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H E M O S TA S IA Y

COAGULACION DE
LA SANGRE

D R A . M A R L E N E PA C H A S T O R R E S
TIEMPO DE COAGULACION

INICIO TERMINO

Retrae
Sangre es extraída

Trauma

Tiempo tomado por la sangre para coagular en ausencia de factores provenientes de los tejidos, como
el Factor tisular (III)
METODO DE LEE WHITE

Reactivos y Aparatos: Valores


 Tubos de prueba de 8 mm diámetro, limpios y secos
 Agujas y jeringas para uso endovenosos descartables, estériles. 5 -8 minutos
 Baño maría 37 °C
 Reloj cronómetro
DESARROLLO DE LA PRACTICA

Obtener 3 ml de sangre venosa, anotando la hora exactamente (Para Inmediatamente transferir 1.5 ml de sangre a
controlar el tiempo de inicio) cada uno de dos tubos y colocarlos en Baño
María a 37°C

Luego de tres min. de reposo ir sacando cada uno de los tubos e ir inclinándolos
suavemente en 90° cada minuto, hasta que no se observe desplazamiento de sangre y
pueda ser completamente invertido el tubo sin caerse la sangre.
Anotar el tiempo
La sangre al ser extraída sin mayor contaminación con tromboplastina tisular es capaz de coagular cuando se la
deposita en un tubo de vidrio.

Factor de superficie celular (Factor tisular o factor III) ubicado


en la pared de los vasos sanguíneos.
Normalmente está ausente en las células endoteliales y por tanto
no expuesto al contacto con la sangre.
En un trauma, el factor tisular de los fibroblastos entra en contacto
con la sangre, se une al factor VIIa e inicia la vía de coagulación
por vía extrínseca.
El tiempo que tarda este proceso está en relación con el sistema de procoagulantes e inhibidores
fisiológicos o adquiridos, que influyen en la formación de dicho coágulo.

Fc. Vascular
 Lecho vascular: Vasoconstricción, acortamiento, cambios en el endotelio.
Fc tisular(III), Factor Von willwbrand, Endotelina, Prostaciclina

Fc Plaquetario
 Adhesividad plaquetaria: TXA2, trombina, Factor Von willwbrand, Prostaciclina
 Agregación plaquetaria
 Tapón plaquetario: HEMOSTASIA PRIMARIA

Fc Plasmático
 Circulan como precursores inactivos: Proenzimas o Cimogenos y cofactores.
 Integran las cascadas de coagulacion.: intrinsica y extrinsica
Este tiempo de coagulación in vitro reflejará mejor la eficacia del sistema in vivo, cuanto menos se
modifique o manipule esta sangre (contacto con el vidrio, burbujas de aire, etc.).

Tiempo de coagulación ha sido un método útil en el control Pruebas de mayor sensibilidad y


de la terapia anticoagulante con heparina Reemplazada
reproducibilidad.
No descarta la existencia de un
Normal
trastorno de la coagulación

Tiempo coagulación

Prolongado

 Defecto de FC intrínsecos, intrínsecos, como disminución,


tromboplastina (III), via común: protrombina (II),
fibrinógeno(I) con excepción de una deficiencia pura de los
factores VII y XIII
 Terapia anticoagulante con heparina
 Coagulación intravascular diseminada
 Hepatopatías
Utilidad Clínica

 Evaluación global del sistema de coagulación.


 Monitoreo de la terapia con heparina.
 Screening prequirúrgico

Variables por drogas:


Aumentado:
 Heparina.

Valores:
5 -8 minutos
TIEMPO DE SANGRIA
Tiempo transcurrido desde el momento en que se hace una punción en la oreja o en el pulpejo del dedo y aquél en
que la sangre deja de brotar de la herida.

MATERIAL DIDÁCTICO: METODO DE DUKE

Cronómetro, lancetas descartables,


desinfectante de piel, papel de filtro.

VALORES

1 -3 minutos

El tapón se forma porque las plaquetas se adhieren fuertemente al colágeno libre del vaso sanguíneo dañado. Esto
desencadena la liberación de múltiples sustancias químicas, como el ADP, el que aumenta la agregación de las
plaquetas permitiendo una mayor unión entre estos elementos figurados. Al finalizar el proceso, el tapón ya está
formado.
DESARROLLO DE LA
PRACTICA

• Desinfectar la yema de un dedo


(anular) ó el lóbulo de una oreja y
punzar con la lanceta descartable
standard de manera que la sangre
fluya libremente, gota a gota, sin
necesidad de exprimir la piel.
• Anotar el tiempo de aparición de la
primera gota y, luego con el papel de
filtro ir secando cada gota, cada 30
segundos sin tocar la piel, hasta que
deje de sangrar.
• Anotar el tiempo transcurrido.
SIGNIFICADO Evalúa la formación del tapón plaquetario que se forma como resultado de la adhesión de las plaquetas a la
CLÍNICO: pared de los vasos. Mide el tiempo que tarda en detenerse la hemorragia provocada por la injuria de los
pequeños vasos.

