UNIVERSIDAD DE ESPECIALIDADES ESPIÍRITU SANTO

FACULTAD DR. ENRIQUE ORTEGA MOREIRA

ESCUELA DE MEDICINA

GUÍA PRÁCTICA DE LABORATORIO BIOLOGÍA CELULAR

PRACTICA N°4

TEMA: TINCIÓ N DE CÉ LULAS DE LA MUCOSA BUCAL

FUNDAMENTO:

El uso del microscopio nos permite estudiar células de tamañ o medio, es decir con un
diá metro comprendido entre 10 y 100 micrones. Para ello es necesario realizar
preparaciones microscó picas, el material bioló gico que queremos observar, se los
dispone en una capa o película muy fina (frotis) que posteriormente se tiñ e para
observarlo mejor. La técnica que se utiliza es la tinción simple o denominada
también tinció n directa que solo utiliza un colorante bá sico, es el proceso por el cual
las moléculas de un colorante se adsorben a una superficie permitiendo cambiar el
color de las células dado que estas son incoloras. Los colorantes son compuestos
orgá nicos que tiene alguna afinidad específica por los materiales celulares. El má s
utilizado con frecuencia es azul de metileno cuyas moléculas está n cargadas
positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes
celulares cargados negativamente, tales como los á cidos nucleicos (ADN) que permite
hacer má s visibles sus nú cleos, así mismo los polisacá ridos, entre otros. De esta forma
nos permite denotar la morfología y estructuras celulares mediante el uso del
microscopio ó ptico.

OBJETIVOS:

1.- Manejar apropiadamente el microscopio ó ptico con las indicaciones realizadas en

clases anteriores.
2.- Observar y estudiar a través del microscopio las células procedentes de la capa
superficial del epitelio estratificado de la mucosa bucal.
3.- Adquirir habilidad en la preparació n de muestras microscó picas.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Microscopio
Porta objetos
Hisopos estériles
Azul de metileno
Guantes
Mascarillas

PROCEDIMIENTO:

1.- Frotarse con un hisopo estéril en el interior de la mejilla (dentro de la boca).

2.- Depositar y extender por el centro del portaobjetos lo que se ha obtenido del
interior de la boca con el hisopo. Realizar un frotis.
3.- Fijar la muestra pasá ndola sobre la llama del mechero, con cuidado de que no se
queme. Es una fijació n con calor. (Opcional)
4.- Teñ ir la preparació n con azul de metileno de 4 a 5 minutos, una vez que la célula ha
sido teñ ida hay que eliminar los restos de azul de metileno cuidadosamente con agua
destilada. Mantener el portaobjetos inclinado y lavarlo, echá ndole agua destilada
hasta que el agua que caiga sea transparente. Procurar que el agua resbale a lo largo
de todo el portaobjetos.
5. Después de haber eliminado los restos de azul de metileno, secar con un papel de
toalla el portaobjetos, incluido en la zona del frotis.
6.- Observar al microscopio con los objetivos 4X, 10X, 40X, 100X.
9.- Enfocar las células aisladas y realizar un dibujo de las mismas en los aumentos
antes mencionados.
10.- Al terminar limpiar el portaobjetos, lavarlo y secarlo con un pañ o suave.

Nota: Ademá s de células de la mucosa es posible observar bacterias de la mucosa

bucal (Estreptococos).
RESULTADOS:
4X 10X

CÉLULAS DE MUCOSA
BUCAL

40X 100X
CONCLUSIONES:

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: