UNIVERSIDAD MICHOACANA DE

SAN NICOLÁS DE HIDALGO

FACULTAD DE
QUÍMICO FARMACOBIOLOGÍA

INMUNOLOGÍA II
TEMA: QUIMIOLUMINISCENCIA

ORIENTACIÓN: ANÁLISIS BIOQUÍMICO CLÍNICO Y MICROBIOLÓGICO

PROFESOR: M.C. MARIA REBECA TINOCO MARTÍNEZ
EQUIPO NO. 06 SECCIÓN: 03
•DÍAZ VILLALOBOS DIANA 1584248K 10° SEMESTRE
•MOLINA MEDINA ALMA DANAE 1209918D

MORELIA, MICH. 06/03/2020

QUIMIOLUMINISCENCIA

FOTOLUMINISCENCIA
 QUIMIOLUMINISCENCIA
Tipos de luminiscencia:

Bioluminiscencia. Emparentada a organismos vivos.

Fotoluminiscencia. También conocida como fluorescente, la sustancia es
estimulada por fotones de luz.
 QUIMIOLUMINISCENCIA

QUIMIOLUMINISCENCIA
 QUIMIOLUMINISCENCIA

CLASIFICACIÓN:

❖ Directa
❖ Indirecta
 QUIMIOLUMINISCENCIA
Directa

Fase sólida Muestra, calibradores,

Antígeno recombinante controles
recubierto con partículas Autoanticuerpos específicos
magnéticas

Emplea como fase sólida, micropartículas paramagnéticas recubiertas de

anticuerpos específicos contra la sustancia a analizar y como marca el éster de
acridina. Se caracteriza por la emisión de luz visible debido a una reacción química
producida por la oxidación del éster de acridina empleado como marca.
QUIMIOLUMINISCENCIA
 QUIMIOLUMINISCENCIA

FUNDAMENTO DE LA TÉCNICA

Permite la cuantificación de una sustancia, sobre el

basamento de la reacción antígeno anticuerpo, empleando
un marcador como indicador de la reacción que puede ser
el éster de acridina u otro.

En combinación con los reactivos: peróxido-ácido e

hidróxido de sodio, en contacto con la muestra y el
analizador proporcionan la reacción quimioluminiscente.

Marcador: éster de acridina (u otro).

Agente oxidante: Peróxido ácido.
Hidróxido de sodio: cambio de Ph.
 QUIMIOLUMINISCENCIA
Luminómetro.
Instrumentación: una célula de reacción, un compartimento cerrado a la luz, un dispositivo
de inyección y mezcla de reactivos y/o de muestra, un detector de luz, un sistema de
adquisición y procesador de señal.

Configuración esquemática de un luminómetro.

 QUIMIOLUMINISCENCIA

Instrumentación básica

a) Introducción de la muestra y los reactivos

b) Célula de reacción
c) Detector
d) Acondicionamiento de la señal y manipulación de la
lectura
 QUIMIOLUMINISCENCIA
1.- Las muestras y reactivos son
aspirados mediante una aguja, son 2.- La cubeta se
pipeteados de acuerdo con parámetros incuba a 37°C
3.- Se efectúa lavado
validados para cada ensayo y de agujas.
durante 10’.
transferidos a la cubeta donde se lleva
a cabo la reacción.

5.- Se resuspende la fase sólida 4.- Se transfieren al modulo de

6.- Se mediante agitación y se añade el lavado en el que la fase sólida
(partículas magnéticas) es lavada
efectúa otro conjugado a las cubetas que son
transferidas al carrusel para otra mientras es inmovilizada
lavado mediante un imán.
incubación de 10’.

7.- La muestra se transfiere Cuando la medición se

a un luminómetro en el que completa, las cubetas son
se añaden los reactivos rechazadas automáticamente FUNCIONAMIENTO
catalizadores para producir y enviadas a un recipiente de DEL EQUIPO
la quimioluminiscencia desechos
 QUIMIOLUMINISCENCIA

Lectura:
Tras la realización del ensayo, se mide la luminiscencia emitida por la
muestra en un fotómetro de quimioluminiscencia.