Hemostasia Formación de tapón plaquetario primario frente al daño vascular. Las plaquetas se unen al subendotelio expuesto.
primaria

Plaquetas
Inhiben agregación
plaquetaria

PGI2 NO

Epitelio intacto
Evita la agregación plaquetaria
porque separa la sangre del
colágeno
Hemostasia primaria

Plaquetas Activan más


plaquetas

ADP TXA2

Tapón
plaquetario

vWF Colágeno
Epitelio dañado

Vasoconstricción , plaquetas
se adhieren al colágeno y al
vWF, que ayuda a fijar las
plaquetas
Hemostasia secundaria Formación del tapón hemostático secundario, al desencadenarse la cascada de la coagulación
formándose una malla de fibrina y completando el tapón hemostático.
EL TEST DEPENDE

Plaqueta Proteínas plasmáticas adhesivas Pared vascular

Función Permiten la adhesión de las plaquetas a la pared Integridad


Número adecuado vascular injuriada y la agregación plaquetaria

ADP TXA2

Utilidad Clínica
 Evaluar la hemostasia primaria.
 Evaluación de la disfunción plaquetaria e integridad de la pared vascular, el número de plaquetas y de las proteínas
plasmáticas de adhesión. Evalúa la formación del tapón plaquetario.
 Screening para pacientes con sospecha de disfunción plaquetaria
No descarta un defecto en la hemostasia
Normal primario.

Desorden de la hemostasia primario que


Con plaquetopenia puede ser adquirido, hereditario o inducido
por drogas

Tiempo de sangría Prolongado

Presencia de síndrome de Von Willebrand


Con plaquetas o una disfunción plaquetaria o una hipo o
normales disfibrinogenemia severa

Hiperlipoproteinemia, diabetes mellitus,


Acortado ateroesclerosis.
Medicamentos: Desmopresina (produce
liberación de vWF)
TIEMPO DE PROTROMBINA (TIEMPO DE QUICK)

Significado Clínico
Evalúa: VIA EXTRINSICA Y COMUN
 Factor I (Factor tisular)
 Factor VII (Proconvertina)
 Factor II (Protrombina)
 Factor V (Proacelerina)
 Factor X (Factor deStuart-Prower).
Significado Clínico
Controlar la terapia con anticoagulantes orales (warfarina) los cuales inhiben la vitamina K epóxido reductasa por lo
tanto producen disminución de las reservas hepáticas de vitamina K. Se producen factores de vitamina K inactivos porque
están impedidos de unirse al calcio.

En el siguiente ciclo
la VKOR regenera
vitamina K reducida

Warfarina inhibe la VKOR


impidiendo la activación
de los FC

Ciclo de la vitamina K

Cofactor para la
activación de los
factores de la
coagulación
γ-glutamil
carboxilasa
SIGNIFICADO
CLÍNICO:
También se utiliza el INR (razón internacional normalizada) en pacientes
anticoagulados.
Permite minimizar las diferencias que existen entre los resultados de TP y
así poder compararlos
El INR es la razón o cociente obtenido entre:
Valores: 0.8 a 1.2
ISI: Índice Internacional de Sensibilidad)

Utilidad clinica:
•Monitoreo del tratamiento con cumarínicos( warfarina) o heparinoides.
•Evaluación de la función hepática.
•Screening cuando se sospechan desórdenes de los factores II, VII, X, V, fibrinógeno o disfibrinogenemias.
•Screening preoperatorio para detectar un posible desorden hemostático.
Deficiencia de algún factor vitamina K, déficit
de vitamina K, sistema hemostático inmaduro
en el neonato, presencia inhibidor de factor V.

