UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE LOS ANDES

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

Escuela Profesional de Enfermería

MICROSCOPÍA

Docente:
MOREANO CARRASCO, Saul
Presentado por:
BELLIDO CORONADO, Greysy Analy 202312627G
VALLEJOS LÓPEZ, Wilder 202313298k
CCASANI QUISPE, Theylu Mayerdie 202312780J
CAMACHO CAYLLAHUA, Yunny Karen 202312750E
ZANABRIA PEREZ, Emily 202319697d
CHÁVEZ FANOLA, Mayumy 202312779k
Abancay – Apurímac – Perú
2024

1
 DEDICATORIA
Dedicamos este trabajo monográfico a
nuestras adoradas familias, en especial a
nuestros padres, por su constante apoyo y
motivación durante todo este proceso.
Gracias por ser nuestra mayor inspiración y
por ser nuestro motor en los momentos
difíciles.
Greysy Analy Bellido Coronado
Wilder Vallejos López
Theylu Mayerdie, Ccasani Quispe
Yunny Karen Camacho Cayllahua
Emily Zanabria Perez
Mayumy Chávez Fanola

2
 AGRADECIMIENTO
A la Universidad Tecnológica De Los
Andes de Abancay, por su valiosa
contribución con la mejora de la calidad
educativa de nuestro país, dando
oportunidades y facilidades de superación a
los alumnos con la elaboración de este
trabajo.
Al docente Saul Moreano Carrasco, por
compartir sus conocimientos, por su
paciencia, dedicación y compromiso con mi
formación académica, este trabajo es el
resultado del esfuerzo y estoy muy
agradecido por todo el apoyo brindado
durante el proceso.
A nuestras queridas familias, por su
comprensión, motivación y preocupación
en los momentos más importantes de
nuestras vidas.
Greysy Analy Bellido Coronado
Wilder Vallejos López
Theylu Mayerdie, Ccasani Quispe
Yunny Karen Camacho Cayllahua
Emily Zanabria Perez
Mayumy Chávez Fanola

3
 INTRODUCCIÓN
La microscopía ha sido una herramienta fundamental en el avance del conocimiento
científico y ha revolucionado nuestra comprensión del mundo que nos rodea. Desde los
primeros días de la observación microscópica hasta las tecnologías de vanguardia de hoy
en día, la capacidad de ampliar y explorar la estructura y la composición de objetos a
escala microscópica ha sido crucial en campos tan diversos como la biología, la medicina,
la nanotecnología y la ciencia de materiales.
En esta monografía, exploraremos los fundamentos, la historia, los diferentes tipos de
microscopios y las aplicaciones actuales en el campo de la microscopía. Comenzaremos
con una mirada retrospectiva a los orígenes de la microscopía, explorando los primeros
avances y las figuras pioneras que sentaron las bases para el desarrollo posterior. Luego
nos sumergiremos en los principios básicos de la microscopía, comprendiendo cómo
funciona esta herramienta esencial para la investigación científica.
Después, examinaremos en detalle los diferentes tipos de microscopios disponibles, desde
los microscopios ópticos convencionales hasta los microscopios electrónicos de alta
resolución y las tecnologías emergentes como la microscopía de sonda de barrido. Junto
con esto, destacaremos las aplicaciones prácticas de la microscopía en diversas disciplinas
científicas y su impacto en nuestra comprensión del mundo natural y artificial.
Finalmente, exploraremos los últimos avances en tecnología microscópica y
visualizaremos el futuro de este campo en constante evolución. Desde nuevas técnicas de
imagen hasta aplicaciones innovadoras en campos interdisciplinarios, la microscopía
continúa desempeñando un papel vital en la investigación científica y el progreso
tecnológico.
Esta monografía ofrece una visión completa y actualizada del fascinante mundo de la
microscopía, destacando su importancia y su continuo impacto en la ciencia y la sociedad
en general. A través de esta exploración, esperamos inspirar un mayor interés y aprecio por
esta poderosa herramienta que nos permite ver lo invisible y revelar los misterios del
universo microscópico.

4
 RESUMEN
La microscopía, una herramienta fundamental en la investigación científica, ha
desempeñado un papel crucial en la ampliación de nuestro entendimiento del mundo a
escala microscópica. Esta monografía ofrece una exploración exhaustiva de la microscopía,
desde sus orígenes históricos hasta los avances tecnológicos más recientes.
Comenzando con una revisión histórica, se destacan los hitos clave en el desarrollo de la
microscopía, desde los primeros microscopios ópticos hasta los modernos microscopios
electrónicos de alta resolución, se discuten los principios fundamentales de la microscopía,
incluyendo resolución, contraste y ampliación, así como los diferentes tipos de
microscopios disponibles y sus aplicaciones específicas en campos como la biología, la
medicina, la nanotecnología y la ciencia de materiales.
La monografía también examina los avances recientes en tecnología microscópica, como la
microscopía de sonda de barrido y la microscopía de superresolución, y explora cómo estas
innovaciones están expandiendo los límites de la observación microscópica. Se destaca el
papel de la microscopía en la investigación científica actual y se discuten las futuras
tendencias y aplicaciones potenciales en áreas como la medicina personalizada, la
ingeniería de tejidos y la nanomedicina.
En resumen, esta monografía ofrece una visión completa de la microscopía, destacando su
importancia histórica, sus principios fundamentales, sus aplicaciones actuales y los avances
tecnológicos que continúan impulsando su evolución, lo cual nos sirve como una guía
informativa y actualizada para todas las personas interesadas en este campo dinámico ya
que está en constante expansión de la ciencia.
Palabras clave:
Microscopía, orígenes históricos, principios fundamentales, aplicaciones actuales.

5
 ABSTRACT
Microscopy, a fundamental tool in scientific research, has played a crucial role in
expanding our understanding of the world on a microscopic scale. This monograph offers a
comprehensive exploration of microscopy, from its historical origins to the most recent
technological advances.
Beginning with a historical review, key milestones in the development of microscopy are
highlighted, from the first optical microscopes to modern high-resolution electron
microscopes, the fundamental principles of microscopy are discussed, including resolution,
contrast and magnification, as well as the different types of microscopes available and their
specific applications in fields such as biology, medicine, nanotechnology and materials
science.
The monograph also examines recent advances in microscopy technology, such as
scanning probe microscopy and super-resolution microscopy, and explores how these
innovations are expanding the boundaries of microscopic observation. The role of
microscopy in current scientific research is highlighted and future trends and potential
applications in areas such as personalized medicine, tissue engineering, and nanomedicine
are discussed.
In summary, this monograph offers a complete overview of microscopy, highlighting its
historical importance, its fundamental principles, its current applications and the
technological advances that continue to drive its evolution, which serves as an informative
and up-to-date guide for all interested people. in this dynamic and constantly expanding
field of science.
Keywords:
Microscopy, historical origins, fundamental principles, current applications.

6
 ÍNDICE

Abancay – Apurímac – Perú...........................................................................................................1

2024..................................................................................................................................................1
DEDICATORIA..............................................................................................................................2
AGRADECIMIENTO.....................................................................................................................3
INTRODUCCIÓN...........................................................................................................................4
RESUMEN.......................................................................................................................................5
ABSTRACT.....................................................................................................................................6
CAPITULO I...................................................................................................................................8
Historia de la Microscopia..............................................................................................................8
MICROSCOPIO FOTÓNICO SIMPLE Y COMPUESTO...........................................................9
CONTRIBUCIONES CLAVE DE CIENTÍFICOS FAMOSOS EN LA HISTORIA DE LA
MICROSCOPÍA........................................................................................................................12
CAPITULO II...............................................................................................................................14
Principios Básicos de la Microscopía...........................................................................................14
Tipos de microscopía electrónica..................................................................................................16
Principios Básicos de la Microscopía.......................................................................................18
Funcionamiento básico de un Microscopio..............................................................................20
CAPITULO III..............................................................................................................................23
Aplicaciones de la Microscopía....................................................................................................23
En Ciencia de Materiales..........................................................................................................26
En Ciencias Forenses.................................................................................................................28
CONCLUSIONES.........................................................................................................................31
BIBLIOGRAFÍA...........................................................................................................................33

7
 CAPITULO I

Historia de la Microscopia

1.1. Historia del Microscopio

Los diseños de microscopio un inicio era relativamente sencillos con tendencia artística de
las épocas en que fueron construidos, pronto fueron cambiando conforme se buscaban
otros parámetros más prácticos como la estabilidad del mecanismo como la necesidad de
aprovechar la visión estereoscópica del ser humano, el desarrollo de la ergonomía, que
exige cada día adaptar los artilugios creados por la humanidad a la mayor comodidad y a la
anatomía del individuo, el rápido avance de la electricidad, electrónica, computación y
cibernética, que se han aprovechado en microscopía para crear nuevas aplicaciones de ésta,
(Gracia Hector & Olmos Pulido, 2018)
.

Ya los antiguos sabían que los espejos curvos y las bolas de cristal estaban llenos de agua
añade dimensión a la imagen, en las primeras décadas del siglo XVII, luego comienza a
experimentar con lentes (llamadas así porque tienen forma de lentes) en donde su objetivo
era lograr el mayor crecimiento posible, para ello utilizaron otro instrumento con lentes, un
telescopio de gran éxito utilizado por primera vez con fines astronómicos por Galileo en
1609, en ese entonces era el organismo más pequeño conocido eran los pequeños insectos
diminutos, por supuesto, se supone que no existen organismos natural más pequeño,
(Lanfranconi, 2010)
.

Se utilizaban instrumentos o microscopios (del griego, "ver pequeño") para ampliar el

campo de visión de los objetos. La biología se expandió y se extendió por primera vez
gracias a un mecanismo que empujó la visión humana más allá de sus límites naturales
para ver áreas más pequeñas. Así, los naturalistas pueden describir pequeños organismos
con detalles que serían imposibles, mientras que los anatomistas pueden revelar estructuras
nunca antes vistas. Hay dos tipos de microscopios: microscopios simples y microscopios
compuestos. Un simple no es más que una lente montada, mientras que un compuesto
consta de múltiples lentes y fue inventado por Zacharias Jansen en los Países Bajos.Los
detalles sobre el primer microscopio no son claros pero existe un microscopio hallado en

8
Middleburg, Holanda correspondiente a Jansen que contenía dos lentes,
(Lanfranconi, 2010)
.

El microscopio simple o lupa es un instrumento de amplificación de imágenes que consiste

en utilizar de una o más lentes convergentes en un solo sistema óptico y dependiendo de la
curvatura de la superficie de los lentes, las lupas pueden ampliar las imágenes de los
objetos desde 5, 8,10, 12, 20 y hasta 50 veces, formando una imagen de mayor tamaño,
(Montalvo, 2010)
.

El ser humano ha evolucionado a lo largo de la historia, creando herramientas,

desarrollando el lenguaje y realizando importantes avances científicos y tecnológicos,
desde el descubrimiento del fuego hasta la exploración del cosmos y el desarrollo de
disciplinas como la biotecnología y la nanotecnología, el ser humano ha contribuido
significativamente al progreso de la humanidad, en Europa, durante los siglos XVI al
XVIII, se vivió un período de gran avance científico y tecnológico, con importantes
descubrimientos en física, química y medicina, el estudio de la percepción visual ha sido
un tema de interés desde la antigüedad, con teorías formuladas por los griegos clásicos y
avances en la óptica realizados por científicos como Kepler, Newton y Helmholtz, en el
siglo XX, David Marr contribuyó con soluciones a los problemas del sistema de visión
humano a través de mecanismos artificiales, (María Sánchez Lera & Rosa Oliva García, 2015)
.

MICROSCOPIO FOTÓNICO SIMPLE Y COMPUESTO

Los microscopios fotónicos o compuestos que se emplean actualmente tienen sus
antecesores en los instrumentos ópticos desarrollados, en el periodo comprendido entre

1. Microscopio compuesto fabricado por los Jansen.

1590 y 1610, por Hans el padre y Zacarías el hijo Janssen, quienes mediante el tallado
cuidadoso de lentes biconvexas, fueron los más utilizados en el estudio de células como

9
también tejidos, donde se fue perfeccionando, tanto en su parte óptica como en su parte
mecánica, gracias a los adelantos tecnológicos aplicados a los componentes ya
mencionados, (Montalvo, 2010).

Hoy en día, los microscopios de fotones son herramientas que se utilizan a diario en
laboratorios de investigación y diagnóstico, así como en clases de biología, embriología,
histología, microbiología y patología.

Componentes Del Microscopio Fotónico, el microscopio fotónico compuesto está

integrado por tres tipos de componentes:

1. COMPONENTES MECÁNICOS: Son aquellos que sirven de sostén, movimiento y

sujeción de los sistemas ópticos y de iluminación, así como de los objetos que se
van a observar.
 Base o pie: Es un soporte metálico, amplio y sólido en donde se apoyan y
sostienen los otros componentes del microscopio.

 Brazo, estativo o columna: Permite la sujeción y traslado del microscopio.

Soporta al tubo óptico, a la platina y el revolver.

 Platina: Superficie plana en posición horizontal con una perforación

circular central. La muestra (el portaobjetos que contiene la muestra a
analizar) se coloca sobre ella y se fija al escenario mediante abrazaderas o
carros. Elementos de acción especiales facilitan el movimiento de la
preparación de derecha a izquierda y de adelante hacia atrás.

 Tubo óptico: Consiste en un cilindro metálico que suele medir 160mm o

170 mm de longitud (dependiendo del fabricante del microscopio) el cual en
un extremo, está conectado al revolver o porta objetivos y en el otro se
relaciona con el (los) ocular(es).

 Revolver o porta objetivos: Es un componente que gira alrededor de un eje

con la finalidad que los objetivos que sostiene coincidan de manera
perpendicular con la perforación central de la platina, en su superficie
inferior posee varios agujeros donde se atornillan los objetivos.

10
  Tornillos macrométrico y micrométrico: Generalmente están situados en
la parte inferior del brazo o columna. Pueden estar separados (en los
microscopios antiguos) o el tornillo micrométrico está incorporado en la
circunferencia del tornillo macrométrico (microscopios actuales), ambos
tornillos permiten el desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo
con la finalidad de acercar o alejar la preparación hacia los objetivos y así
conseguir un enfoque óptimo de la imagen.

 Engranajes y cremallera: Constituyen mecanismos de desplazamientos de

las diferentes partes del microscopio.

 Cabezal: Es un componente situado en relación con el tubo del microscopio

que alberga principalmente prismas o espejos que sirven para acondicionar
en él dos o más oculares, o sistemas mecánicos que soportan cámaras
fotográficas, de vídeo o sistemas de proyección de la imagen.

2. COMPONENTES ÓPTICOS: Son los objetivos, los oculares, el condensador y los

prismas. Los tres primeros están constituidos por sistemas de lentes positivos y
negativos.

2 Diagrama de los principales componentes de un condensador y

recorrido de los rayos luminosos.

11
Está formado por una o dos lentes convergentes que reúnen los rayos luminosos y los
orientan hacia la abertura central de la platina, mediante un mecanismo de cremallera se
acerca o aleja de la platina. También tiene incorporado un diafragma iris que regula la
entrada de luz todo ello con la finalidad de concentrar la mayor cantidad de rayos
luminosos en el plano donde está situado el objeto a observar, la mayoría de los
condensadores de los microscopios actuales también poseen una apertura numérica que
indica la cantidad de luz que puede captar y luego enviar hacia la preparación,
(Vilchez, 2020)
.

 Condensador: Es el componente óptico que tiene como función principal

concentrar y regular los rayos luminosos que provienen de la fuente
luminosa.
 Objetivos: Los objetivos están considerados los elementos más importantes
en la formación de la imagen microscópica, ya que estos sistemas de lentes
establecen la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que
tiene para captar los detalles de esta (poder de resolución), están
constituidos también por un juego de lentes, en este caso, convergente y
divergente, para eliminar, en la medida de lo posible, una serie de
aberraciones que afectarían la calidad de las imágenes formadas.

CONTRIBUCIONES CLAVE DE CIENTÍFICOS FAMOSOS EN LA

HISTORIA DE LA MICROSCOPÍA
La microscopía ha sido fundamental para la comprensión del mundo que nos rodea a nivel
microscópico, varios científicos famosos han realizado contribuciones clave en este campo
a lo largo de la historia, (Lanfranconi, 2010).

Aquí hay algunas de las contribuciones más destacadas:

1. Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723):

- Considerado el padre de la microbiología, Leeuwenhoek diseñó microscopios simples

pero efectivos y realizó observaciones pioneras de microorganismos, células sanguíneas y
otras estructuras biológicas.

2. Robert Hooke (1635-1703):

12
 - Autor de "Micrographia" (1665), Hooke fue el primero en utilizar el término "célula"
para describir las unidades estructurales básicas de los organismos vivos. También observó
estructuras como el corcho, identificando las células de la corteza de las plantas.

3. Ernst Abbe (1840-1905):

- Abbe fue un físico alemán que formuló las teorías fundamentales para la microscopía
óptica moderna. Desarrolló la teoría de la abberación, y en colaboración con Carl Zeiss,
mejoró significativamente el diseño de los microscopios, introduciendo la "apertura
numérica" para mejorar la resolución.

4. Louis Pasteur (1822-1895):

- Pasteur utilizó microscopios para estudiar microorganismos y desarrolló la teoría de los

gérmenes, que fue crucial para el avance de la microbiología y la medicina. Sus
investigaciones sobre la fermentación y la pasteurización también tuvieron un gran
impacto en la industria alimentaria y en la prevención de enfermedades.

5. Robert Koch (1843-1910):

- Utilizando técnicas de microscopía, Koch identificó el agente causante de la

tuberculosis y demostró que era una bacteria. También desarrolló métodos para aislar y
cultivar bacterias, sentando las bases de la bacteriología moderna y la microbiología
médica.

6. Albert Claude (1899-1983):

- Claude fue pionero en el uso del microscopio electrónico para estudiar estructuras
celulares. Su trabajo contribuyó al desarrollo de la citología y la biología celular moderna,
permitiendo una comprensión más profunda de la organización interna de las células.

