UNIDAD 4

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION EN EL ULTRAVIOLETA Y

VISIBLE.

4.1 Fundamentos

Cuando una radiación electromagnética, en el rango del UV-Vis, pasa ó incide sobre
un compuesto que contiene varios enlaces o sobre átomos, iones o complejos con electrones
d o f, una parte de la radiación es absorbida por estos. La cantidad de radiación que se
absorbe depende de la longitud de onda de la radiación y la naturaleza de los enlaces ó la
estructura del compuesto.
La absorción es causada por la sustracción de energía del haz de radiación cuando
los electrones pasan de orbitales de baja energía (estado fundamental) hacia orbitales de
mas alta energía (estado excitado).
*
M + hν → M ΔE
El estado excitado tiene un periodo de vida muy breve (10-8 a 10-9 s) y regresa al
estado fundamental por un proceso de relajamiento:

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 1

 ein−

−
eout
hν in
efecto fotoelectrico,
emision fotoelectronica,
electrones secundarios
kBTin

kB Tout
hν out
perdida de energia
emision de no radiante
luminiscencia

M* M + Calor

RELAJAMIENTO M* M + hV (emisión):fluorescencia
y fosforescencia

M* N + B reacción fotoquímica

Estos son procesos de transiciones electrónicas. El tipo de transición electrónica

depende de la especie química de que se trate. Desde este punto de vista, de acuerdo a las
transiciones electrónicas que pueden sufrir, en espectroscopia de ultravioleta-visible, las
especies químicas se clasifican en:
Especies con electrones σ, π y n
Especies con electrones d y f
Especies con electrones para trasferencia de carga.
Los electrones participantes son los involucrados directamente en la formación de
enlaces entre átomos ó electrones exteriores no enlazados ó no compartidos, en el caso de
compuestos con enlaces covalentes.
De acuerdo a la teoría de orbitales moleculares (TOM), cuando dos orbitales
atómicos (dos funciones de onda) se traslapan ó combinan, se forma un Orbital molecular
de enlace, el cual tiene menor energía que los orbitales participantes, pero, por el principio
de conservación orbital, también se forma un Orbital molecular de antienlace, de mayor
energía que los orbitales participantes. Lo anterior es como consecuencia de la suma y
sustracción de las funciones de onda ó, desde el punto de vista clásico, por la suma en fase
y fuera de fase de las ondas.

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 2

 E

En el estado fundamental de las moléculas orgánicas y de algunos iones inorgánicos

como el CO3-, los electrones se ubican en orbitales moleculares cuantizados de enlace y
, o en orbitales moleculares de no enlace, , generando con esto, moléculas ó uniones
estables.
Los enlaces sencillos de las moléculas orgánicas se denominan enlaces σ (sigma) y
los electrones de los mismos se denominan así mismo electrones σ .
En los dobles enlaces existe tanto un enlace σ como un orbital π , este ultimo como
consecuencia del traslapo lateral de dos orbitales p. Cada orbital de enlace σ tendrá su
correspondiente orbital de antienlace, σ *, y lo mismo ocurrirá con los orbitales π los
cuales tendrán un π *. Los orbitales moleculares de enlace y los orbitales moleculares de
antienlace son cercanos en energía por lo que las transiciones electrónicas entre estos son
muy factibles con la energía de fotones del rango del ultravioleta y del visible. En el caso
de los pares de electrones libres ó no compartidos, estos también pueden sufrir transiciones
tanto a orbitales σ * como a orbitales π *, aunque son transiciones de muy baja
absortividad.

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𝞹
𝛈
𝞼
 ∏*

∏*

∏
TRANSICION ∏ ∏*

Las energías de los diferentes orbitales moleculares, tanto de enlace como de

antienlace, difieren considerablemente. Si hay electrones de no enlace, η , estos se ubicaran
entre los orbitales moleculares de enlace y los de antienlace (en una escala de energía):

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 4

 σ*

π*

η
E η →σ
*
η →π
*

π
*
π →π

σ *
σ →σ

las transiciones comúnmente encontradas, y que son las que se estudian en espectroscopia
* * * *
UV-Vis son: σ → σ , π → π , η → σ y η → π las cuales requieren diferente cantidad de
energía (diferencial de energía) para ocurrir, aunque las transiciones realmente útiles y
utilizadas son la → * y → * . Así mismo, dentro de un mismo tipo de transición
puede haber diferencias ya que sus valores no son fijos sino que dependen de la estructura
completa de la molécula, por ejemplo la transicion
→ * sufre incrementos de 3 a 5 nm al agregar grupos alquilo; esto depende del tipo de
alquilo y de la estereoquímica del doble enlace.
En este tipo de espectroscopia también podemos ver transiciones de electrones de
un orbital atómico a otro, como es el caso de algunos átomos metálicos, y transiciones
electrónicas entre un átomo y otro (especie de redox interno) sobre todo entre iones
metálicos con algunos ligandos.

