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Biomateriales

3º Grado en Ingeniería de la Salud

Escuela Técnica Superior de Ingeniería Informática

Universidad de Málaga

Reservados todos los derechos.

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
Reservados todos los derechos.
INFORME DE PRÁCTICAS
Biomateriales
Ingeniería de la Salud

Autora: Duna de Luis Moura

DNI: 78980830A
Curso: 3º
Fecha: 7 de mayo de 2021

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 Duna de Luis Moura Informe de prácticas 07/05/2021

Introducción de las prácticas realizadas

En el presente documento se va a realizar un informe completo sobre las dos prácticas llevadas a
cabo en la asignatura de biomateriales durante el mes de abril. La primera sobre síntesis y
caracterización de hidroxiapatito y la segunda sobre la preparación de cemento dental de fosfato de
cinc.
Síntesis y caracterización de hidroxiapatito

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
El hidroxiapatito o hidroxiapatita (HA) es un mineral y un material biológico formado por
fosfato de calcio cristalino, cuya fórmula empírica ideal es Ca 5(PO4)3(OH) aunque hoy en día se
prefiere utilizar la fórmula de la celdilla unidad al ser más cómodo de representar (multiplicando
por 2 la empírica). El HA puro tiene una composición y propiedades mecánicas muy similares a las
del hueso cortical natural y al esmalte dental sin llegar a ser idénticos. Esto lo convierte en un
biomaterial muy interesante para la clínica actual.
Un método frecuente para sintetizar HA es por reflujo. El reflujo consiste en hacer gotear muy
lentamente una disolución diluida de ácido fosfórico (H3PO4) sobre una suspensión acuosa de
dihidróxido de calcio (Ca(OH)2) mientras se agita vigorosamente a unos 100ºC. La relación molar
entre el calcio y el fósforo debe ser de de 10/6, es decir, 1.67 moles de calcio por cada mol de
fósforo. Esta proporción se obtiene de la fórmula estequiométrica del HA (suponiendo un
rendimiento del 100%, cosa imposible ya que siempre tendremos impurezas). La reacción ácido-

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base que se produce es la siguiente:
6 H 3 P O 4 +10 Ca (OH )2 →Ca 10( PO 4 )6 (OH )2 +18 H 2 O
El precipitado tendrá un pH>10, este se filtrará y lavará, para después secarlo y calcinarlo a la
vez en el horno de mufla sometiéndolo a 900ºC durante unas 3 horas. Finalmente obtenemos el HA
que debemos caracterizar con las técnica de difracción de rayos X (permitiéndonos identificar las
fases cristalinas) y realizando una microscopía electrónica de barrido que nos permite hacer un
análisis cuantitativo de puntos específicos de la muestra.
Tal y como se ha comentado, dada la similitud del HA puro (que podemos obtener en los
laboratorios) con los materiales biológicos naturales, hace que sea un componente muy utilizado
hoy en día. Destacan sus usos en la creación de piezas dentales, cirugía ortopédica formando
colágeno, recubrimientos y rellenos de huesos, fijación de implantes, regeneración ósea, implantes
oculares, etc. Todas estas aplicaciones lo convierten en un material muy utilizado en la
investigación, especialmente en los campos de ingeniería de tejidos, odontología, oftalmología y
prostética.

Preparación de cemento dental de fosfato de cinc

Los cementos dentales se forman a partir de una mezcla de polvo y líquido que reaccionan y
forman una pasta que se endurece y solidifica. Existen muchos tipos de cementos dentales
utilizados hoy en día, pero el de fosfato de cinc es uno de los que se emplean con mayor frecuencia.
Para fabricarlo necesitaremos una disolución de ácido fosfórico que se añadirá a una mezcla de
óxidos (óxido de circonio y de magnesio). Se producirán dos reacciones ácido-base, una con cada
óxido (ZnO y MgO) con el ácido fosfórico (H3PO4) para dar lugar al cemento:
3 ZnO+2 H 3 PO 4 + H 2 O→Zn3 ( PO 4 )2+ 4 H 2 O
3 MgO+2 H 3 PO 4 + H 2 O→ Mg 3 (PO 4)2 + 4 H 2 O

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 Duna de Luis Moura Informe de prácticas 07/05/2021

Es fundamental controlar y medir de forma precisa las cantidades de disolución y proporción de

sólido/líquido, ya que influyen enormemente en las características finales del cemento. A mayor
cantidad de agua más rápido endurecerá y a menor cantidad de agua menor resistencia mecánica.
Esto hace que sea fundamental controlar los niveles de humedad en todo momento. Se debe evitar
el contacto de CO2 con los óxidos, ya que su presencia durante el proceso dará lugar a un material
final poroso y permeable a los microorganismos.
El sólido obtenido será un material de carácter básico basado en fosfato de zinc que protege la
pieza dental frente a los ataques ácidos de las bacterias que generan las caries dentales. Estará