7. Ernst Ruska (1906-1988):

- Junto con Max Knoll, Ruska desarrolló el primer microscopio electrónico en 1931. Este
avance permitió una resolución mucho mayor que la microscopía óptica tradicional, lo que
revolucionó nuestra comprensión de la estructura celular y molecular.

Estos son los científicos cuyas contribuciones han sido fundamentales para el desarrollo de
la microscopía y nuestra comprensión del mundo a nivel microscópico.

13
 CAPITULO II

Principios Básicos de la Microscopía

2.1. Tipos de Microscopios.

Existen diferentes tipos de microscopios que deseamos explicar con más detalle.

2.1.1. Microscopio de luz transmitida.

La microscopía de luz transmitida se utiliza para observar preparaciones
transparentes y muy finas. Cuanto más detallada sea la preparación, más precisa
será la observación. Sin embargo, puede utilizar microscopios de luz transmitida
para observar la superficie de la
muestra de cuerpos opacos
como gránulos o precipitados.
En tales casos, la preparación se
observa como un juego de luces
y sombras. En este tipo de
microscopio, la luz suele
proyectarse desde abajo a través
de una preparación transparente. Si desea observar más de cerca una muestra
particular depositada en el escenario, lo mejor es utilizar un microscopio invertido.
En este tipo de microscopio la iluminación es de arriba a abajo.
La microscopía invertida se usa con frecuencia en la hidrogeología, hidrobiología y
la medicina, como el tipo de construcción conlleva que la distancia entre el objeto y
el objetivo sea bastante grande, esto hace posible la contemplación de preparados
más gruesos ,(Vilchez, 2020).

2.1.2. Microscopio de luz Reflejada (microscopio

óptico).

14
 En este tipo de microscopio, la muestra se ilumina desde arriba a través de la lente o
desde un lado. La luz reflejada por la muestra es capturada por la lente del objetivo.
Gracias a esta tecnología se pueden utilizar preparaciones opacas o espesas. La
microscopía de luz reflejada se utiliza a menudo en microscopía de fluorescencia o
mineralogía.

2.1.3. Microscopio estereoscópico (microscopio óptico).

Los microscopios estereoscópicos son básicamente microscopios de luz reflejada,

el preparado se suele iluminar desde la parte superior o inferior, la mayoría de los
microscopios estereoscópicos permiten iluminar también desde la parte inferior, los
microscopios estereoscópicos se diferencian de otros microscopios en que disponen
de dos entradas de luz separadas, que están ordenados en un ángulo determinado,
cada entrada de luz integra su propio objetivo y ocular, algunos microscopios
estereoscópicos integran una lente de aumento integrada delante del
objetivo (Vilchez, 2020).

2.1.4. Microscopio de fluorescencia (microscopio óptico).

Aquí se suele excitar desde un colorante fluorescente en la muestra mediante una

luz con una determinada longitud de onda desde el exterior, el colorante
fluorescente emite la luz, esa luz tiene una longitud de onda más larga que la luz
excitada (Soke’sShift). En la trayectoria del rayo se puede separar mediante filtros
ópticos la luz fluorescente de la luz excitada, y reenviarla al ocular o la cámara, el
límite de resolución de un microscopio de fluorescencia puede estar muy por
debajo de un microscopio óptico convencional, lo que permite contemplar con
precisión las estructuras de una célula o los procesos de células vivas.

2.1.5. Microscopio confocal.

Este tipo de microscopía es una forma particular de la microscopía óptica o

fluorescente, en este caso se escanea secciones ópticas muy finas y se compone una

15
 imagen tridimensional, como cada sección es una imagen muy nítida, se consigue
una imagen 3D muy bien enfocada.

2.1.6. Microscopio STED (Microscopio de fluorescencia).

Este tipo de microscopía es un método más reciente aún de la microscopía de

fluorescencia, con la que se puede eludir el límite de resolución definido por Abbe.
La ventaja es que en comparación con un microscopio óptico convencional, el
límite de reproducción es muy superior, lo que permite enfocar con mucha nitidez
detalles de estructuras, con el microscopio STED consigue una resolución mejor
que con un microscopio láser convencional, en octubre de 2014, el investigador
Stefan Hell fue galardonado con el premio Nobel de la química por sus trabajos de
investigación con el microscopio STED.

2.1.7. Microscopio electrónico.

Dicho de forma muy sencilla, la microscopía electrónica usa haz de electrones en

vez de luz, como ya se sabe, estos tienen una longitud de onda mucho más corta
que la luz visible, por lo que se consigue una resolución más alta en el rango de las
estructuras atómicas, existe una amplia variedad de electrones, aquí indicamos sólo
los tipos más comunes ,(Vilchez, 2020).

Tipos de microscopía electrónica

2.1.7.1. Microscopio electrónico de transmisión (TEM).

En este caso un objeto es irradiado por electrones. Los microscopios TEM

(microscopios electrónicos de transmisión) son como los microscopios de

16
 luz transmitida, donde la absorción juega un papel importante, actualmente
la resolución que se consigue es de aprox. 0,05 nm.

2.1.7.2. Microscopio electrónico de barrido (REM), Scanning Elektron

Microscopy (SEM).

Aquí se dirige un haz de electrones finamente concentrado en una retícula

determinada sobre la prueba metalizada. Los electrones secundarios
(contraste) emitidos desde la superficie se miden como señal y se convierten
en una imagen óptica, para alcanzar un haz de electrones ininterrumpido,
la medición se realiza en una alto vacío (Vilchez, 2020).

2.1.7.3. Microscopio de fuerza atómica, Atomic Force Microscopy (AFM).

Este método sirve para presentar una presentación superficial, la prueba es

palpada en una retícula predefinida por una punta afilada sujetada a un
muelle de ballesta. Gracias a la fuerza nuclear, se mantiene constante la
distancia a la superficie, la deformación del muelle de ballesta es captada
por la reflexión del haz de luz láser por un sensor óptico, y presentado por
líneas. Según la rugosidad a comprobar, puede detectar diferencias en un
rango de 0,1 a 10 nm.

2.1.7.4. Microscopio de efecto túnel, Scanning Tunnelling Microscopy

(STM).