Cuando no hay pares de electrones sin compartir, las transiciones son de tipo
Homo-Lumo, es decir, desde el ultimo orbital molecular ocupado hacia el primero ó mas
bajo orbital molecular desocupado. El que se transfiere es un electrón y se debe de
mantener la multiplicidad, es decir, sin cambio de espín.
Los espectros de absorción no presentan picos ó bandas agudas sino bandas anchas
las cuales son debidas a subniveles vibracionales en cada nivel lo que origina, en realidad,
varias transiciones diferentes con muy pequeña diferencia de energía.
Resumiendo, las diferentes tipos de transiciones, sus rangos de absorción y sus
absortividades molares son:

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𝛑
𝛑
𝛑
𝛈
𝛑
 TRANSICIONES ELECTRONICAS

Tipo de transición Rango de max

absorción
→ * 125-150 nm -
→ * 150-200 nm 100-4000
→ * 170-200 nm 1000- 1 x 106
→ * 200-700 nm 10 a 100 (muy
baja)
Cuando hablamos de moléculas orgánicas, los grupos funcionales presentaran
diferente tipo de transiciones, de acuerdo a su estructura, pero deben de ser transiciones
congruentes con el tipo de electrones y orbitales que presentan, por ejemplo el etanol puede
presentar la transicion → * pero no la → * por que no hay enlaces .

Los espectros en este tipo de espectroscopias no presentan lineas de absorción sino

bandas de varias longitudes de onda superpuestas debido a transiciones vibracionales que
son muy cercanas en energía.

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𝛈
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𝛑
𝛑
𝛑
 VISIBLE

Cuando la luz blanca (un continuo de ) pasa a través, o es reflejada por una
superficie, parte o algunas longitudes de onda pueden ser absorbidas o removidas de la luz
trasmitida o reflejada y lo que observamos son los colores complementarios (los que no se
absorbieron; esto es lo que origina lo que se conoce como la rueda de color :

La región del visible abarca radiaciones en un rango de entre 400 nm y 780 nm, este
tipo de radiación es de baja energía por lo que en esta porción del espectro
*
electromagnético solo se presentarán algunas (no todas) de las transiciones η → π (las de
*
mas baja energía), así como también algunas de las transiciones π → π , también las de
mas baja energía sobre todo cuando existen conjugaciones de enlaces dobles. Estos dos
tipos de transiciones ocurren en el rango de longitudes de onda de entre 200 y 700 nm,
dependiendo de los enlaces vecino ó estructura de la molécula, por lo que pueden aparecer
tanto en el visible como en el ultravioleta.
Las dos transiciones anteriores requieren necesariamente la presencia del doble
enlace (enlace π ) el cual lo presentan grupos funcionales como: C=C, C=O, C=N, C=S,
N=O, N=N, C ≡ C, C ≡ N , etc. En algunos casos pueden presentarse las dos transiciones y
*
en otros, si no existen pares de electrones libres, solo se presentará la transición π → π .
Estos centros absorbentes insaturados se denominan CROMOFOROS.

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𝛌
 Las absortividades, ε , para estas transiciones son:
l
π → π * altas, entre 1000-10,000 cm mol aunque también las hay mucho mayores
l
*
η → π bajas, entre 10-100 cm mol
Las absortividades, ε , son proporcionales a la probabilidad de ocurrencia de la
transición. Así mismo, las transiciones deben de ser congruentes (permitidas por las reglas
de selección) es decir, de un orbital a otro congruente con el ( si no hay electrones η , no
*
habrá transición η → π ). Tampoco son permitidas las transiciones entre orbitales σ a
orbitales π o π*.
En el visible también se observan algunas de las transiciones de electrones d de los
iones de los metales de transición y las de los electrones f de los lantánidos y los actínidos.
Estos últimos presentan picos estrechos y agudos. Para este tipo de transiciones no se
afectan los electrones exteriores enlazantes con números cuánticos mas grandes, sino que
ocurren con electrones no enlazantes.
Los iones de metales de transición generalmente presentan soluciones coloridas
fáciles de estudiar por espectroscopia visible debido a transiciones de los electrones 3d y 4d
no enlazantes. Presentan bandas anchas. Las transiciones dependen de los ligandos ya que
estos ocasionan desdoblamiento de los niveles de energía de los orbitales d normalmente
degenerados. Lo anterior es debido a lo que se conoce como fuerza del campo ligando. En
estos casos el ligando genera la perdida de la degeneración de los orbitales, por ejemplo los
orbitales d en el Cu+2 y el Co+2, presentando un diferencial de energía entre estos y un
electrón de valencia puede hacer transiciones entre estos por absorción de fotones de baja
energía.

En otros casos , el metal de un complejo con un ligando puede formar un estado

excitado, denominado de transferencia de carga, por absorción de un fotón y la
transferencia de un electrón del metal hacia el ligando:

M-L + hv → M+-L-

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 8

estos presentan grandes absorbancias y de ahí su importancia en la cuantificación de
algunos metales formando complejos de este tipo como es el caso del Fe+2 con o-
fenantrolina que da un complejo rojo naranja o los complejos de otros metales con la
ditizona.

[ ]
N N
2+
3 + Fe Fe
2+

N N
3

1,10 Fenantrolina

Con fines analíticos, la espectroscopia del visible se utiliza para estudiar transiciones y
en casos de que estos enlaces estén conjugados. Es más útil para analizar especies
inorgánicas de metales de transición, lantánidos y actínidos, que presentan trasferencias de
carga con absortividades muy grandes. Para este fin se forman complejos de los metales
con especies no absorbentes (ligandos) como es el caso del Fe con tiocianato, Fe con orto
fenantrolina, Ni con dimetilglioxima, Pb con difenilcarbazona, Cu con
dietiltiocarbamato,etc. En estos complejos se presenta un redox interno momentáneo donde
un electrón excitado puede pasar del ligando al metal, ó viceversa, y luego regresar al
estado fundamental, utilizando para el proceso, energía aportada por una radiación del
rango del visible.

ULTRAVIOLETA

La radiación UV tiene mayor energía que la radiación visible (de 100-190 nm en el

UV lejano y de 190-400 nm en el UV cercano) por lo que se utiliza para transiciones de
* * *
mayor energía. Las transiciones más estudiadas en UV son σ → σ , π → π y η → σ .
σ → σ *: Esta transición se presenta principalmente en compuestos orgánicos sin grupos
cromóforos, es decir, con solo enlaces sencillos. Son sumamente energéticas y
corresponden a longitudes de onda del ultravioleta lejano, también denominado ultravioleta
al vacío porque aquí absorbe todo, incluido el aire, y que va desde 100 a 200 nm. Ejemplos
de moléculas que presentan este tipo de transiciones son el metano, con solo enlaces C-H y
una λ max de 125 nm. el etano, con uniones C-C y C-H presenta una λ max de 135 nm, en
virtud de que el enlace C-C tiene menos fuerza que el C-H y por lo tanto requiere menor
energía, es decir mayor longitud de onda.
*
η → σ : Esta se da por pares de electrones libres ó no compartidos. Si no hay cromóforos
son transiciones muy energéticas y caen en longitudes de onda de entre 150 y 250 nm
(principalmente abajo de los 200 nm). moléculas que presentan este tipo de transiciones son
el agua, con una λ max de 167 nm, CH3Cl, con una λ max de 173 nm, el éter metílico con
una λ max de 184 nm y las aminas con λ max arriba de 200 nm. Estas transiciones se

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𝛑
𝛈
desplazan a λ max aún más cortas (de mayor energía) en disolventes polares como el agua ó
los alcoholes.
En el UV también caen las transiciones → * y → *. Los alquenos y alquinos no
conjugados regularmente caen en el UV al vacío ó el UV, entre 170-190 nm, presentando
ocasionalmente más de un pico (cuando son sustituidos). La transicion → * de las cetonas
también caen en el UV pero la → * ronda los 300 nm pero con muy baja absortividad.

Esta región, entre 200-400 nm (2 x10-7 m a 4 x10-7 m) es la región de mayor interés

en química orgánica porque es la región donde absorben la mayor parte de las moléculas
orgánicas aunque los sistemas con muchas conjugaciones desplazan su absorción hasta la
región visible.

