PCR

(REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA)

ANGEL MANUEL EHUAN CANCHE

MÉTODO DE REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA

• El método de reacción en cadena de polimerasa o PCR es una técnica muy eficiente cuando
se requiere amplificar con mas velocidad un segmento especifico de ADN.
• A continuación explicaremos de forma breve este método que fue descubierto en 1983 por
Kary B. Mullis lo que lo hizo ganador de un premio nobel en 1993.
• Esta técnica se utiliza para identificación genética a partir de una porción mínima de sangre,
pelo o semen, entre otras muestras.
• Cada ciclo de replica consta de cuatro fases, a saber:
 1. DESNATURALIZACION

• Es un tobo de ensayo se introducen cadena doble de

ADN con la secuencia exacta que se requiere copiar
las enzimas ADN polimerasa establece al calor, los
nucleótidos necesarios y las cadenas cortas de ADN,
que se utilizan como colaboradores para poder
realizar las copias.
• Al calentar las cadenas de ADN a 96°C, estas se
separan.
 2. HIBRIDACIÓN

• En este proceso se enfrían las cadenas para

permitir que los segmentos cortos de ADN
(que sirven de colaboradores) pueden formar
enlaces de hidrogeno con los extremos de la
secuencia diana (el segmento que se quiere
duplicar).
 3. EXTENCION

• En esta fase se eleva la temperatura hasta 72 °C

con el apoyo de la enzima ADN ´polimerasa (taq
polimerasa), la cual es termoestable a
temperatura elevada, en las que no funciona el
ADN humano o de otros organismos.
• Esta enzima extiende los colaboradores y
sintetiza nuevas cadenas de ADN que pueden
ser aplicables en la genética molecular.
 4. RESULTADOS

• Con electroforesis en un gel de agarosa se

preparan los fragmentos amplificados.
• Posteriormente se tiñe con material radiactivo
o fluorescente para que puedan observarse con
la luz ultravioleta a fin que el experto los
interprete.
• Con esta técnica se puede realizar diversos
análisis como los estudios de ADN de
fósiles, la clonación de genes, el test de
paternidad, el diagnóstico de enfermedades
hereditarias, la huella genética y la
obtención de genotipos con distintos fines,
entre otros

• para obtener la huella genética se puede

sintetizar de la manera siguiente: se extrae el
ADN, se copia por esta técnica, se separa por
electroforesis y se fotografía la posición del ADN
de longitud y peso variables limitados por sitios
de restricción (RFLP) mediante tinción.