Para cuantificar un analito determinado por este método, el sistema

inyecta un reactivo 1 y después el reactivo 2 en las cubetas de análisis
conteniendo la mezcla de reacción.

Esto dispara la reacción que resulta en la emisión de fotones de luz.

El fotomultiplicador (PMT), un fotodetector, detecta los fotones de luz
emitida y los convierte en pulsos eléctricos.

Los sistemas cuentan estos pulsos eléctricos, leen y los resultados son
comparados en una curva madre definida para cada ensayo,
finalmente el sistema emite su cálculo de la concentración del analito
determinado

http://repositorio.utmachala.edu.ec/bitstream/48000/9967/1/BENAVIDES%20LOJA%2
0KATERINE%20VANESA%20%281%29.pdf
QUIMIOLUMINISCENCIA
Tipo de muestra:
Suero
QUIMIOLUMINISCENCIA
 QUIMIOLUMINISCENCIA

Ventajas.

⮚Evitan desechos tóxicos.

⮚Sistemas accesibles, cuentan con lector de código de barras.
⮚Trabajan al menos 5 perfiles de pruebas a una misma muestra, sin
necesidad de medir o montar 5 veces la misma muestra.
⮚Capacidad para trabajar de urgencia sin interrumpir el trabajo ya
programado en proceso obteniéndose el resultado de la urgencia en el
mínimo de tiempo independientemente de las otras muestras
programadas.
⮚El rango de tiempo para la obtención de los resultados de los perfiles va
de 15 a 50 minutos, por ejemplo: un perfil tiroideo se obtiene en 20 o 40
min., perfil ginecológico igual, un VIH en 20 minutos, una GCH en 17
minutos, etc
 QUIMIOLUMINISCENCIA

⮚El sistema reporta los resultados tanto de muestra impresa como en

pantalla y se puede consultar momento aunque se encuentre trabajando.
⮚ Se puede obtener de la memoria resultados de días anteriores ya que
posee una memoria para 100 resultados.
⮚Las curvas de calibración pueden ser consultadas en cualquier
momento y obtener su reporte impreso, lo que constituye un soporte para
la confiabilidad de los resultados.
⮚Los sistemas cuentan además con una función especial para el control
de calidad de todas y cada una de las pruebas que realiza con la
posibilidad de obtener un reporte impreso diario, semanal, mensual, por
lotes de reactivos de manera específica, etc.
 QUIMIOLUMINISCENCIA

https://www.alibaba.com/product-detail/High-Quality-Integrated-Automatic-Chemi
luminescence-Immunoassay_62051246735.html?spm=a2700.7724857.normalList.1
.476798ad0xTKVe
 QUIMIOLUMINISCENCIA
BIBLIOGRAFÍA
⮚UN PRINCIPIO INNOVADOR
Tecnología basada en CLIA (Chemiluminescence enzyme immunoassay)
https://www.menarinidiag.es/es-es/home/productos-para-laboratorio/autoinmu
nidad/zenit-ra/caracter%C3%ADsticas/advantages

⮚https://digibug.ugr.es/handle/10481/28259

⮚http://www.elhospital.com/temas/Sistema-de-inmunoensayo-por-quimioluminiscen
cia-CL-1000i+113753

⮚http://www.gematec.com.ar/equipos/maglumi-800/

⮚http://katnishzescience.blogspot.com/2011/01/principios-de-la-quimioluminiscencia.html

⮚GARCÍA RODRÍGUEZ Carmiña, MARTINEZ MALDONADO Ivon. VENTAJAS DEL MÉTODO DE

QUIMIOLUMINISCENCIA FRENTE AL DE RADIOINMUNOANÁLISIS (RIA). Vis cienti.  [revista
en la Internet]. 2009  [citado  2020  Mar  05] ;  1(2): 60-68. Disponible en:
http://www.revistasbolivianas.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2222-
43612009000100010&lng=es.