PRÁCTICA DE LABORATORIO

OBSERVACIÓN DE BACTERIAS
INTRODUCCIÓN
Las bacterias son organismos procariotas y unicelulares pertenecientes al reino
Monera. Son rganismos de reproducción asexual, ampliamente extendidos y de gran
importancia para los ecosistemas, la industria alimentaria y nuestra salud.
Para poder observar bacterias vamos a usar las contenidas en el yogur, un producto
lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala industrial se
realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación de dos
cepas bacterianas:
Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero muy aromático,
Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante.

En esta preparación se podrán, por tanto, observar dos morfologías bacterianas

distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en cadenas
arrosariadas). Además, el tamaño del lactobacilo (unos 30μm de longitud) facilita la
observación aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del microscopio.

OBJETIVOS
Observación de células procarióticas
Conocer las técnicas básicas para la observación de
bacterias
Reconocer las distintas formas celulares bacterianas
Comprender la utilidad de las bacterias en la industria
 MATERIALES
Microscopio óptico
Porta y cubreobjetos
Cubeta de tinción
Asa de cultivo
Mechero de alcohol
pinzas de madera
Azul de metileno
Alcohol 96%
Agua destilada
yogurt

PROCEDIMIENTO

Sobre un portaobjetos deposita una gota de agua.

Flamea el asa de siembra para esterilizarla y no contaminar la preparación
Toma una muestra del líquido del yogurt intentando no tocar con el asa la parte sólida
pues contiene demasiada grasa y esto podría dificultarnos la observación.
Realiza un frotis extendiendo completamente la muestra en la gota de agua y por todo el
portaobjetos
Seca la preparación pasándola cuidadosamente sobre la llama del mechero de alcohol
utilizando las pinzas de madera y evitando quemarla
Añade unas gotas de alcohol para eliminar el exceso de grasa y tras unos minutos lava la
muestra con agua
Vierte sobre la preparación unas gotas de azul de metileno y deja actuar al colorante 5
minutos.
Lava el exceso de colorante con cuidado
Monta el cubre objetos intentando que no queden burbujas de aire y seca la preparación
con papel de filtro para no manchar la platina del microscopio.
Observa la preparación con el mayor aumento posible usando el aceite de inmersión

NOTA: Podemos sustituir el yogurt por sarro dental. El sarro dental es un

depósito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los dientes.
Está constituido principalmente por restos de proteínas, sales minerales y
bacterias. Para observarlo toma una pequeña porción con ayuda de un palillo y
sigue los mismos pasos que para la observación de las bacterias del yogur (no
utilices alcohol). Otra opción muy recomendable y con excelentes resultados es
el uso de probióticos. Para ello disuelve en agua destilada un poco de probiótico,
deposita una pequeña gota sobre un porta, fija con calor, tiñe y cubre con un
cubreobjeto.
 RESULTADOS
Y CONCLUSIONES

1. ¿Qué formas celulares has observado en la muestra?. Dibújalas o añade una foto de la
observación al microscopio y señálalas

2. ¿Cuáles son los dos tipos de bacterias que podemos encontrar en el yogurt? ¿Qué proceso
realizan para convertir la leche en yogurt?

3. Busca información sobre otros productos alimentarios que emplean bacterias para su
elaboración.
 PRÁCTICA DE LABORATORIO
CULTIVO DE BACTERIAS Y OTROS MICROORGANISMOS
INTRODUCCIÓN

En microbiología, un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos, tales

como lo son bacterias en el que se prepara un medio óptimo para favorecer su desarrollo y
multiplicación. Un cultivo es empleado como un método fundamental para el estudio de las
bacterias y otros microorganismos que causan enfermedades en medicina humana y
veterinaria. La higiene, por tanto, es fundamental para evitar la transmisión de
enfermedades causadas por estos microorganismos.

