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*ELISA (acrónimo del inglés Enzyme-Linked

ImmunoSorbent Assay, ‘Ensayo por


Inmunoabsorción Ligado a Enzimas’) es una
técnica de inmunoensayo en cual un antígeno o
anticuerpo inmovilizado se detecta mediante
un Ac o Ag enlazado a una enzima capaz de
generar un producto detectable como cambio
de color, o incluso fluorescente.


 Competitivo

 No competitivo
 Directo
 Indirecto
 Sándwich


*En este método, el anticuerpo de la muestra va
a competir con el conjugado por un número
limitado de sitios de unión del antígeno. Habrá
ausencia de color en una muestra positiva
debido a que el sustrato no encontrará a la
enzima porque el conjugado ha sido desplazado
por el anticuerpo presente en la muestra.


*Consiste en enfrentar la muestra con el
antígeno o anticuerpo que está en la fase
sólida. Si una muestra es positiva se formará el
complejo antígeno-anticuerpo y al agregar el
conjugado reaccionará con el respectivo
sustrato desarrollando color.


*En este se fija el antígeno al soporte, se lava
para eliminar los no fijados, luego se adicionan
los anticuerpos marcados con la enzima para
que reacción con el antígeno y que solubilizado
el complejo, se lava para eliminar anticuerpos
que no reaccionaron y se agrega un sustrato
específico para la enzima, al final se observa la
coloración.


*En este la diferencia viene dad que a nivel que
el elemento marcado por la enzima es un
anti- anticuerpo que va a reaccionar con el
anticuerpo, que reacciono junto al antígeno
previamente fijado; finalmente agrega un
sustrato específico para la enzima, se lava y se
observa la coloración.


*En esta forma, la placa suele ya venir con un
anticuerpo fijado (monoclonal ó policlonal)
frente al antígeno problema, sobre el que se
añadirá el macerado del órgano sospechoso,
que en caso de reaccionar con el anticuerpo de
la placa, será puesto en evidencia tras la
adición del segundo anticuerpo marcado con la
enzima. Por último, se añade el substrato
para revelar la reacción.


*Enfermedades producidas por *Enfermedades producidas por
parásitos Micoplasmas
* Babesias y tripanosomas *Enfermedades producidas por
* Toxocara canis bacterias
* Toxoplasmosis * Mycobacterium tuberculosis
* Triquinosis * Brucelas
* Enterotoxinas Vibrio cholerae
* Estreptococos
*Enfermedades producidas por virus * Salmonelas
* Enfermedad de Aujeszky
* Enfermedad de Newcstle
* Fiebre aftosa


* Leucemia felina
* Peste porcina africana
* Peste porcina clásica
* Rinotraqueitis infecciosa
* Rotavirus
* Artritis vírica
* VIH
*Hormonas *Cuantificación de inmunoglobulinas
* Gonadotropina * IgG
coriónica * IgE
* Progesterona * IgA
* Testosterona
* Hormonas tiroideas

*Inmunopatología
* Anticuerpos anti-
DNA
* Factor reumatoide
* ∞
Inmunocomplejos
circulantes
*Suero
*Orina
*Heces
*Saliva
*LCR
*Otros


*Peroxidasa
*Fosfatasa alcalina
*β-galactosidasa
*Penicilinasa
*Ureasa
*Glucosa oxidasa


*Peróxido de hidrogeno
*o-dianazina
*o-fenilenodiamina (OPD)
*tetrametilbencidina (TMB)
*ácido- 2,2-acino-di-(3-etil)benzatiazolina-6-
sulfónico (ABTS)
*Paranitrofenilfosfato
*ortonitrofenil-beta–D-galactopiranosido
*Glucosa

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