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
formado por una parte cristalina y una amorfa. La cristalina estará compuesta mayoritariamente por
hopeita (este mineral es el principal componente del cemento) y por impurezas de óxido de zinc,
esto lo convierte en un material bifásico. En la parte amorfa encontraremos el óxido de magnesio.
Se emplea en odontología para restauración de piezas dentales utilizándolo como relleno (o base
para este), para colocación prótesis dentales, puentes y coronas, protección de la pulpa dental, etc.
Pueden ser permanentes o provisionales. Si bien es cierto que hoy en día se están sustituyendo los
cementos dentales como este por cementos de ionómeros vítreos que generan cementos vítreos con
alto contenido de flúor (posible prevención de la caries dental).

Desarrollo de las prácticas

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Antes de entrar a un laboratorio es fundamental conocer las normas básicas a seguir, algunas de
ellas son: llevar siempre la bata abrochada, utilizar gafas protectoras cuando sea necesario, evitar
accidentes en el laboratorio que puedan producir cortes y quemaduras, llevar el pelo largo recogido,
las mesas de trabajo despejadas, está prohibido fumar, comer o beber dentro del laboratorio, hay
que lavarse bien las manos antes y después de entrar. Los productos químicos se manipularán con
guantes y utilizando pipetas dentro de cabinas de extracción, nunca se dejan las reacciones sin
vigilancia, no se deben oler los frascos directamente, evitaremos que se produzcan salpicaduras, hay
que leer el etiquetado de los productos antes de usarlos y tener cuidado cuando haya que
transportarlos.
Es importante trabajar sin prisas, mantener las mesas y vitrinas siempre limpias, y tener una
actitud responsable y atenta, esto evitará gran parte de los posibles accidentes.

Síntesis y caracterización de hidroxiapatito

Se emplearán como reactivos Ca(OH)2 sólido y H3PO4 a un 54% de disolución (9,23 M). Como
utensilios utilizaremos un matraz fondo de 50ml, refrigerante, una placa calefactora con agitación,
un núcleo magnético para agitar, una pipeta Pasteur, tubos de centrífuga de 40ml, pesa-sustancias de
precisión, un vaso de precipitado de 40ml y otro de 100ml, una pipeta graduada de 5ml y una
espátula.
El procedimiento consiste en pesar 5,6g de Ca(OH) 2 en un vaso de precipitado de 100ml y
añadir 30ml de agua. Introducimos el núcleo magnético y agitamos a temperatura ambiente para
obtener una suspensión homogénea. Añadimos gota a gota un total de 5ml de la disolución de
H3PO4 con la pipeta Pasteur de 5ml. Cuando acabe la reacción separamos el sólido por
centrifugación y lavamos 2 veces con agua destilada. Se seca el resultado y se calcina a 900ºC en el
horno de mufla para eliminar todo el agua, consiguiendo aumentar la pureza del HA y disminuir su
fracción amorfa. El material final es bastante puro y contiene al menos 3 fases cristalinas diferentes
que se comentarán en la siguiente sección.

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Preparación de cemento dental de fosfato de cinc
En este caso emplearemos como reactivos H3PO4 al 54% de disolución, óxido de zinc (ZnO) y
óxido de magnesio (MgO). Los utensilios necesarios son 2 vasos de precipitado de 40mL, una
pipeta Pasteur, 2 placas de toque y una espátula.
El procedimiento comienza mezclando en un vaso de precipitado 1,6g de óxido de zinc y 0,2 de
óxido de magnesio. Homogeneizamos bien con la espátula. Pesamos 1g de disolución acuosa de
ácido fosfórico y mezclamos en una placa de vidrio seca con el polvo de óxidos ya preparado. Para
lograr una consistencia homogénea se divide el polvo en 4 partes (½, ¼, ⅛ y ⅛) y se mezclan de
menor a mayor con el líquido mezclando durante 90 segundos cada uno. La consistencia óptima se
da cuando la pasta cae lentamente de la espátula. Dejamos endurecer mínimo 5 minutos en una
placa de toque.

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Resumen de los resultados
Las muestras obtenidas en ambas prácticas se han analizado por difracción de rayos X (DRX) y
por microscopía electrónica de barrido (SEM) con el que además se hizo un microanálisis
semicuantitativo por EDS (espectroscopía de la energía dispersiva de rayos X). Tanto para SEM
como para EDS se necesita metalizar las muestras con oro para hacerlas conductoras
eléctricamente.
Síntesis y caracterización de hidroxiapatito
En la microscopía SEM de la muestra de HA podemos ver que sus partículas son de naturaleza
submicrométrica, estas generan aglomerados con forma de placas de tamaño variable y morfología
irregular, dejando claro que se trata de un material cristalino. Vemos también que está muy
hidratado ya que el porcentaje de agua que tiene es elevado antes de sinterizar (figura 1).

