Tema I

Introducción al estudio de los agentes

biológicos de importancia médica.

Genética microbiana.
Aplicación de la biología molecular a la
Microbiología y Parasitología Médicas.

Colectivo de autores
Microbiología y Parasitología
 Objetivos

 Definir conceptos relacionados con la genética

microbiana.

 Explicar procesos genéticos de los

microorganismos relacionados con la capacidad
patogénica.

 Explicar la utilidad de la Biología Molecular para la

Microbiología y Parasitología Médicas.
 Contenidos

 Organización del genoma: genoma eucariótico,

genoma procariótico, genoma viral.
 Replicación del ADN bacteriano.
 Transposones, plásmidos, bacteriófagos.
 Mutaciones.
 Recombinación genética.
 Aplicación de la Biología Molecular a la Microbiología
y Parasitología Médicas.
 Bibliografía

 Presentación digital.
 Microbiología y Parasitología Médicas. Llop,
Valdés-Dapena, Zuazo.
Tomo I cap. 8 págs. 55 – 72
Tomo III cap. 152 págs. 619 – 630
 Genética

Es la ciencia que define y analiza la herencia o la

constancia y cambio de las funciones fisiológicas
que constituyen las propiedades de los
organismos
 ADN

Molécula helicoidal, constituida por 2 bandas

antiparalelas y complementarias.
 GEN

Unidad funcional de la
herencia

Segmento de ADN que porta

la información para
determinado carácter
(fisiológico, bioquímico,
morfológico)
 Genotipo

Conjunto de genes específicos

heredados de sus progenitores

La expresión del material genético, bajo

determinadas condiciones de crecimiento,
determina los caracteres observables

Fenotipo
Genoma Eucariótico: casi todo el genoma está en dos
cromosomas lineales, separados del citoplasma por la
membrana nuclear.

Genoma Procariótico: el genoma bacteriano varía en

tamaño, no hay membrana nuclear, con pocas
excepciones los genes son haploides y presentan un
cromosoma único constituido por una molécula circular
de ADN de doble cadena.

Genoma Viral: los virus son parásitos intracelulares

obligados, su replicación depende de la energía
metabólica y de la maquinaria sintetizadora de la célula
hospedero
 Organización del genoma bacteriano

• El cromosoma bacteriano es una molécula circular de

ADN que funciona como un elemento genético
autorreplicable (replicón)
• Hay bacterias que tiene replicones adicionales:

- Plásmidos

- Bacteriófago

Determinan resistencia antimicrobiana, producción de

factores de virulencia u otras funciones.
 Replicación del cromosoma bacteriano

Proceso semiconservativo, cada banda de ADN sirve

como molde para la síntesis de su banda complementaria.

1. Al iniciar la replicación un punto

de la cadena de ADN se une al
mesosoma

2. A partir de ese punto

comienza la duplicación de
manera bidireccional
3. La cadena recién formada se
adhiere a un punto adyacente de la
membrana

4. Comienza a formarse el tabique

que separará las dos células hijas
 Transposones

Son segmentos de ADN que pueden moverse de un

sitio a otro en una molécula de ADN o a una
molécula de ADN diferente (transposición)

No son autorreplicables, deben integrarse en otro

replicón para mantener la estabilidad en los
genomas bacterianos.

Causan mutaciones mediadas por reordenamiento

genómico (supresiones, duplicaciones, inversiones)
 Transposones
Simples:

Contienen solo la información genética necesaria

para la transposición.

Complejos:

Poseen además, genes que codifican para funciones

especializadas como la resistencia a drogas
antimicrobianas.
 Plásmidos

Pequeñas cadenas
dobles y circulares de
ADN extracromosómico

Autorreplican independientemente
del cromosoma

Determinan rasgos genéticos adicionales

 Plásmidos más frecuentes:

Plásmidos F (fertilidad, confiere la capacidad de

transferencia de genes)

Plásmidos col (información para la producción de

colicinas, toxinas letales para bacterias coliformes)

Plásmidos R (confieren resistencia a antibióticos)

Plásmidos que codifican toxinas (toxina exfoliativa

de S. aureus, toxina tetánica de C. tetani)
 Bacteriófago

 Son agentes infecciosos que se replican como

parásitos intracelulares obligados en las bacterias.
 Virus de cubierta proteica, la cápside, que
envuelve al ácido nucleico o genoma (ADN o ARN).
 Codifica las funciones requeridas para su
replicación en la bacteria, las proteínas de la cápside
y las necesarias para su ensamblaje.
 Importante en investigaciones epidemiológicas
para tipificación de bacterias (Fagotipia).
 ¿ Qué son las variaciones biológicas?

