Disminucin de taninos en t de

Neem a partir de tanasas de

Aspergillus niger mediante
fermentacin en cultivo sumergido
Ingeniera en Biotecnologa
Equipo:
Casillas lvarez Jahely
Estrada Valenzuela Mara Concepcin
Garca Gonzlez Mara de los ngeles
Montano Silva Paul Alejandro
Navarro Barrn Iris del Roci
Ponce Moreno Ofmara Mara
Asesores:
Omar Alejandro Rubio Hernndez
Febe Elizabeth Vargas Arriaga
Mara de los ngeles Barrn Garca
rbol de Neem
rbol de rpido crecimiento

Puede alcanzar 15 a 20 metros de altura y
raramente 35 a 40 m
Abundante follaje todas las temporadas
del ao
Tallo de hojas mide de 2 a 4 dm de
longitud, con 20 a 31 hojas verde oscuras
de 3 a 8 cm de longitud
Mrgenes de las hojas maduras estn
dentados
(Healthy People, 2010.)
http://www.arboldeneem.com/
Consumo de Neem en el mundo
Distribucin mundial de rbol de Neem
Origen:
incierto
(India,
Suroeste de
Asia)
Actualidad:
distribuido en
ms de 78
pases
Propiedades curativas
Las diversas partes del Neem o sus aceites, han sido utilizados
para tratar diversos males:

Soriasis: disminuye la comezn y el dolor, a la vez que reduce la
costra y el enrojecimiento de las lesiones.
Diabetes: puede llegar a reducir los requerimientos de insulina entre un
30% y un 50%, y muestra excelentes beneficios a los no insulino-
dependientes.
Alergias: inhibe las reacciones alrgicas mejorando las condiciones de
ojos llorosos, lagrimeo y estornudos.
Hongos: combate algunos hongos incluyendo los que causan pie de
atleta.
Dolor de odos: acta sobre los receptores que producen el dolor,
desinflama y mata la bacteria que ocasiona el dolor de odos.
(Arias, 2009)
T de Neem
Hecho con corteza u hojas de Neem.
Sabor sumamente amargo y
astringente
Receta tpica solo utiliza 2 hojas de
Neem por litro de agua.
(Revista Conect,2009)
http://www.renemey.org/revista/2012-
06/files/assets/downloads/page0010.pdf
Taninos hidrosolubles y taninos condensados
Clasificacin tradicional de los taninos
Taninos
galotaninos elagitaninos taninos complejos taninos condensados
Aspergillus niger
Kozakiewicz, 1989 menciona:
Los mohos del gnero Aspergillus causan el deterioro de muchos productos
alimenticios.
Daz y Quiroga (2005) nos comentan:
Aspergillus niger (Van Thieghem, 1867), es un microorganismo que pertenece
al gnero fngico. Microscpicamente las colonias son inicialmente blancas,
posteriormente negras con un reverso amarillo.
Klich & Pitt, 1992 comentan:
Principales caractersticas de Aspergillus niger son: conidios de color negro,
pueden tener medula, su vescula es globosa, su conidiforo es liso.
Lizrraga et al, 2010 dice:
Entre las fuentes microbianas de enzimas, Aspergillus niger es uno de los
microorganismos ms utilizados en la produccin de enzimas industriales, debido
a sus niveles altos de secrecin de protena y a su condicin GRAS (generally
regarded as safe).
Pandey, 2008 comenta:
Entre los muchos tipos de enzimas que produce A. niger se encuentran tanasas,
lactosa, glucosa, alfa amilasas, catalasa, lipasa, etc.
Tanino Acilo Hidrolasa
(TAH)
Hidrlisis
Enlaces ster
Uniones C-C
Tanasa
Justificacin
El t de Neem (Azadirachta indica), al ser utilizado ampliamente por
sus propiedades curativas, posee un sabor amargo y astringente,
adems de un alto contenido de taninos. Estos compuestos pueden
resultar perjudiciales para el consumidor ya que son difciles de
metabolizar. Las tanasas, obtenidas de Aspergillus niger, son capaces
de hidrolizar enlaces en los taninos, lo cual resulta en una disminucin
de estos. Esto brindar un t de Neem bajo en taninos, lo cual
mejorar su sabor y facilitar su metabolizacin.
Objetivos
General
Evaluar la reduccin de taninos en t de Neem (Azadirachta
indica) a partir de la aplicacin de tanasas obtenidas por
fermentacin en cultivo sumergido de Aspergillus niger.
Especficos
Aislar el hongo A. niger a partir de alimentos en estado de
putrefaccin empleando el medio de cultivo selectivo Rosa de
Bengala.
Realizar una cuantificacin de esporas producidas.
Realizar una fermentacin en cultivo sumergido para la
produccin de tanasas.
Aplicar extracto enzimtico para la reduccin de taninos en t de
Neem.
Determinar la reduccin de taninos en t de Neem.
Metodologa
Preparacin de medios de cultivo:
Medio enriquecido PDA
Medio selectivo Rosa de Bengala
Tortilla Caf Elote Medio de cultivo
PDA
Muestras usadas para la inoculacin:
Inoculacin e incubacin a 30C
durante 7 das:
Aislamiento de Aspergillus niger
Revisin de la morfologa macroscpica y microscpica:
Conservacin de la cepa en tubos de ensayo con tapa rosca:
Inoculacin para la propagacin
Suspensin de esporas
Conteo de esporas
Extraccin de taninos
(Velsquez 2004)
10 L suspensin de
esporas
Una vez obtenida la suspensin de esporas y el extracto de taninos, se
procede a la fermentacin en cultivo sumergido
Shaker
150 rpm
T: 31C
40 mL caldo
nutritivo
Agregar 5mL suspensin de
esporas y 1 mL de extracto
de taninos
Cuantificacin de taninos
Mediante espectrofotometra UV Visible.
A 700 nm.
Blanco: cido tnico
Mtodo basado en el Mtodo de Folin Ciocalteu.
Produce complejo de color azul, con el cual se determina el
contenido total de fenoles.