Figura 1. Muestra de HA vista al microscopio electrónico de barrido (SEM)

En la difracción de rayos X (DRX) obtenemos un difractograma de la muestra de HA y

podemos ver que está compuesto por 3 fases cristalinas diferenciadas (hidroxiapatita 75%, monetita
24% y portlandita <1%) más una fase amorfa (la línea base es amorfa). La portlandita es hidróxido
de calcio que ha quedado sin reaccionar y la monetita hidrógeno de fosfato de calcio. Cada fase
cristalina se corresponde con uno o varios picos el difractograma. Todo esto se ha obtenido con el

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software HighScorePure donde se ha analizado el difractograma y comparado con las fases

cristalinas de distintos materiales para saber su composición. Este material de muestra no se había
sinterizado por lo que no es todo lo puro y cristalino que debería (figura 2).
En cambio si sinterizamos el HA calcinandolo a 900ºC obtenemos un difractograma mucho más
puro, sin componente amorfo ya que se ha eliminado todo el agua y podemos ver picos claros y
definidos de las fases cristalinas del hidroxiapatito que ahora es prácticamente puro (figura 3).

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Figuras 2 y 3. Difractograma de una muestra de HA sin sinterizar a la izquierda y ya sinterizado a la
derecha.

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Preparación de cemento dental de fosfato de cinc
En la microscopía SEM de la muestra de ZnP podemos ver que está formado por partículas de
tamaño variable pero mayores que los de HA. Presentan un hábito más cristalino donde
encontramos un crecimiento de cristales en direcciones determinadas (anisotropía), con una
morfología regular y poca variabilidad de tamaño (figura 4).

Figura 4. Muestra de cemento dental de fosfato de cinc visto al microscopio electrónico de barrido (SEM)

Con la técnica EDS se analizó de forma cuantitativa la superficie del material para conocer la
composición de los materiales amorfos que lo componen y que no veríamos en la DRX (en este
caso el MgO). Si hacemos un mapping elemental por colores de micro-estructuras con los
resultados del SEM y del EDS podemos ver la distribución uniforme de los elementos en las

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partículas del cemento dental. En este mapping vemos los componentes amorfos: oxígeno, fósforo,
magnesio y zinc (figura 5).

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Figura 5. Mapping elemental por colores de los elementos oxígeno, fósforo, magnesio y zinc, obtenido al
realizar un EDS sobre los resultados del SEM en la muestra de cemento dental.

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En la DRX al analizar el difractograma con el software mencionado encontramos 2 fases
cristalinas: la hopeita (99%) y el óxido de zinc sobrante que no reaccionó (<1%) (figura 6). El
cemento final tiene carácter básico debido a el óxido sobrante es básico.

Figura 6. Difractograma de una muestra de cemento dental de fosfato cálcico

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No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
Cuestiones
A) ¿Qué tipo de material se obtiene por el método de reflujo?
El método del reflujo se utiliza para realizar hidroxiapatito sintético y consiste en hacer gotear
muy lentamente una disolución diluida de ácido fosfórico (H 3PO4) sobre una suspensión acuosa de
dihidróxido de calcio (Ca(OH)2) mientras se agita vigorosamente a unos 100ºC. La reacción ácido-
base que se produce es: 6 H 3 P O4 +10 Ca(OH )2 →Ca 10(PO 4 )6 (OH )2 +18 H 2 O .
Como podemos ver el resultado de este método es un HA muy hidratado.
B) ¿En qué se diferencia con el material calcinado a 900 °C?
El material calcinado o sinterizado no contiene ningún resto de agua ni de otras impurezas por
lo que cuando lo analizamos con el difractograma vemos que se ha eliminado el componente
amorfo del material y quedan perfectamente definidos los picos de las fases cristalinas del HA

