguiente tabla:
REACTIVO

Levadura

3mL

3mL

3mL

3mL

3mL

Agua
destilada

5mL

Glucosa

5mL

Fructuosa

5mL

Almidn

5mL

Sacarosa

5mL

2. Preparacin de muestras utilizando antimetabolitos


Se rotularon los tubos de ensayo numerndolos del 1 al 5 por el lado
curvo, se mantuvieron boca abajo mientras se inscriba el nmero. Se
llen como indica la siguiente tabla:
REACTIVO

Levadura

3mL

3mL

3mL

3mL

Agua
destilada

5mL
5mL

2mL

2mL

Glucosa
NaF (0,01 M)
NaF (0,10 M)

3mL
3mL

Se llenaron los tubos hasta el borde.


Se invirti cada tubo de ensayo dentro de un tubo de base plana para
armar el respirmetro. Se midi la cmara de aire formada y se anotaron
los resultados en la tabla de esta pgina como lectura inicial.
Se llevaron los respirmetros a una incubadora a 37C durante una
hora. Se volvi a medir la cmara de gas de cada tubo y se anotaron los
resultados bajo la columna lectura final en la misma tabla.

Resultados
Se enumer los tubos de ensayo y se coloc 3mL de levadura a cada
uno.

Se llen cada tubo de ensayo con su respectivo solucin de ambas


muestras:
Los tubos de la primera muestra:
#1 tubo - 5mL de agua destilada
#2 tubo - 5mL de glucosa
#3 tubo - 5mL de fructuosa
#4 tubo - 5mL de almidon
#5 tubo - 5mL de Sacarosa

Los tubos de la segunda muestra:

#1 tubo - 5mL de agua destilada


#2 tubo - 5mL de glucosa
#3 tubo - 2 mL de glucosa y 3 mL de NaF (0,01M)
#4 tubo - 2mL de glucosa y 3mL de NaF (0,10 M)

En el caso de la mesa #1 se encargaron de realizar la primera


muestra.

Se invirti cada tubo de ensayo del primer experimento en un tubo de


base plana para armar un respirometro. Se midi con una regla
milimitrada la burbuja de aire del respirometro y se anoto en la
columna Longitud inicial de la tabla de resultados.

Se coloc los respirometros en una gradilla que posteriormente se


llevo a la incubadora por aproximadamente 1 hora a 37C.

Se retir la gradilla con los respirometros de la incubadora. Se


observ y se volvi a medir la cmara de gas de cada tubo y se
anoto los resultados en la columna Longitud Final en la misma
tabla.

Se hall la produccin de CO2 restando la longitud final de la longitud


inicial y se anoto en la columna final de la tabla de resultados.
Tabla de resultados de la muestra 1, fuente de carbohidratos:
Tubo

Longitud Inicial (mm)

Longitud Final (mm)

(L.final L.inicial)
(Produccion de CO2)

4.214

2.786

5.3

103.5

98.2

5.5

7.4

1.9

9.6

103.3

93.7

Tubo Mes
a

Longitud inicial
(mm)

Longitud final
(mm)

(L.final L.inicial)
(Produccion de
CO2)

M3

7.7

0.3

M3

10

101

91

M3

M3

Al

concluir la muestra 1 se compar los resultados con la mesa #2 y se


adquiri los resultados de la muestra 2 de la mesa #3:
Comparando resultados con la mesa #2, fuente de carbohidratos:
Tubo

Mesa

Longitud inicial
(mm)

Longitud final (mm)

(L.final L.inicial)
(Produccion de CO2)

M1

4.214

2.786

M2

10

M1

M2

10

270

260

M1

5.3

103.5

98.2

M2

100.4

94.4

M1

5.5

7.4

1.9

M2

M1

9.6

103.3

93.7

M2

50.5

42.5

Resultados de la mesa #3, fuente de antimetabolitos:

TABLA 1:
120
100
80
60
40
20
0

98.2

2.79

1
La cantidad de produccion de Co2

93.7

1.9

Tabla 2:

CANTIDAD DE PRODUCCIN DE C02


91

CANTIDAD DE C02

0.3

ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS:

QU PASA SI NO HAY OXIGENO?


