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Optimización, purificación y caracterización de

lacasa a partir de hongos lignocelulolíticos

Dichotomopilus funicola NFCCI 4534 Alternaria padwickii NFCCI 4535


Residuo Lignocelulósico Agroindustrial
Mejora en la producción de la enzima lacasa
Físicos Nutricionales
• Período de incubación • Carbono
• Temperatura • Nitrógeno
• pH • Fuente de vitaminas
Materiales y métodos

Residuos de plátano recolectados

Dilución de

0.1 mL pipeteado y distribuido en el medio


de aislamiento

Incubados a 28°C por 6 días

Ácido o antibióticos fueron agregados para


* Aislamiento del hongo evitar el crecimiento de bacterias
Materiales y métodos

50 mL del caldo en un
Aislamientos fúngicos Matraz inoculado con
matraz se llevaron al
inoculados con agar y hongos productores de
autoclave a 121°C por
guayacol al 0.02% lacasa
15 min

Incubados a 28°C por 6 Actividad de la enzima


Enzima cruda filtrada
días lacasa

* Detección de hongos
potenciales
Materiales y métodos

Medio llevado al
20 mL de medio de Extracto libre de
autoclave e
Asther y sustrato células obtenido a
inoculado con
sólido lignoceluloso partir de filtración
hongos

El filtrado se Lo flotante fue


centrifugó a 10,000 utilizado para
rpm por 10 min a propósitos
4°C analíticos

* Producción de lacasa
Optimización de parámetros del proceso de fermentación para la
producción de lacasa bajo fermentación de estado sólido

Sustratos sólidos: paja de Temperatura:


arroz, coco, cáscaras de Período de incubación:
24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, pH: 4-8
cítricos, plantas de plátano 2, 4, 6, 8, 10, 12 y 14 días
y flores de caléndula 38 y 40 °C

Fuentes de Carbono:
Fuentes de Nitrógeno: Fuentes de vitamina: B1,
galactosa, lactosa, manosa,
nitrato de amonio, nitrato de B2, B3, B5, B6, B7, B9,
ribosa, fructuosa, xilosa,
sodio, peptona, extracto de ácido amino benzoico,
maltosa, sucrosa, celulosa,
carne, extracto de res, otras vitamina C y rutín hidratado
otras
De 5 cultivos positivos, sólo 2
demostraron ser los mejores
productores de lacasa después de
la detección cuantitativa.
Conclusión
Máxima producción de lacasa

Dichotomopilus 8 días de incubación


funicola
24°C
Celulosa de carboximetil
Extracto de carne
Riboflavina B2
Alternaria 4 días de incubación
padwickii
32°C
Galactosa
Nitrato de sodio
Riboflavina B2

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