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(figura 3).
C) ¿Para qué tipo de aplicación se utilizaría el material calcinado?
Tal y como se ha mencionado, el HA se utiliza en la creación de piezas dentales, cirugía
ortopédica formando colágeno, recubrimientos y rellenos de huesos, fijación de implantes,
regeneración ósea, implantes oculares, etc.
D) ¿Sería adecuado para Ingeniería de tejidos este último producto? ¿Por qué?
Depende del tipo de sinterización que hayamos realizado. Si unicamente hemos sinterizado el
HA en polvo obtendremos un producto denso, con una porosidad del 5% y un tamaño de poro
inferior a la micra. En cambio si sinterizamos el HA con un agente formador de poros como es el
naftaleno, cuando lo sometamos a altas temperaturas la mezcla el naftaleno se volatilizará
generando poros. Obtenemos así un material con una porosidad del 65% y un tamaño de poro de
unas 100 micras.
En ingeniería de tejidos suele ser más interesante emplear un HA poroso ya que esto permite a
las células crecer en torno a este. De esta forma la fijación e integración del biomaterial con la
estructura natural será muy buena.
E) Si el rendimiento para el material de apatito, después de calcinar a 900 °C fuera del 95%,
calcular las cantidades de este producto que obtendríamos empleando: 6, 10 y 15 g de Ca(OH),
respectivamente. Suponer que el ácido fosfórico añadido es siempre el que corresponde a la
reacción química ajustada.
De forma ideal según la fórmula empírica de síntesis del HA, obtenemos 1 mol de HA por cada
10 moles de Ca(OH)2. Como la eficiencia es de un 95% lo que ocurre es que obtenemos 0.95 moles
de HA por cada 10 moles de Ca(OH) 2. Utilizaremos la siguiente fórmula y la aplicaremos a cada
cantidad de Ca(OH)2 marcada en el enunciado:
0,95 mol HA 1 mol Ca(OH )4 1004 g HA
· · · X g Ca(OH )4
10 mol Ca(OH )4 74 g Ca(OH )4 1 mol HA
Sustituimos en la X los valores del enunciado. Si empleamos 6g de Ca(OH) 2 obtendríamos
7,73g de HA, con 10 gramos serían 12,89g de HA y con 15 gramos obtenemos 19,33g de HA.

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F) Explica la finalidad de un cemento dental.

Se emplea en odontología para restauración de piezas dentales utilizándolo como relleno (o
como base para este), para colocación prótesis dentales, puentes y coronas, protección de la pulpa
dental, entre otros usos. Pueden ser permanentes o provisionales.
G) Escribe las reacciones, ajustadas, correspondientes a la preparación del cemento dental obtenido
en el laboratorio.
Se producirán dos reacciones ácido-base, una para cada óxido (ZnO y MgO) con el ácido

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fosfórico (H3PO4) dando lugar al cemento dental:
(1) 3 ZnO +2 H 3 PO 4 + H 2 O→Zn3 ( PO 4 )2+ 4 H 2 O
(2) 3 MgO+2 H 3 PO 4 + H 2 O→ Mg 3 ( PO 4)2 + 4 H 2 O
H) ¿Qué tipo de reacciones se dan en el proceso de preparación del cemento dental?
Son reacciones ácido-base, donde la base son los óxidos ZnO y MgO, y el ácido es el fosfórico
H3PO4. Esto se puede ver ya que al mezclar ácido fosfórico con agua obtenemos protones
hidratados (H3O+) y si mezclamos cualquiera de los óxidos metálicos con protones (H +) obtenemos
agua y el catión metálico.
I) ¿De qué materiales cristalinos está constituido el cemento dental?

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El sólido cristalino obtenido estará compuesto mayoritariamente por un mineral denominado
hopeita, siendo este mineral el principal componente del cemento dental. Es un sistema cristalino
ortorrómbico que se encuentra en la naturaleza. La parte cristalina del cemento dental contendrá
impurezas de óxido de zinc (15%) y el resto será hopeita (85%) tal y como vemos en la figura 2.
J) ¿Qué diferencias existen entre el cemento dental preparado y los ionómeros vítreos?
Como hemos visto el cemento dental preparado contiene dos fases cristalinas y una amorfa, y se
obtiene mediante la reacción de dos óxidos con ácido fosfórico.
Los ionómeros vítreos son cementos vítreos que se obtienen al reaccionar flúor-silicato de
calcio y aluminio, ambos en polvo, con ácido poliacrílico. El material resultantes contiene flúor por
lo que se utiliza para la prevención de la caries dental. Ambos materiales se utilizan en restauración
dental.
Conclusión
Los biomateriales desempeñan un papel muy importante en la medicina actual ya que son
capaces de restablecer funciones y facilitar la curación de pacientes tras una lesión o enfermedad. El
campo de la ciencia de biomateriales ha crecido significativamente durante los últimos años gracias
a los descubrimientos en ingeniería de tejidos y medicina regenerativa principalmente. Sin embargo
el uso de biomateriales en medicina ha estado presente desde la antigüedad.
En esta práctica hemos aprendido a sintetizar dos biomateriales punteros en la clínica actual y
además hemos analizado su composición y estructura con diversas técnicas modernas. Conocer sus
estructuras nos permite adaptarlos a la función exacta que necesitemos. Debemos tener muy claro
como interaccionarán en determinados ambientes biológicos, para lo que necesitamos estudiar sus
limitaciones y requisitos como hemos hecho aquí.
Aún queda mucho por investigar, estudiar y mejorar en este campo tan importante de la ciencia,
siempre con el objetivo de mejorar la vida de las personas.

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