TERMINOLOGIA DE UV-VIS

Existen algunos términos ampliamente utilizados en espectroscopía de UV-Vis. Uno

de ellos es el ya mencionado de grupos cromóforos, los cuales son grupos ó centros
absorbentes insaturados y que absorben tanto en UV como en el Vis. Otro término común
es el de los auxocromos los cuales son centros ó grupos que producen el efecto de
desplazar a longitudes de onda mas largas ó mas cortas las λ max de absorción de los grupos
cromóforos, además de aumentar la intensidad de la absorción. Grupos auxocromos
comunes son el -OH, -NH2,-SH y algunos halógenos. Todos estos tienen pares de
electrones no enlazados y son las transiciones ó conjugación de los electrones η las
causantes de estos efectos. Un efecto auxocromo muy común es el que se presenta en
aromáticos sustituidos.
Desplazamiento batocrómico: Desplazamiento de las bandas ó los picos hacia longitudes
*
de onda mayores (hacia el rojo). Es un desplazamiento común en transiciones π → π
cuando las mediciones se hacen en disolventes polares. La causa, en algunos casos, es la
polarización atractiva entre el disolvente y la especie absorbente, lo cual origina que se
reduzcan los niveles de energía de los estados excitado y fundamental, siendo mas marcado
en el excitado por lo que el diferencial de energía se hace mas chico. El disolvente “mueve”
a los electrones π hacia un lado (polarización) y esto ocasiona que sea más fácil el brinco
hacia el π *. Este efecto lo causan el disolvente polares, los grupos auxocromos y la

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𝛑
𝛑
𝛑
𝛈
𝛑
𝛑
𝛑
 conjugación. El orbital * es más polar que el por lo que se estabiliza en un solvente
polar.

Desplazamiento hipsocrómico: Este es lo contrario del desplazamiento batocrómico, es

decir es un desplazamiento hacia mayores energías (menores longitudes de onda), hacia el
azul. Este desplazamiento también lo origina los disolventes polares cuando la transición es
*
de tipo η → π . Los pares de electrones no compartidos ó libres del absorbente forman
puentes de hidrógeno con el disolvente polar (ejemplo agua ó alcoholes) haciéndolos menos
disponibles. La energía del orbital η se reduce en una proporción aproximadamente igual a
la energía del puente de hidrógeno.
Tambien podemos observar un aumento o disminución de la intensidad de la
absorción con los efectos hipercromico e hipocromico.

En la siguiente tabla podemos ver el efecto de un solvente no polar (hexano) y un

solvente polar (agua) en el desplazamiento de las transiciones → * y → *:

Solvente max (nm) Transición

Hexano 230 12,600 → *

329 47 → *

Agua 243 10,000 → *

303 60 → *

SISTEMAS CONJUGADOS

Si un mismo cromóforo está presente en diferentes moléculas, estas absorberán

aproximadamente a la misma longitud de onda y presentaran las mismas absortividades,

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𝛑
𝛈
𝛑
siempre y cuando no haya perturbaciones. Cuando estos cromóforos, dos ó mas, están en la
misma molécula pero están separados por dos ó mas enlaces simples (aislados) la λ max de
estos será la misma pero se presentará un efecto aditivo en la absortividad ya que ahora será
necesario mas de un fotón de radiación para llevar a los grupos cromóforos al estado
excitado.
Por el contrario, si dos ó mas cromóforos presentes en la misma molécula están
separados por un solo enlace sencillo (conjugados), además del incremento en la
absortividad, habrá también un efecto en la λ max de absorción de la transición con un
corrimiento hacia el extremo rojo del espectro, es decir, un desplazamiento batocrómico, ya
que el sistema π de electrones se distribuye sobre, por lo menos, cuatro centros atómicos.
Por ejemplo, una diolefina aislada ó no conjugada tendrá una λ max de 185 nm, en
tanto que una diolefina conjugada presentará una λ max de 217 nm. Alquenos y dienos no
conjugados presentan λ max ≈ 200 nm en tanto que los conjugados presentan sus
λ max ↑ 200 nm.
El mismo fenómeno se presenta en carbonilos α, β insaturados los cuales presentan
*
desplazamientos de hasta 40 nm ó mas en la banda de la transición η → π , además de que
*
aparece en el UV normal la banda π → π que normalmente aparece en el UV al vacío.
En sistemas con conjugación extendida (ejemplo los polienos) la coplanaridad es
muy importante para el perfecto traslape de todos los orbitales p involucrados. Bifenilos sin
impedimento estérico presentan coplanaridad y por lo tanto conjugación, en tanto que si
ponemos sustituyentes voluminosos en las posiciones orto se impide la coplanaridad y por
lo tanto la conjugación.
Las λ max son susceptibles a los sustituyentes ó átomos unidos a los carbonos del
doble enlace, de suerte que siguiendo ciertas reglas se puede predecir la λ max de absorción
y en ciertos casos, incluso, nos servirá para determinaciones estructurales. Es decir, la
estructura completa de una molécula conjugada se presta para correlaciones matemáticas.
La mecánica cuántica y la teoría de los orbitales moleculares (TOM) nos dan las
respuestas a este fenómeno:

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 *
* π8
π 6
* *
π 4 π7
π
* lumo π5
*
*
* π6
π lumo
3 *
π 4lumo
π 5* lumo
E π 4 Homo
π 3 Homo
π 2 Homo
π3
π Homo π2
eteno π1 π2
171 nm π1
1,3 butadieno
217 nm 1,3,5 hexatrieno π1
1,3,5,7 octatetraeno

Cuando una molécula

absorbe luz, un electrón es
excitado y pasa de un orbital
molecular Homo hacia un
Lumo. Para la mayoría de
los alqueno y polienos, el
Homo es un orbital π de
enlace, en tanto que el Lumo
es un orbital molecular π *.
La longitud de onda de la absorción máxima ( λ max ) es determinada por la diferencia en
energía entre estos dos niveles. En el eteno y álquenos no conjugados la diferencia en
energía es grande y por lo tanto necesita radiación de longitudes pequeñas, entre 170-190
nm. La conjugación en el 1,3 butadieno hace mas pequeña la diferencia en energía de los
dos orbitales conjugados. Los trienos conjugados requieren menor energía aún y por lo
tanto longitudes de onda mayores (hacia el rojo) porque el diferencial de energía entre el
Homo y el Lumo es aún menor. Los polienos conjugados normalmente absorben en el
visible presentando soluciones muy coloridas.

Regla: Entre más enlaces múltiples conjugados tenga un compuesto, más larga o grande
será la longitud de onda de la radiación que necesitará para la transición electrónica.

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 η → π * λ max = 324 nm (ε = 24) π → π * λ max = 219 nm (ε = 3600) 1

La max es a 455 nm, en la region del azul lejano del espectro y esta longitud de
onda es la que se absorbe . La luz remanente tiene el color complementario, el naranja.

Para el licopeno, la max es a 474 nm, en la region del azul cercano del espectro
electromagnético, la cual al absorberse dará como resultado que observemos su color
complementario que corresponde al rojo.
En el caso del indigo la max es a 602 nm, en la region del naranja, por lo que
observamos es el color complementario, el indigo.

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𝛌
𝛌
𝛌
 Una clase de moléculas orgánicas coloridas son los Tintes azo, con un gran numero
de insaturaciones, principalmente en sistemas aromáticos, conjugadas.

Este tipo de tintes son utilizados en las ciencias biológicas para la tinción de
diferentes tipos de células, procariotas y eucariotas, así como organelos y diferentes
estructuras y biomoléculas de estas células. También los podemos encontrar en los papeles
tornasol y las tiras para determinar el valor de pH.

Fenolftaleina

4.2 Instrumentos
Instrumentos para espectroscopía visible
En este tipo de espectroscopia se utilizan los fotómetros, que son equipos que
miden la potencia de un haz de radiación. Los más comunes son los espectrofotómetros
que trabajan en todo el rango del visible y que pueden trabajar en una sola longitud de onda
ó realizar espectros de todo el rango. Los hay de un haz y de doble haz.
De un haz: Estos constan de una fuente de radiación, lámpara de tungsteno, una lente que
produce un haz paralelo, un diafragma de ajuste, un filtro y/ó monocromador (filtros de
interferencia, prismas, rendijas de difracción dobles ó múltiples ó redes de difracción) la
celda para la muestra y el detector , el cual, normalmente, es una celda fotovoltaica con un
microamperímetro ó un tubo fotomultiplicador.
La calibración a cero para eliminar las pequeñas absorciones de reactivos ó solvente
se realiza variando la abertura del diafragma que deja pasar la luz, en algunos casos, y en
otros casos variando el voltaje aplicado a la lámpara.
De doble haz: En estos el haz se divide en dos por medio de un espejo. De los dos haces
producidos, uno va a la muestra y el otro va al disolvente ó al blanco. Consta de dos celdas
fotovoltaicas, una para cada haz, y el equipo saca la diferencia entre las dos potencias y la
aplica a la lectura.