Variaciones Variaciones
fenotípicas genotípicas
CAMBIOS
temporales provocados Permanentes y
por la acción del ambiente, hereditarios
sin variación en los genes

MODIFICACIÓN MUTACIÓN
 Mutaciones

Cambios hereditarios en la secuencia

de nucleótidos de un gen

Puntuales: Múltiples:
Cambios en un par Cambios en dos o más
de bases pares de bases
 Las mutaciones puede ser:

Espontáneas Inducidas

Baja frecuencia Agentes mutagénicos físicos:

rayos gamma, rayos X, luz UV
1/1 000 000 –
1/100 000 000
Agentes mutagénicos
químicos:
pigmentos de acridina, agentes
alquilantes
 Las mutaciones puede ser:

Sustitución de un par de bases por otro

Supresión de un par de bases

Omisión
o
pérdida
Inserción de un par de bases

Inserción
Reordenamiento de bases

Reordenamiento
 Recombinación genética

Es el proceso en que tiene lugar la formación de un

nuevo ADN a partir de moléculas destruidas, de
manera que la información genética de cada
moléculas de ADN original estará presente en las
nuevas.
 Recombinación genética

• Fuente de variabilidad genética

• Intercambio físico de segmentos

• Valor regulatorio (puede activar o inactivar los genes)

• Vía de reparación
 Recombinación genética

No hay fusión de células sexuales o gametos para

formar un cigoto

Ocurre el paso de ADN

Donadora Receptora
 Mecanismos de recombinación
genética

Transformación

Transferencia de un fragmento de ADN de un genoma

donador a través de la membrana celular receptora y la
incorporación de este fragmento en el genoma de esta
célula.
 Conjugación
Paso de material genético (plásmido F) desde una célula
donante a una receptora a través de un puente de
conjugación (Pili F).
La transferencia del genoma bacteriano es una
consecuencia secundaria de la transferencia plasmídica.
 Transducción

Transferencia de material genético de una célula a

otra con la intervención de un virus bacteriano

Le confiere a la célula
bacteriana atributos de
virulencia:
• Producción de toxinas
Ej: toxina diftérica
toxina eritrogénica
toxina botulínica
 Aplicación de la Biología
Molecular a la Microbiología y
Parasitología Médicas
 Aplicaciones en el diagnóstico:

Diagnostico virológico.
Diagnóstico de bacterias no cultivables o de difícil
cultivo.
Incremento de sensibilidad cuando la muestra es
pobre en cantidad de microorganismos o sus
productos.
Necesidad de diagnóstico rápido.
 Sondas de ADN

Tienen su base en el principio de complementariedad de los

ácidos nucleicos.

El ADN de la muestra clínica (esputo, heces fecales, LCR, etc) se

conoce como ácido nucleico blanco, y la soda de ADN se refiere
a la secuencia complementaria marcada, (isótopo radioactivo,
complejo enzimático, etc)
 Utilidad de las Sondas de ADN

• Confirmar la identidad de productos de ADN

amplificados mediante PCR.
• Identificación de especies de algunos patógenos
(Legionella pneumophila)
• Identificación de factores de virulencia, así como
secuencias de genes que codifican la producción
de toxinas.
• Diagnóstico de infecciones por MO de crecimiento
lento.
• Identificación de genes que codifican resistencia a
antibióticos.
• Diagnóstico de Entamoeba histolytica, Trichomonas
vaginalis.
• Procesamiento de gran número de muestras clínicas
para realizar estudios epidemiológicos.
• Identificación de patógenos difíciles de cultivar.
 Reacción en Cadena de la Polimerasa
(PCR)

• Es una amplificación enzimática selectiva de una

secuencia específica de ADN, que permite obtener de
cada fragmento de ADN deseado dos nuevas copias.
• Tiene elevada potencialidad para detectar pequeñas
cantidades de ADN.
 Aplicaciones como método diagnóstico.

 Se puede identificar ADN de MO a partir de muestras

de biopsias tomadas por agujas finas, tejidos de
necropsias y material fósil. Además de otras
muestras (LCR, sangre, sudor, heces, orina, etc)

 Identificación de MO en medios muy diluidos.

 Diagnóstico virológico.
 Desarrollo de Vacunas
• Vacunas Recombinantes: hepatitis B

• Vacunas Conjugadas: útil para bacterias

encapsuladas (Neumococos y Haemophilus
influenzae)
• Vacunas de ADN: virus de la Rabia

• Vacunas atenuadas genéticamente: Salmonella

typhi, Vibrio cholerae.
• Vacunas de subunidades: Neisseria menigitidis A
y C de polisacáridos capsulares, Streptococcus
pneumoniae de polisacáridos capsulares.
 Desarrollo de nuevas drogas
antimicrobianas

Las técnicas moleculares son útiles para:

 Dilucidar el mecanismo de acción de los

antibióticos.
 Determinar los medios por los cuales las bacterias
se tornan resistentes.
 Obtener derivados con mayor eficacia o seguridad.