ULTRAVIOLETA-visible

ERICKA SANTACRUZ JUAREZ

Espectroscopia
• Medición e interpretación de fenómenos de absorción, dispersión o
emisión de radiación electromagnética que ocurre en átomos,
moléculas u otras especies químicas. La absorción o emisión están
asociadas a los cambios de estado energéticos de las partículas.
Espectroscopia Molecular
• Fenómenos a nivel molecular (absorción, dispersión o emisión) que
implican cambios energéticos a nivel de los orbitales de enlace en la
capa más externa, y a los patrones de cambio en los estados de
transición, suelen ser de baja energía y de muy poca diferencia entre
ellos.
Radiación Electromagnética
• Es la energía que se transmite por el espacio a muy altas velocidades.,
es decir, a través de ondas producidas por la oscilación o aceleración
de una carga eléctrica.

• Adopta muchas formas (luz, calor, Rayos X, radiación g, UV, mW, etc).
Características de la Radiación
electromagnética

• Longitud de Onda.
• Frecuencia.
• Velocidad.
• Amplitud.
• Periodo
• No necesita medio de propagación.
• Comportamiento Dual: Onda y Partícula
Modelo tipo onda:
Presenta como parámetros ondulatorios: Amplitud (A),
Periodo (P), Longitud de onda (l), Frecuencia (u, I/P)
Instrumentos para el Análisis

Respuesta
Estímulo

Fuente de Sistema Información

Energía Objeto de Analítica
Estudio
Estímulo
• Energía Eléctrica
• Energía Electromagnética
• Mecánica
• Nuclear
Línea Espectral
 ULTRAVIOLETA-visible
Cuando la radiación (fotones) incide sobre una sustancia, sólo un átomo o
conjunto de átomos son capaces de absorber la radiación.
Esta absorción de energía se cuantifica y da por resultado la elevación de
los electrones desde orbitales en el estado básico a orbitales de mayor
energía.
El espectro UV-Visible
Vacío UV: 100-200 nm
Cercano UV: 200-400 nm
Visible 400-700 nm

UV-Vacío es llamado así porque las moléculas del aire

absorben radiación en esta región.
Especies Absorbentes
Absorción Transiciones Electrónicas
electrones de valencia
Compuestos
Orgánicos TOM
Inorgánicos Teoría del campo
ligando
Transferencia de carga (Ox-Red internas).
 TEORIA DE ORBITALES MOLECULARES

Formación de los orbitales σ y σ* por Traslape

frontal de dos orbitales atómicos s y p, así como sus
enlaces π y π∗ por traslape lateral de los orbitales.
Tipos de Transiciones Moleculares
• Transición electrónica:
La transición de un electrón entre diferentes niveles de
energía y el proceso de absorción asociado es conocido
como absorción electrónica.
Diagrama de energía de diferentes orbitales moleculares y
posibles transiciones

Cambios rotacionales y vibracionales por lo tanto es un espectro de

banda.
Espectro de UV-visible

A medida que
aumenta la
conjugación, el
sistema absorbe a
λ mayores , o sea
más hacia el
visible
Tipos de Transiciones Moleculares
• Transición vibracional:
Ocurre como consecuencia de los niveles de energía cuantizados
asociados a los enlaces intramoleculares. Las transiciones
vibracionales se producen cuando se produce absorción de
energía de longitud de onda infrarroja.
Transición Rotacional

Debida al movimiento rotacional de la molécula alrededor de

centro de gravedad y están cuantizados. (Microondas)
Absorción de moléculas orgánicas

Transición Energía l Absortividad Tipo de moléculas

σ→σ∗ ΔE grande (λ ε=101-0,000 Hidrocarburos

<150nm) L/mol·cm saturados
n→σ ∗ ΔE pequeña (λ ε=200-2000 Compuestos con:
=150-250 nm) L/mol·cm (halogenos, N, O, S)
n→π∗ ΔE pequeña (λ ε=10-10,000 Moléculas con
=200-295 nm) L/mol·cm Heteroátomos. En la
parte no saturada
π→π∗ ΔE grande ε= 100-20000 Compuestos con
λ=170-700 nm dobles enlaces
etilénicos
Moléculas con enlace σ
Moléculas con enlace π
Moléculas con electrones no
enlazantes n
Absorción en compuestos orgánicos
• Dienos Conjugados C=C-C=C

• Dienos homoanulares

• Dienos heteroanulares

• Un doble enlace es exocíclico cuando un sólo carbono

del doble enlace hace contacto con el anillo.
 Terminología
• Grupo cromóforo: grupo covalente insaturado que origina
bandas de absorción electrónicas (ππ*). Ejemplos típicos son los
grupos vinilo, carbonilo, fenilo, nitro.

