Bioquímica y fisiología del

cristalino
MIGUEL ALBERTO MONSALVE REYES
Temario

1. Biología Molecular
1. Proteínas cristalinas
2. Proteínas estructurales de membrana y proteínas del citoesqueleto
3. Incremento de proteínas insolubles en agua con la edad
2. Metabolismo de carbohidratos
3. Daño oxidativo y mecanismos protectores
4. Fisiología
1. Balance de agua y cationes
5. Acomodación y presbicia
Biología molecular PROTEÍNAS CRISTALINAS
 Proteínas del
cristalino  Doble de proteínas que otros tejidos
 Fracción soluble en jóvenes es de 80%
 Aumento de fracción insoluble con la
edad
Insolubles en
Solubles en agua
agua

Insolubles en
Solubles en urea
urea (Proteínas de
α - Cristalinas β, γ - Cristalinas (proteínas
membrana
esqueléticas)
celular)
 Solubles

α - Cristalinas
 1/3 de la masa proteica
 Las más grandes del cristalino
 600-800kDa
 2 subunidades: αA y αB
(20 kDa c/u) que forman complejos de 30 subunidades aprox.
 Unión con proteínas desnaturalizadas y previenen su agregación
 Inhibir la completa desnaturalización e insolubilización de otras
cristalinas.
 “Chaperonas”
β, γ – Cristalinas (solubles)
Proteínas β
 Oligómeros compuestos por polipéptidos que
conforman dímeros y complejos de alto orden
 Codificados en 7 genes
 23-32 kDa
 Cromatografía de β:
 βH (alto peso molecular)
 βL (bajo peso molecular)
 Funciones diversas
Proteínas γ
 Las más pequeñas
 <20 kDa
 Codificada por 4 genes
 No se asocia con sus pares ni otras proteínas
Ambas proteinas y su estructura se han mantenido durante
cientos de millones de años en la evolución de los vertebrados.
 PROTEÍNAS ESTRUCTURALES DE
Biología molecular MEMBRANA Y DEL
CITOESQUELETO
 Fracción insoluble en agua de las proteínas del
cristalino

Fracción Soluble en Urea

Contiene Proteínas
citoesqueléticas (soporte del Cristalino tiene 2 tipos de filamentos intermedios inusuales
entramado)

Filamentos con cuentas o gránulos:

Vimentina: compuestos por faquinina y filensina
(específicas del cristalino).
no usuales en células epiteliales
La disrupción genética de estos filamentos
produce catarata.
 Fracción insoluble en agua de las proteinas del
cristalino

Fracción Insoluble en Urea

Contiene membranas
plasmáticas de las fibras células Proteínas asociadas:
del cristalino

MIP Proteína intrínseca principal Sufre escisión proteolítica con la edad

“Acuaporina 0”. formando un fragmento proteico de 22kDa.
Aparece cuando la fibra cristaliniana inicia su A los 20-30 años la proporción de ambas
elongación. 28kDa. proteínas es 50/50
 INCREMENTO DE LAS PROTEÍNAS
INSOLUBLES EN AGUA CON LA
Biología molecular EDAD
Glutatión Mantener un ambiente reductor en el citoplasma cristalino