En la microscopía de efecto túnel se presenta la superficie mediante la

medición del flujo de la corriente entre una punta conductora y la prueba
que es también conductora, las pruebas que no sean conductoras deben ser
metalizadas con oro, grafito o cromo, también en este caso se palpa la
superficie en una retícula predefinida (Vilchez, 2020).

17
2.1.7.5. Microscopio de rayos X.

En la microscopía de rayos X se usan los rayos X como fuente de radiación.

Gracias a que los rayos X tienen una longitud de onda es más corta con
relación a la luz, se obtiene una resolución más alta. También puede medir
otras interacciones de la prueba a través de los rayos X, una gran ventaja de
la microscopía de rayos X es que las pruebas pueden ser más gruesas que
usando microscopios electrónicos. Tampoco requiere que la superficie sea
conductora, colorear el material biológico, usar un sustrato, ni cortar la
prueba de forma muy fina.

Principios Básicos de la Microscopía

2.1.8. Resolución:

La resolución es un concepto fundamental en microscopía y se refiere a la

capacidad del microscopio para distinguir dos puntos o estructuras pequeñas
como entidades separadas, la resolución depende de varios factores,
incluyendo la longitud de onda de la luz utilizada (en microscopía óptica) o
la longitud de onda del haz de electrones (en microscopía electrónica). La
resolución teórica máxima de un microscopio se determina por la fórmula
de Ernst Abbe para la microscopía óptica, y por la ecuación de resolución de
Ernst Ruska para la microscopía electrónica, la mejora de la resolución ha
sido un objetivo constante en el desarrollo de técnicas microscópicas
,(Afonso-Carrillo et al., 2001)
.

2.1.9. Aumento:

El aumento se refiere a la capacidad del microscopio para ampliar la imagen

de la muestra. Se expresa como una relación entre el tamaño de la imagen

18
 observada y el tamaño real de la muestra. El aumento puede ser ajustado
cambiando las distancias entre las lentes o utilizando objetivos de diferentes
potencias. Los microscopios ópticos tradicionales pueden tener aumentos de
hasta unos pocos miles de veces, mientras que los microscopios electrónicos
pueden alcanzar aumentos de hasta millones de veces, (Lantes Suárez, 2011).

2.1.10. Contraste:

El contraste es crucial para visualizar los detalles de la muestra y se refiere a

la diferencia en intensidad entre las áreas claras y oscuras de la imagen. La
mejora del contraste puede lograrse utilizando diferentes técnicas de
iluminación y detección. Esto puede incluir técnicas como la tinción, que
implica el uso de colorantes para resaltar ciertas estructuras, o la
modulación de fase, que aprovecha las diferencias en la velocidad de fase de
la luz que pasa a través de diferentes partes de la muestra,
(Renau-Piqueras & Faura, 2000)
.

2.1.11. Iluminación:

La iluminación adecuada es esencial para obtener imágenes de alta calidad.

En microscopía óptica, la iluminación puede provenir de fuentes como
lámparas de tungsteno-halógeno, láseres o diodos emisores de luz (LED).
La forma en que la luz interactúa con la muestra y cómo se recoge la luz que
ha pasado a través de ella afecta significativamente la calidad de la imagen.
La manipulación cuidadosa de la iluminación puede mejorar el contraste y
la resolución de la imagen (Vilchez, 2020).

2.1.12. Preparación de muestras:

La preparación adecuada de las muestras es crucial para obtener imágenes

claras y precisas. Esto puede implicar varios pasos, dependiendo del tipo de

19
 muestra y del método de microscopía utilizado. Para muestras biológicas,
esto puede incluir la fijación para preservar la estructura, la tinción para
resaltar características específicas, el corte en secciones delgadas para
visualizar estructuras internas, y el montaje en portaobjetos. Para muestras
no biológicas, como materiales, la preparación puede implicar la creación de
secciones delgadas o el recubrimiento con metales para mejorar la
conductividad en microscopía electrónica
(Gracia Hector & Olmos Pulido, 2018)
.

2.1.13. Tipo de microscopía:

Existen diferentes tipos de microscopía, cada uno con sus propias ventajas y
limitaciones, la microscopía óptica incluye técnicas como la microscopía de
campo claro, de contraste de fase, de fluorescencia y confocal, cada una
adecuada para diferentes aplicaciones y tipos de muestras, la microscopía
electrónica incluye la microscopía de transmisión (TEM) y de barrido
(SEM), que permiten visualizar detalles a una escala mucho más pequeña
que la microscopía óptica. Otros tipos de microscopía incluyen la
microscopía de fuerza atómica (AFM), la microscopía de superresolución y
la microscopía de sonda de escaneo, (Vilchez, 2020).

Estos principios fundamentales de la microscopía proporcionan una base sólida

para comprender cómo funciona esta técnica y cómo se utiliza en una variedad de
campos, desde la biología y la medicina hasta la ciencia de los materiales y la
nanotecnología, (López-Macay et al., 2016).

Funcionamiento básico de un Microscopio

2.1.14. Sistema de Lentes:

20
 El objetivo: Este es el lente más cercano a la muestra y tiene la función de
recolectar la luz dispersada o emitida por la muestra y formar una imagen
ampliada en su plano focal, los objetivos suelen ser de alta calidad óptica y
están diseñados para ofrecer diferentes aumentos y resoluciones.
Generalmente, los microscopios ópticos tienen una selección de objetivos
con diferentes aumentos (por ejemplo, 4x, 10x, 40x, 100x) para permitir al
usuario observar la muestra a diferentes niveles de detalle.
El condensador: Este componente se encuentra debajo del escenario y tiene
la función de concentrar y enfocar la luz que pasa a través de la muestra, el
condensador suele estar equipado con un diafragma que controla el tamaño
del haz de luz que incide en la muestra. Ajustar el diafragma del
condensador puede mejorar el contraste y la resolución de la imagen
observada (López-Macay et al., 2016).

2.1.15. Fuente de Iluminación:

La fuente de iluminación proporciona la luz necesaria para visualizar la

muestra. Puede ser una lámpara incandescente, un LED o una lámpara de
arco, dependiendo del diseño del microscopio. La luz emitida por la fuente
de iluminación pasa a través de una serie de dispositivos ópticos, como
filtros y lentes, antes de llegar a la muestra. Estos dispositivos pueden
ajustarse para controlar la intensidad y la calidad espectral de la luz que
incide en la muestra.

2.1.16. Muestra:

La muestra que se va a observar se coloca en el escenario del microscopio.

Antes de colocarse en el microscopio, la muestra puede requerir preparación
especial dependiendo de su naturaleza y del propósito de la observación. Por
ejemplo, las muestras biológicas pueden requerir fijación, tinción y montaje
en portaobjetos para preservar su estructura y facilitar la observación. Las
muestras no biológicas pueden necesitar procesos de preparación como el

21
 pulido y el recubrimiento con metales conductores para mejorar la
conductividad eléctrica y la resolución en microscopía electrónica.

2.1.17. Enfoque:

El enfoque es controlado moviendo el objetivo hacia arriba o hacia abajo

con la rueda de enfoque. Al hacerlo, se ajusta la distancia entre el objetivo y
la muestra, lo que permite que la imagen proyectada en el plano focal del
objetivo se enfoque correctamente en el ocular. El enfoque adecuado es
crucial para obtener imágenes claras y nítidas de la muestra. Algunos
microscopios también tienen sistemas de enfoque fino y grueso que
permiten un ajuste más preciso del enfoque, (Lantes Suárez, 2011).

2.1.18. Observación de la Imagen:

La imagen ampliada de la muestra se forma en el ocular del microscopio,

donde el observador puede verla. La combinación de lentes en el objetivo y
el ocular produce una imagen ampliada y enfocada de la muestra. El
observador puede ajustar la distancia entre el ocular y su ojo para lograr una
visualización cómoda de la imagen. Algunos microscopios pueden estar
equipados con sistemas de cámara que permiten capturar imágenes digitales
de la muestra para su análisis posterior, (COSI TITO, 2020).

2.1.19. Ajustes Adicionales:

Además del enfoque, los microscopios ópticos pueden tener otros ajustes
que permiten mejorar la calidad de la imagen. Por ejemplo, muchos
microscopios están equipados con diafragmas que controlan la cantidad de
luz que pasa a través de la muestra. El diafragma de campo ajusta el tamaño
del haz de luz que incide en la muestra, mientras que el diafragma de
apertura controla el ángulo de los rayos de luz que entran en el objetivo.

22
 Estos ajustes permiten al usuario optimizar la iluminación y el contraste de
la imagen observada. Además, algunos microscopios pueden estar
equipados con filtros de color que permiten resaltar ciertas características de
la muestra, (COSI TITO, 2020).

El funcionamiento detallado de un microscopio óptico implica una serie de componentes

y ajustes que trabajan en conjunto para amplificar la imagen de una muestra y permitir su
observación a una escala microscópica, cada componente desempeña un papel crucial en
la formación de una imagen clara y nítida, y los ajustes permiten al usuario controlar y
optimizar la calidad de la imagen observada, (Afonso-Carrillo et al., 2001).

CAPITULO III

Aplicaciones de la Microscopía

3.1. En la Biología y Medicina

3.1.1. Observación de Estructuras Celulares y Tejidos:

La microscopía ha permitido una comprensión detallada de la estructura y la

función de las células y los tejidos en organismos vivos, a través de la
microscopía óptica y electrónica, los científicos pueden observar células
individuales y visualizar orgánulos celulares, como el núcleo, el retículo
endoplasmático, los ribosomas, las mitocondrias y los lisosomas. Esta
observación detallada ha sido fundamental para comprender procesos
biológicos esenciales como la división celular, la síntesis de proteínas, la
respiración celular y la excreción de desechos (Jurado et al., 2005).

3.1.2. Diagnóstico Médico:

23
 La microscopía es una herramienta esencial en el diagnóstico médico, en
patología, los patólogos utilizan la microscopía para examinar muestras de
tejido obtenidas mediante biopsias o cirugías, lo que les permite identificar
células anormales asociadas con enfermedades como el cáncer, las
infecciones o los trastornos autoinmunes. Además, la microscopía de sangre
periférica es crucial para el diagnóstico de trastornos hematológicos, como
la anemia, la leucemia y las enfermedades de coagulación,
(COSI TITO, 2020)
.

3.1.3. Microbiología y Virología:

La microscopía es una herramienta indispensable en microbiología y

virología para la observación y caracterización de microorganismos, con
microscopía de luz y electrónica, los investigadores pueden estudiar
bacterias, virus, hongos y parásitos, lo que les permite identificar patógenos
en muestras clínicas y estudiar su morfología, estructura y comportamiento.
Esto es crucial para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades
infecciosas, así como para el desarrollo de vacunas y terapias antivirales.

3.1.4. Investigación en Biología Molecular y Celular:

La microscopía de fluorescencia es una herramienta poderosa en la

investigación en biología molecular y celular, permite la visualización de
moléculas específicas dentro de las células, como proteínas, ácidos
nucleicos y orgánulos, utilizando sondas fluorescentes, esto ha
revolucionado nuestra comprensión de los procesos celulares, incluida la
señalización celular, la división celular, la migración celular y la expresión
génica, entre otros, (Afonso-Carrillo et al., 2001).

3.1.5. Imagenología Médica:

24
 En el campo de la imagenología médica, la microscopía juega un papel
importante en el estudio de tejidos y células in vivo, técnicas como la
microscopía confocal y la microscopía de dos fotones permiten la
visualización de estructuras en tiempo real en modelos animales y humanos,
esto proporciona información detallada sobre la fisiología y la patología de
los tejidos vivos, lo que es crucial para el diagnóstico y tratamiento de
enfermedades, así como para la evaluación de la eficacia de tratamientos
médicos.

3.1.6. Desarrollo de Fármacos y Terapias:

La microscopía es esencial en el desarrollo de fármacos y terapias médicas,

permite la observación de la interacción de fármacos con células y tejidos,
así como el seguimiento de la respuesta celular a tratamientos específicos,
esto es crucial para entender los mecanismos de acción de los fármacos y
para el diseño de terapias más efectivas y selectivas
(López-Macay et al., 2016)
.

3.1.7. Estudios de Neurociencia:

En neurociencia, la microscopía es una herramienta valiosa para estudiar la

estructura y función del sistema nervioso, técnicas como la microscopía de
fluorescencia y la microscopía de alta resolución permiten la visualización
de neuronas, sinapsis y estructuras subcelulares en el cerebro, esto ayuda a
entender los procesos neurobiológicos subyacentes a la función cerebral
normal y las enfermedades neurológicas, como el Alzheimer, el Parkinson y
la esclerosis múltiple.

La microscopía desempeña un papel central en la biología y la medicina,

permitiendo la observación y el estudio de estructuras biológicas a una escala
microscópica, desde la investigación básica hasta la aplicación clínica, la
microscopía es una herramienta invaluable que ha revolucionado nuestra

25
comprensión de la biología y ha contribuido significativamente al diagnóstico y
tratamiento de enfermedades, su versatilidad y capacidad para proporcionar
imágenes detalladas hacen que sea una herramienta esencial en una amplia gama de
campos científicos y médicos, (Sanchez Gomez, 1999).

En Ciencia de Materiales

3.1.8. Estudio de Interfaces y Superficies:

La microscopía es crucial para el estudio de interfaces y superficies en

materiales, las técnicas de microscopía de barrido de electrones (SEM) y
microscopía de fuerza atómica (AFM) permiten visualizar y analizar la
morfología y topografía de las interfaces entre materiales, así como la
rugosidad y textura de las superficies, esto es esencial para comprender
cómo las propiedades de las interfaces y superficies afectan el
comportamiento y rendimiento de los materiales en aplicaciones
específicas, como la adhesión, la corrosión y la tribología.

3.1.9. Caracterización de Nanomateriales y Nanoestructuras:

La microscopía juega un papel fundamental en la caracterización de

nanomateriales y nanoestructuras, técnicas como la microscopía de
transmisión de electrones de alta resolución (HRTEM) y la microscopía de
barrido de sonda de túnel (STM) permiten estudiar y manipular materiales a
escala atómica y molecular, esto es esencial para entender las propiedades
únicas de los materiales a nanoescala y para desarrollar aplicaciones
innovadoras en áreas como la nanoelectrónica, la nanomedicina y la
nanotecnología (Lantes Suárez, 2011).

3.1.10. Investigación de Materiales Avanzados:

26
 La microscopía es esencial para la investigación de materiales avanzados,
como materiales compuestos, nanomateriales, biomateriales y materiales
funcionales, técnicas como la microscopía de fuerza atómica (AFM), la
microscopía de transmisión de electrones (TEM) y la microscopía de fuerza
de dispersión de rayos X (EDX) permiten estudiar la estructura,
composición y propiedades de estos materiales a escalas microscópicas y
nanométricas. Esto es crucial para el diseño y desarrollo de materiales con
propiedades personalizadas y aplicaciones específicas en una amplia gama
de campos, como la electrónica, la medicina, la energía y el medio
ambiente.

3.1.11. Optimización de Procesos de Fabricación y Caracterización In Situ:

La microscopía se utiliza para optimizar procesos de fabricación de

materiales y para realizar caracterizaciones in situ durante la fabricación.
Técnicas como la microscopía in situ, la microscopía de alta velocidad y la
microscopía de confocal láser permiten observar y analizar los cambios
estructurales y morfológicos que ocurren durante procesos de fabricación
como la solidificación, la deposición y la cristalización. Esto es crucial para
mejorar la calidad, la eficiencia y la reproducibilidad de los procesos de
fabricación y para diseñar materiales con propiedades específicas para
aplicaciones industriales y tecnológicas (Sanchez Gomez, 1999).

3.1.12. Desarrollo de Materiales Funcionales y Avanzados:

La microscopía es esencial para el desarrollo de materiales funcionales y

avanzados con propiedades únicas y aplicaciones innovadoras, técnicas
como la microscopía de fluorescencia, la microscopía de fuerza atómica
(AFM) y la microscopía de confocal láser permiten estudiar la estructura y
comportamiento de materiales en condiciones extremas, como alta

27
 temperatura, alta presión o ambientes corrosivos, esto es crucial para
entender cómo los materiales responden a diferentes condiciones y para
diseñar materiales con propiedades mejoradas para aplicaciones específicas
en industrias como la aeroespacial, la automotriz y la electrónica.

La microscopía desempeña un papel crucial en la ciencia de materiales, permitiendo a los

investigadores estudiar la estructura, composición y propiedades de una amplia gama de
materiales a escalas microscópicas y nanométricas, desde la caracterización de la estructura
y morfología hasta la investigación de materiales avanzados y el desarrollo de materiales
funcionales, la microscopía es una herramienta esencial para avanzar en nuestro
conocimiento y comprensión de los materiales y para desarrollar nuevas tecnologías y
aplicaciones en diversas áreas industriales y científicas, (Renau-Piqueras & Faura, 2000).

En Ciencias Forenses

3.1.13. Análisis de Evidencia en la Escena del Crimen:

La microscopía desempeña un papel esencial en la recolección y análisis de

evidencia en la escena del crimen. Los investigadores utilizan microscopios
ópticos y electrónicos para examinar minuciosamente objetos y materiales
encontrados en el lugar, como cabellos, fibras textiles, fragmentos de vidrio,
pintura y residuos de disparos. Esto les permite identificar características
distintivas y compararlas con muestras de referencia, ayudando a establecer
conexiones cruciales entre la escena del crimen y los posibles sospechosos o
lugares relacionados.

3.1.14. Identificación de Fibra y Trazas de Materiales:

La microscopía se emplea para identificar y comparar fibras textiles y otros

materiales presentes en la evidencia forense. Mediante técnicas de
microscopía de polarización y microscopía de dispersión de campo oscuro,

28
 los investigadores pueden examinar detalladamente características
morfológicas y ópticas de las fibras, como color, textura y torsión. Esta
comparación permite establecer posibles conexiones entre la evidencia
encontrada en la escena del crimen y objetos o individuos relacionados con
el caso.

3.1.15. Examinación de Herramientas y Armas:

La microscopía se utiliza para analizar herramientas y armas involucradas

en crímenes, como cuchillos, armas de fuego y herramientas de
arrumbamiento, los microscopios de comparación de estriación y
microscopios de barrido de electrones permiten examinar características
superficiales y patrones de estriación para identificar posibles conexiones
entre la evidencia y las herramientas sospechosas. Esto puede ser crucial
para establecer la autoría de un crimen o determinar si un arma fue utilizada
en un delito específico (Vilchez, 2020).

3.1.16. Análisis de Disparos de Armas de Fuego:

La microscopía se utiliza para analizar residuos de disparos de armas de

fuego en evidencia forense, como prendas de vestir y superficies. Técnicas
como la microscopía de dispersión de energía de rayos X (SEM-EDX) y la
microscopía de barrido de electrones (SEM) permiten identificar y
cuantificar elementos presentes en los residuos de disparos. Esto ayuda a
determinar el tipo de arma utilizada, la distancia de disparo y otras
circunstancias relacionadas con el crimen.

3.1.17. Identificación de Marcas y Huellas Dactilares:

La microscopía se emplea para identificar y comparar marcas y huellas
dactilares encontradas en la escena del crimen. Mediante microscopios de

29
 alta resolución, los investigadores examinan características detalladas de las
huellas dactilares, como patrones de crestas y bifurcaciones. Esto permite
establecer la identidad de individuos y vincularlos con la escena del crimen,
lo que puede ser crucial para resolver casos de homicidio, robo u otros
delitos.

3.1.18. Examinación de Documentos y Falsificaciones:

La microscopía se utiliza para examinar documentos y detectar posibles

falsificaciones o alteraciones. Mediante técnicas de microscopía de
fluorescencia y microscopía de barrido de electrones (SEM), los
investigadores pueden identificar características físicas y químicas únicas en
los documentos, como marcas de agua, fibras de papel y tintas. Esto es
esencial para determinar la autenticidad de los documentos y detectar
posibles intentos de fraude o falsificación
(María Sánchez Lera & Rosa Oliva García, 2015)
.

3.1.19. Estudio de Fluidos Biológicos y ADN:

La microscopía se emplea para examinar fluidos biológicos, como sangre,

semen, saliva y tejidos, en la evidencia forense. Técnicas de microscopía de
fluorescencia y microscopía de contraste de fase permiten identificar y
analizar células y microorganismos presentes en los fluidos biológicos. Esto
ayuda a establecer su origen y determinar la posible implicación de
individuos en el caso, lo que puede ser crucial en investigaciones de
violación, asesinato u otros delitos graves.

La microscopía desempeña un papel vital en las ciencias forenses, proporcionando

herramientas poderosas para la recolección, análisis e interpretación de evidencia física en
la resolución de crímenes, su capacidad para examinar detalles microscópicos de

30
materiales y fluidos biológicos es crucial para establecer conexiones entre la escena del
crimen, los sospechosos y los objetos relacionados con un caso, contribuyendo así a la
administración de justicia de manera precisa y efectiva (Lanfranconi, 2010).

CONCLUSIONES

La microscopía, como herramienta de investigación, ha transformado fundamentalmente

nuestra comprensión del mundo que nos rodea a una escala microscópica y nanométrica.
Su impacto abarca una variedad de disciplinas científicas y campos de aplicación, desde la
biología y la medicina hasta la ciencia de materiales y las ciencias forenses. Profundicemos
en cómo la microscopía ha revolucionado estos campos:

En el ámbito de la biología y la medicina, la microscopía ha permitido una exploración

detallada de la complejidad subcelular, revelando estructuras y procesos que antes eran
invisibles para el ojo humano. Con la ayuda de microscopios ópticos y electrónicos, los
investigadores pueden visualizar células individuales y orgánulos celulares, observar
procesos biológicos como la división celular y la síntesis de proteínas, y estudiar patologías
como el cáncer y las enfermedades infecciosas a un nivel molecular. La microscopía de
fluorescencia, en particular, ha abierto nuevas posibilidades al permitir la observación de
biomoléculas específicas dentro de las células, lo que ha llevado a avances significativos
en áreas como la neurociencia, la biología del desarrollo y la medicina regenerativa.

En la ciencia de materiales, la microscopía ha desempeñado un papel crucial en la

caracterización y manipulación de materiales en escalas microscópicas y nanométricas.
Desde la observación de estructuras cristalinas y defectos hasta la investigación de
materiales avanzados y nanoestructurados, la microscopía ha permitido a los científicos
comprender mejor las propiedades mecánicas, eléctricas, ópticas y magnéticas de los
materiales. Esto ha llevado al desarrollo de nuevos materiales con aplicaciones en
electrónica, energía, biomateriales, nanotecnología y más. La microscopía de alta

31
resolución, como la microscopía de fuerza atómica (AFM) y la microscopía electrónica de
transmisión (TEM), ha sido especialmente útil para estudiar estructuras a escalas
nanométricas y manipular materiales a nivel atómico.

En el ámbito forense, la microscopía ha sido una herramienta invaluable para la

recolección, análisis e interpretación de evidencia física en la resolución de crímenes.
Desde la identificación de fibras y trazas de materiales hasta el análisis de residuos de
disparos y huellas dactilares, la microscopía ha sido crucial para establecer conexiones
entre la escena del crimen, los sospechosos y los objetos relacionados con el caso. Esto ha
contribuido significativamente a la administración de justicia y al esclarecimiento de casos
criminales.

La microscopía ha revolucionado múltiples campos científicos y aplicaciones prácticas al

proporcionar una herramienta poderosa para explorar y comprender el mundo invisible a
simple vista. Su capacidad para revelar detalles microscópicos y fenómenos ocultos ha
llevado a avances significativos en la investigación científica, la práctica médica, el
desarrollo de materiales y la aplicación de la ley. En última instancia, la microscopía
continúa siendo una herramienta indispensable para el avance del conocimiento y la
resolución de problemas en la sociedad moderna.

32
 BIBLIOGRAFÍA
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33
Vilchez, F. (2020). Tipos de microscopios. www.pce-iberica.eswww.pce-instruments.com/espanol

34