Tiempo de Enfermedades hepáticas, CID, deficiencia de


Prolongado
Protrombina factor V, hemofilia Ay B, Sindrome de Von
Willebrand

Tratamiento con antagonistas de la vitamina K


DESARROLLO DE LA PRACTICA
El método que emplearemos se llama Soluplastín y que es una Tromboplastina tisular e incluye cloruro de calcio y cloruro de
sodio.
El método se basa en la medición del tiempo de formación del coágulo de fibrina, al agregar una tromboplastina cálcica a un
plasma citratado

MATERIAL DIDÁCTICO MUESTRA DE PLASMA

Soluplastin (Tromboplastina cálcica) Casa En un tubo de ensayo contendiendo 0.5 mI de


Wiener anticoagulante citrato trisódico 3.8 % añadir 4.5 ml de
Tubos de ensayo de vidrio de 12 x 75 mm. sangre venosa Mezclar suavemente, centrifugar por 15
Cronómetro min y separar el plasma.
Micropipetas 100 (0.1 ml) y 200 lambdas

REACTIVOS PROVISTOS
Reactivo A: liofilizado de tromboplastina de
cerebro de conejo con una concentración final de
10 mM de cloruro de calcio.
TIEMPO DE PROTROMBINA:VIA
EXTRINSICA Fibrina

Plasma del Factor tisular CaCl2


paciente (tromboplastina tisular)
Viene en el reactivo Acelera la reacción

Ia
Fc VII Fc VIIa Fc X
IIa Fibrinógeno
activado

Proporcionado del paciente


I
Fosfolípidos, proporcionado por el reactivo

Fibrinógeno
Complejo protrombinasa
Se tiene que medir el tiempo que transcurre hasta que este coagule

VALORES

10 -13 segundos

Trombos Hemorragia
PROCEDIMIENTO

Pre incubar el plasma: en un tubo de ensayo, marcado (Px) colocar 1 ml del plasma en BM 37 °C, por 3 min.(No pre incubar
mas de 10 min.)
Pre incubar el Soluplastin: en otros dos tubos de ensayo colocar 0.2 ml de Soluplastin en cada uno y colocar en BM a 37°C
por 3 min.(No pre incubar mas de 10 min.)
Pipetear 0.1 ml del plasma Pre incubado y añadir rápidamente al tubo conteniendo los 0.2 ml de Soluplastin, disparando
simultáneamente el cronómetro.

Previo al tiempo estimado de coagulación sacar el tubo del baño e inclinar suavemente por una o dos veces por
segundo y detener el cronómetro en el momento exacto de la aparición del coágulo, que se manifestara por la aparición
de muy discretos hilos de fibrina, en ese instante precisamente para el cronómetro.
TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA

Significado Clínico
Evalúa: VIA INTRINSICA Y COMUN No detecta los trastornos plaquetarios, las deficiencias
 Factor VIII de los factores VII y XIII ni los problemas vasculares.
 Factor IX (Proconvertina)
 Factor XI (Protrombina)
 Factor XII (Proacelerina)
 Factor X (Factor deStuart-Prower)
 También detecta deficiencias severas de los factores II,
V, y fibrinógeno

Uso Clínico:
 Monitorización del tratamiento con heparina no fraccionada (HNF)
 Hemofilia A, B y C
 Inhibidores del factor de coagulación
 Anticuerpos antifosfolípidos (anticoagulante lúpico)
Sílice,
Caolín o
ácido elágico

FUNDAMENTOS DEL METODO


Tiempo que tarda en coagular un plasma
descalcificado, colocado en un baño a 37o C y en
presencia de un exceso de cefalina, activador y
calcio.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: cefalina como activador particulado.
B. Reactivo B: solución de cloruro de calcio 0,025 mol/l.

MUESTRA Plasma
a) Recolección: Obtener sangre y colocar en un tubo 4,5 ml de sangre + 0,5 ml de Anticoagulante.
Mezclar suavemente.
Centrifugar y separar el plasma
TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADO:VIA
INTRINSICA
Plasma del Fibrina
paciente Tromboplastina parcial Activador CaCl2

Viene en el reactivo, tiene la parte de Sílice, Caolín o ácido elágico. Acelera la


fosfolípido pero no de Fc tisular) Activan a los Fc de contacto reacción
Ia

Fc XIIa Fc XIa Fc IXa


I

IXa VIIIa
Fosfolípidos, proporcionado
X
parcialmente por el reactivo
Complejo Xasa

Complejo protrombinasa
aPTT VIA INTRINSICA VIA EXTRINSICA
PT
Desencadenada Desencadenada
por colágeno por el FT
CUESTIONARIO

1. Explique el ciclo de la vitamina k


2. Qué es él INR y cuáles son sus valores en los pacientes anticoagulados
3. Explique donde actúa la warfarina y la heparina
4. En la hemostasia cuál es la primera función de las plaquetas?
a. Adhesión
b. cambio en su forma
c. liberación de ADP
d. NA

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