Depleción de su forma reducida acelera el crosslinking,

agregación proteica y dispersión de luz

Aumento de enlaces disulfuro

Crosslinking de proteinas nucleares por enlaces no disulfuro

 Con el envejecimiento:
 Agregación de proteínas en partículas grandes
 Insolubles en agua y dispersoras de luz  opacidad del cristalino
 Conversión de soluble a insoluble en agua es un proceso natural en la maduración de las fibras que
ocurre más rápido en la catarata
 Catarata brunescente  la cantidad de proteína insoluble se correlaciona con el grado de opacidad
llegando casi al 90%.
 Cambios oxidativos:
 Uniones proteína - proteína
 Uniones proteína – glutatión
 Menos glutatión y mayor disulfuro de glutatión (oxidado) en citoplasma de las fibras nucleares
 Proteinas insolubles contienen pigmentos amarillo a café
en mayor concentración en las cataratas nucleares
 Fluorescencia aumentada se debe al crosslinks no
disulfuros que forman la catarata brunescente
Metabolismo de
carbohidratos
 Objetivos
 Mantener la trasparencia del cristalino
 Depende en su mayoría de glucosa
 La glucosa entra desde el humor acuoso, mecanismos:
 Difusión simple
 Difusión facilitada
 Fosforilación 70-100 veces más lenta que otras enzimas en la glicolisis del cristalino, tasa
de velocidad limitada

Glucosa Fosforilación Glucosa -6- fosfato (G6P)

• Enzima hexoquinasa • Glicolisis anaeróbica

• Derivación de hexosa
monofosfato (HMP)
 Glicolisis anaeróbica
 Provee la mayoría de las uniones fosfato de alta
energía (ATPs)
 Transforma glucosa a lactato
 La fosforilación del ADP a ATP ocurre en 2 pasos
 La velocidad limitada se debe a la enzima
fosfofructoquinasa.
 Control por feedback de productos metabólicos de
la ruta glucolítica
 Menos eficiente que glucolisis aeróbica (36 ATP
adicionales)
¿Por qué anaeróbica y no aeróbica?
 Baja tensión de oxígeno en el cristalino.
 3% de la glucosa hace proceso aeróbico a través
del ciclo de ácido cítrico 25% ATP cristalino
 Cristalino no depende de oxígeno
 Mitocondrias
 Podría vivir en ambiente de nitrógeno, pero con glucosa y mantener:
 Niveles de ATP óptimos
 Transparente

 Actividades de bombas iónicas y de aminoácidos

 Glucosa: nubloso en horas aún con O2.
Derivación de hexosa monofosfato (HMP)

 Menos activa
 “Vía pentosa fosfato”
 <5% de la glucosa utiliza esta ruta
 Se estimula con grandes niveles de glucosa
 Vía del sorbitol

 Entra la glucosa no fosforilada en G6P

 Aldosa reductasa:
1. Baja afinidad por la glucosa (<4% convierte en sorbitol)
2. Se activa en estados hiperglicémicos y cuando la vía glicolítica
disminuye su tasa por feedback negativo
3. Rol fundamental en catarata diabética
 Sorbitol  Fructosa
1. Enzima poliol deshidrogenasa: Baja afinidad por sorbitol
2. Sorbitol acumulado antes de ser metabolizado
3. Cristalino con baja permeabilidad al sorbitol
4. Retención de sorbitol en el cristalino
  Al acumular sorbitol, la tasa NADPH/NADH
Opacificación del
aumenta cristalino
Pérdida de
 NADH estimula la vía de derivación HMP arquitectura
Edema de fibras citoesquelética
por sobrecarga de
Atracción de agua bombas

Aumento de
presión osmótica
Glucosa abundante
en el cristalino
+ acumulación de
Fructosa
Acumulación de
Sorbitol
Daño oxidativo y mecanismos protectores

Radicales libres
• Resultado de procesos metabólicos normales y agentes externos como la
radiación
• Reaccionan con moléculas de DNA directamente por la poca
concentración de O2
• Polimerización y crosslinking de proteínas (ej. Conexinas) o lípidos de
membrana
• Aumento de proteinas insolubles
• Pocos mecanismos de reparación de daño
Daño oxidativo y mecanismos protectores
Catalisa la destrucción del anión superóxido
(malo)

Superóxido dismutasa

Produce peróxido de hidrógeno el cual se

destruye por la catalasa

Catalasa
Enzimas protectoras contra
radicales libres o daño oxidativo Cataliza la reacción que forma glutatión
disulfuro (malo) y lo reconvierte en glutatión
(bueno) por la glutatión reductasa y usando
NADPH

