BIOLOGÍA MOLECULAR Procesamiento o maduración del arn m Los ARN mensajeros se someten a un recubrimiento en 5', un empalme, un procesamiento en el extremo 3’ y se exportan antes de la traducción en el citoplasma. Antes de que el ARNm esté en funcionamiento y produzca dichas proteínas, se lleva a cabo modificaciones en la molécula como: - Agregado del “cap” - Poliadenilación Ayuda a la molécula a mejorar su funcionamiento, evitan su degradación y mejoran su función y transporte del núcleo CAP 5’ • Modificación del extremo 5’ en el ARNm, se le adiciona un nucleótido de (G) guanina atípico con un grupo metilo. • M7G: 7-metil guanisina trifosfato, es hidrófobo y puede rechazar enzimas que pueden unirse e hidrolizar el RNAm • Desde el momento en que inicia su síntesis, el transcrito naciente esta expuesto a la presencia de nucleasas especializadas en degradar ARNm.
• Este proceso ocurre cuando el
transcrito cuenta con una longitud de 20-25 ribonucleótidos. • Requiere participación de enzimas que se encargan de realizar cambios en la estructura química del primer ribonucleótido del transcrito mediante • Esta conectado al ARNm través de un enlace trifosfato de 5′. Esta guanosina se metila (Adición CH3) en la posición 7 directamente después del capping in vivo con una metiltransferasa. Se lo conoce como CAP de 7-metilguanosina m7G. • Este proceso es conocido como recubrimiento de ARNm. • El proceso de protección se inicia antes de que se complete la transcripción, ya que se sintetiza el pre-ARNm naciente. Enzimas necesarias para conformar capping Guanil transferasa Metil transferasa trifosfatasa Por que es importante 5’cap? • Regulación de la exportación nuclear • Mayor resistencia a las exonucleasas 5 ‘ • Promueve el empalme del ARNm • Recluta factores de procesamiento de ARN y factores de traducción. • Sin un límite de 5 ', no se producirán niveles apreciables de traducción • Maduración y estabilidad del trasncripto. • Estructura reconocible por el ribosoma para iniciar la TRADUCCIÓN Caperuza Caperuza del tipo 0: se Caperuza del tipo 1: se del tipo 2: se produce por obtiene cuando metilación en produce sobre una cuando una el N-7 de la caperuza tipo 0 guanosina caperuza tipo 1 se metila el 2’- se metila en el terminal. Es la OH del primer caperuza 2’-OH de la nucleótido ribosa mínima que se original. encuentra en siguiente. Es los mRNA habitual eucariotas. encontrarla en Esencial para los snRNA, y traducción Es esencial sólo se suele eficiente para evadir encontrar en respuesta los Cap0 se inmune innata vertebrados, y reconoce como celular, solo está en un viral y se aumentando 10-15% de los silencia rápido. así vida media transcritos. del ARNm. RNA POLIMERASA II: Sintetiza rnaM • Trabaja de 5’ a 3’. • Comienza la transcripción, agrega una capa metilada al final de 5’. • Una vez completada, la ARN polimerasa libera la hebra protegida de pre-ARNm • Las secuencias de nucleótidos específicas en el ARNm están unidas por factores de escisión. • Es una enzima que tiene unida grupos de proteínas que participan en el capuchón. • Proteínas son reguladas por la POLIMERASA II poliadenilación - Base nitrogenada: - Proceso que ocurre adenina cuando se finaliza la síntesis de RNAm en el extremo 3’ - Consta de larga fila 150 a 200 residuos de adenina por e de nucleótidos de poliadenilados POLI A POLIMERASA:
• la poli A polimerasa ahora se une al ARNm y
divide el extremo 3 '. • La adición por el extremo 3’OH de una cola de poli A • Esta cola de poli A consiste en la adición de 150 a 250 residuos de adenina por el extremo 3’ OH por la poli A polimerasa. • Una endonucleasa corta el ARN y después una poli A polimerasa añade la cola de poli A. Proteínas específicas - Localizadas en la región codificante. - Factor específico de corte y poliadenilación CPSF se une a la señal de poliadenilación AAUAAA y el factor de estimulación del corte CstF reconoce una región rica en U. - Se reclutan los factores de corte Im y IIm y se realiza el corte del ARN. - Posteriormente, la poli A polimerasa asistida por una proteína de unión al Poli A cataliza la elongación de la cola poli A en el extremo cortado. Función • Evitar la degradación del ARN por ese extremo e intervenir en el transporte del ARN hacia el citoplasma. • La cola poli A es crítica para conferir al ARNm estabilidad y capacidad de salir del núcleo y ser traducido en proteína • Fase finalización ARN POLIMERASA, reconoce unas secuencias de terminación y se libera el ARN de la hebra de DNA AAUAAA: señal de poliadenilación. Se añade cola poli A formada por una poli A polimerasa