Cuando no hay presencia de oxigeno, la glucosa sera degradada en el proceso
denominado glucolisis, y pasara a la siguiente fase que es la fermentacion
alcoholica para asi obtener alcohol, y eso es lo que se vio en esta prctica.
Se producir la combustin o oxidacin de la glucosa, el cual se convertir en
acido pirvico y luego de eso, pasara a la fermentacin. Luego de esperar 30
minutos :
EL tubo de ensayo que contena la levadura junto con la glucosa (5ml) empez
a extenderse hacia arriba, con el mismo color de la levadura, eso demuestra la
fermentacin que hubo dentro.
La levadura al juntarse con la glucosa, produjo una fermentacin alcohlica lo
cual produjo tal resultado que se demuestra en el tubo de ensayo. Y que se
midio, 260 mm (muestra de la mesa #2), esto se calcul con la diferencia de la
longitud inicial de la muestra y la flongitud final. Se repitio este procedimiento
en todos los tubos de ensayo de las muestras.
Glucosa + Levadura (Enzima)=Alcohol+CO2 (Anhdrido Carbnico)+E
Se libero CO2 y tambien se form alcohol, producto de la fermentacion
alcoholica, que se en contr en el tuvo de ensayo donde estuvo la levadura
(2do tubo de ensayo)
Se percibi un olor a chicha de jora o a queso pasado y este olor debe
corresponder a la presencia de alcohol. Donde se puede comprobar claramente
los productos de la respiracion anaerbica : CO2 y Alcohol.

POR QU EN LOS RESULTADOS SE OBTUVO DIFERENTES


CANTIDADES DE PRODUCCION DE CO2?
En la grafica #1 se puede observar que cuando se emplea la glucosa como
fuente de energia, hay una cantidad muy baja de CO2, lo cual no es pelculiar
en estos casos, lo que se esperaba fue que en presencia de glucosa debo
presentarse mayor produccion de C02 debido a que la levadura tiene una
mayor preferencia por la glucosa que con otros tipos de fuente de energia o
carbohidrato que se utiliz. Las levaduras prefieren la glucosa como fuente de
carbono, pues evolutivamente el metabolismo est ms optimizado al
catabolismo de glucosa. As, en presencia de una mezcla de fuentes de
carbono potenciales diferentes donde est presente la glucosa adaptan su
metabolismo a catabolizar prioritariamente la glucosa.
Se infiere que la razon por el cual no se haya concordado la practica con la
teoria estudiada probablemnte sea por un error de elementos utilizados durante
la practica, se infiere que puede que en vez de utilizar glucosa , se utiliz agua
por equivocacion, o probablemnte no se tap como debio el tubo de ensayo,
habido diversos factores que no podemos identificar con exactitud pero lo que
queda claro es que se debio obtener una mayor cantidad de produccion de
CO2 en la levadura cuando se mezcl con la glucosa.
l catabolismo de
Es posible darse cuenta de la diferencia de sustancias en cada tipo de azcar.
Ahora bien, en la prctica se utilizo la sacarosa (3ml) pura, sta no contiene la
amplia gama de sustancias que le ayudan a la levadura a oxidar de manera
ms eficaz y velozmente al carbohidrato, entonces le llevar ms tiempo que si
contara con algunas de estas sustancias. Otra cosa importante que se debe
tomar en cuenta es el proceso que celula de la levadura lleva a cabo para
lograr fermentar la gran gama de carbohidratos que se le atribuyen. En seguida
se esquematiza de manera general la manera en la que la celula de la levadura
asimila cada carbohidrato:

Es posible darse cuenta de la diferencia de sustancias en cada tipo de azcar. Ahora


bien, entre ms sacarosa contenga el azcar, menor ser la cantidad de nutrientes,
vitaminas y enzimas que ayuden a la asimilacin de estas sustancias; lo que nos hace
pensar que si el sustrato que se utiliz en la prctica era sacarosa pura (as se
sealaba en la etiqueta del frasco en el laboratorio) .y como ya se dijo sta no contiene
la amplia gama de sustancias que le ayudan a la levadura a oxidar de manera ms
eficaz y velozmente al carbohidrato, entonces le llevar ms tiempo que si contara con
algunas de estas sustancias.
http://www.feriadelasciencias.unam.mx/anteriores/feria21/feri
Otra cosa importante que se debe tomar en cuenta es el proceso que S. cerevisiae lleva
a283_01_efecto_del_sustrato_en_la_liberacion_de_co2_por
a cabo para lograr fermentar la gran gama de carbohidratos que se le atribuyen. En
_s_.pdf

seguida se esquematiza de manera general la manera en la que S. cerevisiae asimila


cada carbohidrato.

EXPLICACIN DEL ESQUEMA, SEGUIDO DE LA EXPLICACIO DE LA


En este esquema, resaltan algunas ideas como lo es el proceso enzimtico necesario
CANTIDAD
DE PRODUCCION DE C02 DE LA SACAROSA.
para que algunos carbohidratos puedan ser asimilados por la levadura. Se resalta el

hecho de que
los disacridos
estnideas
unidoscomo
mediante
enlaces
glucosdicos,
stos
En este esquema,
resaltan
algunas
lo es
el proceso
enzimtico
mismos
confieren
propiedades
caractersticas
a
los
hidratos
de
carbono,
entre
ellos,
necesario para que algunos carbohidratos puedan ser asimilados pordela
levadura. Se resalta el hecho de que los disacridos estn unidos mediante
enlaces glucosdicos, stos mismos confieren propiedades caractersticas a los
hidratos de carbono, entre ellos, de 16 aqu la capacidad de la celula de la
levadura para fermentar ciertos sustratos como; en la sacarosa donde el tipo de
enlace que une a la glucosa y a la fructosa es alfa (12), el cual se rompe
gracias a la accin de la enzima invertasa, misma que est incluida en la celula
de la levadura, produiendo liberacin de CO2 y alcohol.
En el caso del agua destilada que se empleo con la levadura, vemos en la
grafica un produccin de CO2 relativamente bajo, y esto es debido a:

(2) los azucares que no son glucosa para poder ser metabolizados
deben convertirse en algun intermediario que pueda ser sintetizados
ej: lactosa----glucosa +galactosa(debe convertirse en algun
intermediario).

Y esta cita textual nos da la explicacin acerca de porque la sacarosa si pudo


lograr la fementacion, porque hay un intermediado

en las muestras usando diferentes carbohidratos:


-en el tubo #1 no hay respiracin celular debido a que slo hay levadura y
agua, es decir no hay carbohidratos para degradar y no pasa la glucolisis.
- en el tubo #2(levadura y glucosa) hay respiracin celular debido a que la
glucosa pasa a glucolisis, que produce piruvato y genera grandes cantidades
de CO2.
- en el tubo #3 (levadura y fructosa) la fructosa est presente en la gluclisis
por la tanto genera piruvato que genera la fermentacin alcohlica (evidenciado
por el aumento de CO2)
- en el tubo #4(levadura y almidn) el almidn, debido a su alto peso molecular,
la clula no tubo las enzimas para convertirlo en glucosa, por lo tanto, no pudo
lograr hacer glucolisis en el tiempo que se le dio.
- en el tubo #5(levadura y sacarosa) la sacarosa es un disacrido formado por
glucosa ms fructosa; por lo tanto hay respiracin celular debido a que hay 2
monosacridos y estos son degradados en la gluclisis, por lo tanto generan
piruvato que provoca la fermentacin alcohlica: esto se evidencia por
el gran aumento de CO2.
en las muestras utilizando antimetabolitos:
- en el tubo #1 (levadura y agua destilada) no ocurre respiracin celular debido
a que no hay carbohidratos que degradar.
- en el tubo #2 (levadura y glucosa) ocurre -debido a la glucosa-la gluclisis,
generando 2 piruvatos y estos provocan la fermentacin alcohlica, esto se
evidencia por el aumento de CO2.
- en el tubo #3(NaF al 0.01M, glucosa y levadura) el fluoruro de sodio es el
antimetabolito, es decir, inhibe la respiracin celular y acta a nivel de la
gluclisis, haciendo que la respiracin celular sea mnima, esto se evidencia
por la poca produccin de CO2.
- en el tubo #4(NaF al 0.1M, glucosa y levadura) hay mayor grado de inhibicin,
por lo tanto la respiracin celular es casi nula, esto pasa por el alto grado de
concentracin del antimetabolito.

CONCLUSIONES:
1. Pudimos ver el proceso de respiracion celular empleando levadura y por
lo tanto fue una respiracion anaerobica o tambien llamando fermentacion
alcoholica.
2. Pudimos corroborar que existen inhibidoroes capaces de bloquear el
proceso de glucolisis, en este caso empleamos el NaF, que es un
inhibidor que actuba inhibiendo el paso de la produccion de
2FOSFOGLICERATO -FOSFOENOLPIRUVATO
3. Si es que no hay carbohidratos que degradar, no ocurre la respiracin
celular.
4. Si la solucin es de alto peso molecular, se demora ms en realizar la
fermentacin.
5. La glucosa facilita la respiracin celular.

6. El fluoruro de sodio es inhibidor de la respiracin celular. A mayor


concentracin de NaF ms inhibicin para la respiracin celular.

Bibliografas:
De J, del Pino, R. Alvis, D. Liviac, G. Guilln, Biologa Celular y Molecular.2015
De Roberts, Hib&Ponzio. Biologa celular y molecular de Roberts. 15ed.Buenos
Aires: Editorial El Ateneo; 2008.
Curtis, Barnes, Sheneck & Massarini. Biologa. 7 ed. Santiago de Chile,
Editorial mdica Panamericana, 2009.
(1) es.slideshare.net,
Biologa
general.
Ciencias
Agronmicas
UES:
es.slideshare.net;
2012.
Disponible
en:
http://es.slideshare.net/berosagon/respiracion-celular-12607327
(2) genomasur.com, Respiracin celular. Silvia Mrquez: genomasur.com; 2013.
Disponible en: http://www.genomasur.com/lecturas/g.htm
(3) blogspot.com, Respiracin celular. Natalia Bernal: blogspot.com; 2011.
Disponible en: http://larespiracioncelular.blogspot.com/2010/07/fermentacionlactica-y-alcoholica.html