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Un ejemplo tradicional de este tipo de equipos es el llamado Spectronic 20 de Bauch-
Lamb, el cual consta de dos fototubos (detectores), uno para detectar las fluctuaciones de
salida de la fuente de luz y el otro para la medición en si luego de que el haz pasa por la
muestra. La fuente de luz es una lámpara de tungsteno y cuenta con un lente que hace haces
paralelos, una rendija monocromadora y un dispositivo en forma de V para ajustar al 100 %
T (moviéndose hacia adentro ó hacia afuera en relación al haz). Así mismo tiene un
obturador que tapa el paso de luz para ajustar a 0 %T (este actúa cuando se retira la celda),
tiene el portacelda y un filtro. El fototubo cubre un rango de 340-625 nm y su sensibilidad
se puede extender hasta 950 nm utilizando un filtro rojo adicional. El ancho de banda de
este aparato es de 20 nm.

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Instrumentos para espectroscopía de ultravioleta

También se utilizan espectrofotómetros, los cuales son muy similares a los

utilizados en el visible con la diferencia en el tipo de fuente de radiación ó lámpara, que en
estos casos puede ser una lámpara de deuterio ó de hidrógeno. Los hay de un haz y de doble
haz. La mayoría utilizan tubos fotomultiplicadores como detectores, y monocromadores .
Hay equipos digitales y de analógicos.
Gran cantidad de estos equipos trabajan en los dos rangos, Visible y UV, solo
cambiando la fuente de radiación por medio de algún mecanismo.

Un gran avance en el desarrollo de los espectrofotometros es la introducción de los

detectores por arreglo de diodos. Las longitudes de onda trasmitidas o no absorbidas en su
paso por la muestra son separadas por un prisma o un dispositivo de dispersión. Un detector
compuesto por una serie de diodos arreglados en una oblea de silicio detecta cada banda o
longitud de onda de manera simultánea.

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 Virtualmente todos los espectros de UV-Vis son obtenidos en solución por lo
que se deben utilizar celdas o cuvetas para la muestra. Estas celdas son cilíndricas o con
alguna otra forma, de acuerdo al fabricante del equipo. Los materiales utiulizados para estas
son plástico, vidrio o cuarzo. Solo el, cuarzo es trasparente en todo el rango, 200-700 nm.
El plástico y el vidrio solo pueden ser utilizados en los espectros en el rango del visible.

4.3 Aplicaciones
La espectroscopia de UV-Vis es muy útil principalmente desde el punto de vista
cuantitativo, ya que hay una correlación directa entre la absorbancia y la concentración (ley
de Lambert-Beer), por lo que su mayor utilidad es en este sentido, sin embargo también
tiene aplicaciones cualitativas si se relacionan los grupos funcionales absorbentes con la
absorción en cierta región del espectro.
Desde el punto de vista cuantitativo primeramente se obtiene el espectro de
absorción de la sustancia en estudio y de ahí se selecciona una longitud de onda de trabajo
( max). Si la sustancia no es colorida hay que obtener el espectro completo (en el rango del
UV), pero si la muestra es colorida se puede tener una idea de la max absorbida buscando el
color complementario al color observado por lo que la búsqueda puede ser en un rango de
longitudes de onda. Posteriormente se selecciona una longitud de onda de trabajo, un pico
de buena respuesta o sensibilidad y lo mas aislado o libre de otros picos posible. Se prepara
una solución patrón y de ahí se preparan una serie de soluciones de diferente concentración
para utilizarlas en un método de calibración a través de una curva utilizando la ley de
Lambert-Beer. Se obtiene la ecuación de la recta o se grafican los resultados y de ahí se
determina la concentración de el o los problemas.