• Grupo auxócromo: grupo saturado (generalmente con pares

electrónicos libres) que unido a un cromóforo altera tanto la
posición como la intensidad de la banda de absorción de éste.
Auxócromos típicos son los grupos –OH, -NH2, -Cl, -Br, -CH3.

• Efectos batocrómico e hipsocrómico: desplazamientos del

máximo de absorción de una banda a mayores o menores
longitudes de onda respectivamente, debido a la introducción
de un sustituyente, cambio de solvente o pH o cualquier otra
causa.

• Efectos hipercrómico e hipocrómico: incremento o decremento

de la intensidad de una banda de absorción debido a la
introducción de un sustituyente, cambio de solvente o pH o
cualquier otra causa.
Cromóforos y tipo de transiciones
A medida que
aumenta la
conjugación, el
sistema absorbe a
λ mayores , o sea
más hacia el
visible
 Ejemplos

Retinol
Reglas para la absorción de Dienos
Regla para la absorción de enona y dienona (carboxilos a
y b insaturados)
Calculo de la banda principal (transición p p*)
derivados del benceno sustituidos, ArCOG (en
Etanol)
Instrumentación para el Análisis
Instrumentación
• Fuente de Radiación

• Monocromador

• Fotómetro

• Área de Muestra

• Detector
• Fuente de energía
Una fuente de radiación ideal debe ser continua en una
amplia zona del espectro, tener una intensidad elevada
y que no varíe esta intensidad con la longitud de onda.
• Fuentes térmicas
– lámpara de filamento de Wolframio
• Fuentes de descarga eléctrica
– Lámpara de H- UV próximo.
– Lámpara de φH (Deuterio) UV próximo
– Lámpara de descarga de Xe : 250 y 600 nm,
– Lámpara de arco de Hg se utiliza para el calibrado de
instrumento
• Selección de λ
• Filtros de absorción:
Absorción selectiva de λ que no interesan

• Filtros de interferencia
Una parte de la radiación que llega es absorbida y
otra, se refleja
• Monocromador
Dispositivo que genera un haz de radiación de
gran pureza espectral (anchura de banda
estrecha) y que permite ir variando la λ de
manera continua.
• Detectores.
Elementos que convierten la radiación en un flujo de electrones y
posteriormente, en una corriente o voltaje en el circuito de lectura.
• Células fotovoltaicas
• Fototubos (Tubos fotoemisores)
• Tubos fotomultiplicadores
LEY DE LAMBERT-BEER
• A una longitud de onda en la que pueda ocurrir
absorción, la potencia de la radiación, transmitida a
través de una sustancia absorbente disminuye
logarítmicamente a medida que la longitud del trayecto
óptico y el número de especies absorbentes
incrementa aritméticamente.
• P = Po e-kbc
• Ln P/ Po = K b c
• A = Kbc
Aplicaciones de la Ley de Beer
El método de adición de estándar de un punto fue utilizado en la
determinación de fosfato mediante el método del azul de molibdeno. Una
muestra de orina de 5.00 mL fue tratada con reactivos de azul de molibdeno
para producir una especie química que absorbe radiación a 820 nm, después
de lo cual la muestra fue diluida a 100 mL. Una alícuota de 25.00 mL de esta
disolución resultó en una absorbancia de 0.428 (disolución 1). La adición de
1.00 mL de una disolución que contenía 0.0500 mg de fosfato a una segunda
alícuota de 25.00 mL resultó en una absorbancia de 0.517 (disolución 2).
Utilice estos datos para calcular la masa de fosfato en miligramos por mililitro
del espécimen.
Solución Sustituimos en la ecuación 26.4 y obtenemos:
Cx = A1csVs A2Vt 2 A1Vx
5
(0.428)(0.0500 mg PO432/mL)(5.00 mL) (0.517)(26.00 mL) 2
(0.428)(25.00 mL) 5 0.0780 mg PO432/mL
concentración de fosfato5 0.0780
mg mL
3
100.00 mL 2.00 mL

5 0.390 mg/mL
Esta es la concentración de la muestra diluida. Para obtener la
concentración de la muestra original de orina, debemos
multiplicar por 100.00/2.00. Por lo tanto: