CLASE 1:

Generalides IHQ y tipos

de anticuerpos

Dra. Aracelly Quiroz.

Concepción 2024
 RESULTADO DE APRENDIZAJE

Comprender aspectos generales de la IHQ

PRUEBA DIAGNÓSTICO
 Inmunohistoquímica (IHQ)

Corresponde a un grupo de técnicas de

inmunotinción que permiten
demostrar una variedad de antígenos
presentes en las células o tejidos
utilizando anticuerpos marcados.
Posteriormente se deben visualizar con
un sistema de detección apropiado.
Técnica de IHQ
Unión Antígeno-Anticuerpo

La reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una de las reacciones

moleculares angulares en la respuesta inmunitaria del organismo.

El reconocimiento Ag-Ac es una reacción de complementariedad,

por lo que se efectúa a través de múltiples enlaces no covalentes
entre una parte del antígeno (epítope) y los aminoácidos del sitio
de unión del anticuerpo (paratopo).

La reacción se caracteriza por su especificidad y rapidez.

 Flujo de trabajo
DESPARAFINAR

RECUPERACIÓN
ANTIGÉNICA

BLOQUEAR

ANTICUERPO PRIMARIO

SISTEMA DE
DETECCIÓN

CONTRTINCIÓN
 APLICACIONES DE IHQ
DIAGNOSTICO HISTOPATOLÓGICO:
-Tipificación tumores indiferenciados
-Tipificación de linfomas.
-Tipificación de carcinomas.
-Tipificación de sarcomas.

PRONÓSTICO EN TUMORES MALIGNOS:

-Receptores Hormonales.
-Estatus proliferativo –apoptótico.
-Evaluación capacidad metastásica.
-Determinación del origen de tumores metastásicos.

TRATAMIENTO DE NEOPLASIAS:
-Clasificación para tratamiento antitumoral.

DETECCIÓN DE AGENTES INFECCIOSOS:

-HPV
-Virus Herpes.
 Aplicaciones de IHQ
Inestabilidad microsatelital Respuesta a tratamiento

HER2
Receptor de estrogeno
 Aplicaciones de IHQ
Identificación de metástasis Identificación de infecciones
CDX2
Aplicaciones de IHQ
INFRACTRUESTURA DE UN
LABORATORIO DE IHQ

EQUIPOS
PERSONAL

EQUIPOS

ESPACIO

INSTRUMENTOS

REACTIVOS
REACTIVOS
 Condiciones para la técnica de IHQ

¿Cómo podemos hacer para que funcione bien la IHQ?

Preservación de antígenos Anticuerpos bien caracterizados

Tinciones específicas y sensibles Eficiente marcación

Tinción sin background Buena estandarización

 Condiciones para la técnica de IHQ

¿Cómo podemos hacer para que funcione bien la IHQ?

PREANALÍTICA POSTANALÍTICA

ANALÍTICA
Condiciones para la técnica de IHQ
 RESULTADO DE APRENDIZAJE

Aprender conceptos asociados a la generación

de anticuerpos
 Generalidades

igG (Inmunoglobulinas) son un grupo

de glico-proteínas presente en el suero
de los mamíferos.

Las encontramos:
-Libres en el suero.
-Ancladadas al receptor BCR
 ESTRUCTURA PROTEÍCA

Cada molécula de anticuerpo esta conformada por

cuatro cadenas polipeptídicas, unidas por puente
disulfuro.

La cadena pesada posee pesos moleculares que van

entre 55 y 77 kDa y la cadena liviana poseen peso de
25 kDa.

El extremo carboxilo terminal poseen secuencias

relativamente constantes (Fc) y el extremo amino
terminal poseen secuencias alto grado de
variabilidad (Fab).
 Anticuerpos

Extremo aminoterminal Fab

papaína
(Kappa o lambda)

(IgG, IgA, IgD, IgE, IgM) Fc

Extremo carboxiloterminal
Anticuerpos
Tipo de Anticuerpos, según cadena
pesada
Tipo de Anticuerpos, según cadena
pesada
Tipo de Anticuerpos, según cadena
liviana
Kappa vs Lambda
 Importante

Los anticuerpos pueden ser lo

suficientemente complejos para ser

conejo
reconocidos como epítopos por otro
anticuerpo. O sea, que cualquier parte Fab de conejo
Anti-ratón
del anticuerpo puede ser antígeno en
otra especie.
Fc de ratón

ratón
Por eso es que le Fc de un anticuerpo
de ratón puede ser reconocido por el
Fab de un anticuerpo hecho en conejo.
Tipos de anticuerpos
 Anticuerpos

MONOCLONALES POLICLONALES

Sólo UN epítope Multiples epítopes

Todos identicos Distinto isotipo

Costo de Costo de
producción: alto producción: bajo
Mayor Reconocimiento
reproducibilidad cruzado
 Clon
t
Conjunto de individuos genéticamente idénticos
que descienden de un mismo individuo.
Generación Anticuerpos policlonales
 Generación Anticuerpos Monoclonales
t
 Conceptos relacionados a anticuerpos
t

ESPECIFICIDAD
SENSIBILIDAD

La capacidad de la
Caracteriza
prueba para detectar
la capacidad de la
la ausencia del
prueba para detectar el
epítope en el tejido
epítope en el tejido
sano.
 Conceptos relacionados a anticuerpos
t
AVIDEZ AFINIDAD

Cuando un anticuerpo une un La fuerza de interacción

antígeno por múltiples antígeno-anticuerpo es la
epítopos, la fuerza afinidad
acumulativa de la interacción
se denomina avidez.