Los diferentes tipos de transiciones electrónicas tienen λ max característicos. Las

transiciones mas importantes en UV-VIS para la química orgánica son las debidas a la
presencia de orbitales moleculares π ó a pares de electrones no enlazados, electrones " η ",
los cuales generan transiciones → * y ➝ *, mientras que en la cuantificación de
metales o ligandos se utilizan las transiciones de los electrones d y f.
Aunque los grupos funcionales similares tienen electrones capaces de diferentes
tipos de transiciones discretas cuya energia es mas representativa del grupo funcional que
de los electrones en si. Estos grupos funcionales o cromoforospresentan transiciones

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𝛌
𝞹
𝝁
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𝞹
𝛌
electrónicas características aunque el mismo tipo de transición no ocurren exactamente en
el mismo valor de λ en todas las moléculas debido a cambios electrónicos o estructurales
que generan desplazamientos batocromicos ó hipsocromicos ocasionados por las diferentes
conformaciones que adquieren las moléculas en razón de los sustituyentes que pueden tener
y esto hace mejores ó menores traslapos de orbitales. Así mismo los sustituyentes pueden
generar extensiones de conjugación, por dobles enlaces adicionales, ó generar
conjugaciones que no había, por la presencia de pares de electrones libres.
Estas características se prestan a correlaciones numéricas y en base a ellas y a una
gran cantidad de análisis de substancias conocidas, Woodward y Fieser encontraron una
serie de correlaciones empíricas que los llevaron a elaborar una serie de reglas que permiten
predecir la λ max a la que absorberán sustancias que presenten este tipo de transiciones,
como es el caso de los dienos, polienos, carbonilos α ,β insaturados, aldehidos α ,β
insaturados, ácidos α ,β insaturados, esteres α ,β insaturados, además de las enonas y
aromáticos sustituidos, tratándose en todos los casos de sistemas conjugados. Hay que
aclarar que algunas de las tablas fueron elaboradas por otros autores.
∗
La transición η → π se presenta en el UV, cerca del visible, con absortividades muy
bajas, alrededor de 100 L / cm mol ó menos; esta transicion la podemos caracterizar de
diferentes formas, por ejemplo:
1. Por el método de la adición de acido con lo que la banda desaparece generalmente.
2. Por comparación de espectros de un compuesto con un heteroátomo con pares de
electrones sin compartir y el espectro de un compuesto similar sin heteroátomos. Por
ejemplo, la piridina presenta una banda en 300 nm misma que no esta presente en el
espectro del benceno.
∗
Esta transicion, η → π , aparece en 313 nm en el anión NO3-, en 217 nm en el anión
CO3- y en 360 en el anion NO2-.
∗
en tanto que la transición π → π ocurre a longitudes de onda más cortas pero con
absortividades muy altas. Estos valores de λ max y ε se modifican en gran medida por lo
antes expuesto, encontrándose , por ejemplo, dienos con absortividades de hasta 260,000
L / cm mol.

El pKa de un acido se puede determinar si el o su base conjugada absorben en esta

región. Por ejemplo el pKa del fenol se determino a 287 nm que es la longitud de onda a la
que absorbe el fenolato; se midió la absorbancia a medida que se incrementaba el pH. El
pKa del fenol esta exactamente a la mitad del aumento del pH (ecuación de Henderson-
Hasselbach) ya que en ese punto la mitad del fenol esta como fenolato.

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 19

 En el caso de la reducción del piruvato por medio de la lactato deshidrogenasa en
presencia de NADH, se midió la absorbancia a 340 nm en función del tiempo y así se
determino la cinética de esta reacción. El NADH es el único que absorbe a esta longitud de
onda. La velocidad de la reacción se puede determinar siguiendo la disminución de la
absorbancia a 340 nm.

Otro ejemplo es la determinación de la temperatura de fusión (Tf) del DNA

(temperatura a la que las dos cadenas de nucleótidos se separan). Esta temperatura nos
indica que nucleótidos puenteados predominan. La union del Adenina con Timina (A-T) se
logra con solo dos puentes de hidrogeno, mientras que la union guanina con citosina (G-C)
presenta tres puentes de hidrogeno por lo que es mas fuerte y se requiere mayor
temperatura para separarlos.

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 20

 Aniones como los nitratos, nitritos y carbonatos también presentan las transiciones
* *
σ → σ *, π → π * , η → σ y η → π por lo que esta espectroscopia es útil para su
cuantificación determinando sus max de absorción.

