PRÁCTICA # 2

CÉLULAS DE LA MUCOSA BUCAL

OBJETIVOS
 Manejo del microscopio óptico.
 Observar y estudiar a través del microscopio óptico las células procedentes de la
capa superficial del epitelio estratificado de la mucosa bucal.
 Adquirir habilidad en la preparación de muestras microscópicas.

INTRODUCCIÓN
El uso del microscopio nos permite estudiar las células del tamaño medio, es decir,
con un diámetro comprendido entre 10 y 100 micrones. Para ello es necesario realizar
preparaciones microscópicas, el material biológico que queremos observar es mediante una
capa muy fina( frotis) que se tiñe para posteriormente observarlo mejor. La técnica que se
utiliza es la de “Tinción simple” también llamada Tinción directa, y sólo se utiliza un
colorante básico. Én ésta técnica las moléculas de colorante se adsorben a una superficie
permitiendo cambiar el color de las células dado que éstas son incoloras. Los colorantes son
compuestos orgánicos que tiene alguna afinidad específica por los materiales celulares. El
colorante más utilizado es el azul de metileno cuyas moléculas están cargadas
positivamente(+) y se combinan con intensidad con los componentes celulares cargados
negativamente (-) tales como ácidos nucleicos (ADN) que permite hacer más visibles sus
núcleos, así como los polisacáridos entre otros. De ésta forma nos permite denotar la
morfología y estructuras celulares mediante el uso del microscopio óptico.
MATERIALES Y REACTIVOS
-Microscopio
-Portaobjetos
-Hisopos estériles.
-Azul de metileno.
-Lámpara de alcohol.
-Guantes
-Cubrebocas.

PROCEDIMIENTO

1.-Frotarse con un hisopo estéril en el interior de las mejillas (dentro de la boca).

2.-Deposita y extiende por el centro del portaobjetos lo que has obtenido del interior de tu
boca con el hisopo. Realizar un frotis.
3.-Fijar la muestra pasándola sobre la llama del mechero, con cuidado de que no se queme.
Es una fijación con calor.
4.-Teñir la preparación con azul de metileno de 4 a 5 minutos. Una vez que las células han
sido teñidas hay que eliminar los restos de azul de metileno con agua destilada. Mantén el
portaobjetos inclinado y lávalo echándole agua destilada hasta salir transparente. Procura
que el agua resbale a lo largo de todo el portaobjetos.
5.-Después de haber eliminado los restos de azul de metileno la célula estará algo mojada,
seca con el papel toalla el portaobjetos, incluido en la zona del frotis.
6.- Ajusta el microscopio y enfoca a 4x. Toma foto de las células enfocadas.
7.-Repita el ajuste para los objetivos 10x, 40x y 100x. Toma fotos nuevamente.
8.- Cuando termines con tus observaciones lava y seca el portaobjetos con un paño suave.
Nota: Además de células de mucosa, es posible observar bacterias.

¿Cuál de los siguientes dibujos representa mejor lo observado?

¿Por qué no se observan otros componentes celulares?
¿Qué bacterias se encuentran en la saliva?