OBJETIVOS

Aprender los distintos instrumentos, procedimientos y técnicas para el cultivo de

microorganismos.
Comprender la importancia de la higiene diaria para evitar enfermedades transmitidas
por microorganismos

MATERIALES

Placa Petri con agar agar.

Asa de siembra o material estéril
Estufa de laboratorio
Mechero Bunsen o de alcohol
Agua destilada
Rotulador permanente
Papel secante
Guantes latex
 PROCEDIMIENTO

Preparación del medio de cultivo

Reservamos 50 ml de agua en un vaso (de precipitado o normal) yvertemos 200 ml en un Erlenmeyer o cazo.
A los 200 ml de agua se le echa medio cubito de caldo de pollo y una pizca de sal. Ponemos a calentar en el
microondas u hornillo hasta que todo quede disuelto (es preferible darle un punto de hervor para empezar a
«esterilizar» el medio).
En los 50 ml de agua que reservamos al principio, añadimos los 4 g de agar-agar. A continuación, se vierte
esta mezcla en el caldo caliente que se volverá a calentar hasta que el agar-agar esté completamente
disuelto en la solución (no han de quedar grumos). En este último paso es importante que la mezcla también
llegue a hervir, pues se debe evitar que el medio quede contaminado.
Vertemos la mezcla con el agar-agar en cada una de las placas o recipientes que tengamos a nuestra
disposición. Y vamos cerrando rápidamente cada uno de los recipientes tras verter el medio. Es aconsejable
verter la mezcla estando caliente -cuidado de no quemarnos-, para evitar la contaminación de la solución.
Dejamos reposar, a temperatura ambiente o en frío, hasta que solidifique.

Cultivo de microorganismos
Rotula en cada placa de petri las condiciones del cultivo que vamos a realizar y la fecha:
“mano sucia”, “mano lavada con agua”, “mano lavada con agua y javón”
Enciende el mechero para crear una atmósfera aséptica durante la siembra o cultivo
Destapa la placa de petri marcada como “mano sucia” y pon la mano sobre el medio de
cultivo con cuidado de no romperlo. Cierra la placa.
Lávate las manos con agua y jabón, a continuación, destapa la placa de petri marcada
como “mano lavada” y realiza el procedimiento anterior
Ahora debemos proceder al cultivo de los microorganismos de las placas. Para ello
dejaremos las placas en una estufa de cultivo durante 24-72 horas a 37ºC.
 RESULTADOS
Y CONCLUSIONES

1. Toma una fotografía de los resultados obtenidos de los cultivos de microorganismos y

adjúntala.

2. Realiza una breve descripción de los resultados y diferencias obtenidoos en cada cultivo

3. En vista a los resultados. ¿Qué conclusiones sacas en relación a la higiene diaria?

 RECOMENDACIONES

La preparación del medio de cultivo ha de hacerse en concisiones

adecuadas para impedir su contaminación. Para ello:

Limpia el matraz en el que vas a preparar el medio con agua destilada

y jabón. Tras su limpieza añade una solución de hipoclorito sódico
diluido (en ciertos supermercados venden pastillas solubles para la
desinfección de superficies). Enjuaga el matraz con agua destilada.
Durante la preparación del medio tapa la boca del matraz con algodón
Al añadir el Agar a la mezcla, hazlo usando una cucharilla previamente
desinfectada en alcohol o hipoclorito.
Si las placas de petri no están esterilizadas previamente, lávalas con
agua y jabón. Posteriormente, espolvorea cada placa con un poco de
alcohol o hipoclorito y sécalas con un algodón.
Una vez preparada la mezcla, déjala reposar unos minutos y ve
rellenando las placas de petri. Durante este proceso, flamea la boca
del matraz cada vez que rellenes una placa.
Una vez rellenas y cerradas las placas déjalas reposar hasta que el
medio solidifique.
Todo el proceso de preparación del medio y las placas para la siembra
deben hacerse junto al mechero de alcohol encendido, para crear una
atmósfera libre de microorganismos