REGLAS DE WOODWARD-FIESER PARA UV

DIENOS
λ max = 217-245 nm , ε = 20,000-260,000 L / cm mol

Homoanular Heteroanular
(cisoide) (transoide)
R

Valor base 253 nm 214 nm

Valor base para los acíclicos 217 nm
incremento para:
dobles enlaces adicionales a conjugación 30 30
sustituyente alquílico ó resto de anillo 5 5
doble enlace exociclico 5 5
grupos polares:
-OCOCH3 0 0
-OR 6 6
-Cl, -Br 5 5
-NR2 60 60

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 21

𝛌
 ENONAS
λmax = 310-330 nm, ε = 50-100 L/cm mol (n →π*)
λmax = 220-250 nm , ε = 8,000-20,000 L /cm mol (π→π*)

C C C O C C C C O

Valor base

anillo de 6 miembros o enonas acíclicas parecidas 215 nm

anillos de 5 miembros (ciclopentenonas) 202 nm
dienonas acíclicas 245 nm
Incrementos para:
doble enlace extra en la conjugación 30 nm
grupo alquílico ó residuo de anillo α10 nm
β12 nm
γ ó mayor 18 nm
doble enlace exociclico 5 nm
componente de dieno homociclico 39 nm
corrección por solvente variable

Grupos polares:
-OH α 35 nm -OCH3 α 35 nm
β30 β30
γ50 γ17 y δ31

-OCOCH3 α,β,γ 6 nm -Br α25 nm

-Cl α15 β20
β12
-NR2 β95

ALDEHIDOS α,β INSATURADOS

R2C

H
Siguen las mismas reglas que para enonas simples

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 22

 Valor base 208 nm
con alquilos α ó β 220 nm
con α ,β ó β, β alquilos 230 nm
con α,β,β alquilos 242 nm

ACIDOS Y ESTERES α,β INSATURADOS

Tabla elaborada por Nielsen

C C C C
COOR COOH

Siguen las mismas reglas que las enonas simples

Valores base con:
Alquilos α ó β 208 nm
alquilos α,β ó β,β 217 nm
alquilos α,β,β 225 nm
para un doble enlace α,β exociclico sume 5 nm
para un doble enlace α,β endociclico en
anillos de 5 a 7 miembros sume 5 nm

SISTEMAS AROMÁTICOS

El benceno es el cromóforo mas simple de los sistemas aromáticos. Anillos

aromáticos conjugados o fusionado generan desplazamientos batocromicos considerables:

Aromático max (nm)

Benceno 268
Naftaleno 311
Antraceno 476
la benzoquinona es un mejor cromoforo que el mismo benceno por la disposición de
los dobles enlaces. Los grupos auxocromos causan desplazamiento batocromico de la max
del benceno, aunque depende del solvente:

Efecto de los auxocromos en el benceno en Hexano

Auxocromo max (nm)
Sin auxocromo 268 250

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 23

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𝛌
 Auxocromo (nm)
max

-NH2 280 200

-OH 275 200
-Cl 265 360
-Br 245 295
DERIVADOS DEL BENCENO

Valor base
Si X es alquilo o residuo alicíclico
246 nm
Si X es halógeno 250 nm
Si X es OR u OH 230 nm

OTROS SUSTITUYENTES EN EL ANILLO

En relación a quien?

Sustituyent Orto Meta Para

e
Incremento en nm
Alquilo 3 3 10
OR, OH 7 7 25
Cl 0 0 10
Br 2 2 15
NH2 13 13 58
NHCOCH3 20 20 45
NR2 20 20 85

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 24

𝛆
𝛌
 Cuando se realizan mediciones en estas regiones no se debe perder de vista lo que se
denomina el CUTOFF de los solventes. Son los picos de absorción debidos a las
transiciones que puede sufrir la molécula del solvente.
Los solventes a utilizar deben ser transparentes en la región a observar o de trabajo;
donde el solvente no es transparente es a lo que se le denomina el cutoff del solvente.
Debido a que los espectros se obtienen arriba de los 200 nm los solventes a utilizar
serán típicamente aquellos que carezcan de sistemas conjugados o carbonilos.
Algunos de los solventes utilizados y su cutoff son:

Solvente Cutoff (nm)

Acetonitrilo 190
Cloroformo 240
Ciclohexano 195
1,4-dioxano 215
Etanol 95 % 205
Hexano 201
Metanol 205
Isooctano 195
Agua 190

M.C. Jesús Ignacio González Garcia. 25

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