Glutatión peroxidasa La derivación HMP produce NADPH

El glutatión el es el principal eliminador de

radicales libres
 Vitamina E y Ac. Ascórbico están presentes en el cristalino. Eliminan radicales y protejen
de estrés oxidativo
 Exposición a oxígeno
 Terapias de oxígeno hiperbárico prolongadas causan shift miópico, opacidad nuclear y en
algunos casos catarata nuclear.
 Durante cirugía de retina
 Post vitrectomía: por daño y pérdida de la estructura del gel vítreo y de la hipoxia que protegía el
cristalino
Fisiología del MANTENIMIENTO DEL
BALANCE DE AGUA Y
cristalino CATIONES
 Cristalino normal tiene 66% agua y 33% proteina
 Corteza con mayor H2O que núcleo
 5% de H2O extracelular
 Intracristaliniano:
 Na 20 mM
 K 120 mM
 El balance H2O y electrolíticos es CRÍTICO en la transparencia del cristalino
 Relacionado con CATARATAS CORTICALES, muy poco de las nucleares
 Epitelio del cristalino  transporte activo

 Crist. Menos hidratado y mayor K y AAs que

el humor acuoso y vítreo • Sacar sodio
 Menos Na, Cl y H2O que su ambiente • Meter potasio
 Balance de cationes depende dela Bombas • Depende del consumo de
permeabilidad de membranas celulares y la Na/K: ATP
actividad de las bombas Na/K • Regulada por enzima NA,
K- ATP asa
Teoría de Bomba-Fuga
 Es la combinación del transporte activo y la permeabilidad de membrana
 K y AA son transportados activamente hacia el lente a través del epitelio del
cristalino
 Luego hay difusión  por gradientes de concentración (no activo) a la parte posterior.
 Na difunde por la parte posterior por gradiente
y luego se intercambia activamente por K en
el epitelio.
 Gradiente anteroposterior de Na (post) y K
(ant)
 Na, K-ATP asa en epitelio y fibras corticales
superficiales
 Retirar cápsula con epitelio adherido
daña mecanismos activos pero no si
solo se disuelve cápsula con
colagenasa
 Transporte pasivo en ambas
superficies
Acomodación y
presbicia
 Teoría de Helmholtz:
 La mayoría de cambios acomodativos suceden
en la superficie central anterior del cristalino.
Acomodación:
 Cápsula anterior central más delgada
Mecanismo por el cual el ojo cambia el foco de
imagenes lejanas a cercanas, ocurre por un  Fibras zonulares mas cerca al eje visual en la
parte anterior que posterior. Abulsión de región
cambio en la forma del cristalino resultante de la
anterior central.
acción del músculo ciliar sobre las fibras
zonulares.  La parte más delgada de la cápsula posterior
permanece con misma curbatura.
 El músculo ciliar, de forma anular se contrae
reduciendo su diámetro, relajando la tensión de las
fibras zonulares y permitiendo el abombamiento
del cristalino.
 Diametro ecuatorial disminuye
 Poder dióptrico Incrementa
 Mediada por fibras parasimpáticas del III par
(oculomotor)
 Pilocarpina (parasimpaticomimético) induce
acomodación
 Atropina (simpaticomimético) bloquea
acomodación
 Relajantes del M. Ciliar --> ciclopléjicos
Amplitud de la acomodación
 Cantidad de cambio en el poder refractivo del
ojo  producido por la acomodación
 Adolescentes 12.00-16.00 D
 Adulto 40 años 4.00-8.00 D
 Adulto 50 años <2.00 D
Presbicia

 Pérdida gradual de la respuesta

acomodativa resultante de la
reducción de la elasticidad del
cristalino.
 Rigidez de núcleo reduce
acomodación
 Dureza y rigidéz del cristalino
aumenta 1000 veces con el paso de la
vida.
Bibliografía

Clinical Anatomy and Physiology of the Visual System 3th Ed

Libro 11-Lens and Cataract. AAO 2019-2020