Materiales y métodos.

Agentes quimícos

Catequina, ácido gálico, DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl), DMEM (Dulvecco´s Modified Eagles

Medium), Folin-Ciocalteu reactivo, deoxy-d-Ribosa, los cuales fueron proporcionados por Sigma-
Aldrich.

Material de prueba

Se realizó una colecta en el mes de agosto de 2009 de hojas de Quercus durifolia

con la ayuda del Maestro en Ciencias Jeffrey Bacon, de la Facultad de Ciencias
Químicas de la Universidad Juárez del Estado de Durango en el municipio del
Mezquital camino al poblado “La Flor”, 20 km adentro. Las hojas fueron
registradas en el Herbario de la UJED con el número de Voucher Muestra 2009-8-
14-2.

Preparación y envasado de la infusión.

La infusión fue elaborada en el Laboratorio de Alimentos Funcionales, en el área

de cultivo celular, la campana fue previamente esterilizada con Etanol 70% y
después con luz UV, las botellas que se utilizaron para envasar la infusión son de
plástico PVS, las cuales se lavaron previamente con detergente, luego se
enjuagaron con Etanol 70% y fueron esterilizadas con luz UV. Se utilizaron
botellas de 250 mL. La infusión se elaboró añadiendo 1g en 100 mL de agua
hirviendo, se dejó reposar la infusión por 10 min y después se envasó.

Contenido de polifenoles

Contenido total de polifenoles en las infusiones envasadas se determinó por el

método de Folin-Ciocalteu modificado por Heimler, Vignolini, Dini, Vincieri, and
Romani (2006) usando ácido gálico como estándares representativos de
compuestos fenólicos, los resultados se expresaron con equivalentes de ácido
gálico (mg/g de muestra).

Análisis de cromatografía liquida de alta resolución (HPLC)

El análisis de HPLC fue realizado en un equipo Waters® 2487 con detector de
doble longitud de onda, inyector y automuestreador Waters® 600; la columna
utilizada fue Supelcosil® LC 18 (25 cm x 4.6 mm, 5µm), se utilizaron dos fases
siendo la Fase A agua destilada grado HPLC la cual fue acidificada previamente
con ácido acético a pH de 2.6. La Fase B fue metanol grado HPLC, se realizaron
lecturas a doble longitud de onda 280-360nm, flujo constante de 1 mL/min. Para la
identificación de compuestos presentes en las infusiones y sus fracciones se
utilizaron los siguientes estándares: ácido siríngico, ácido caféico, ácido gálico,
ácido cumárico, galocatequina galato, catequina, epicatequina galato,
galocatequina, ácido 3,4 dihidrobenzoico.

Tabla 10. Cambio de gradiente de solventes del método HPLC

Tiempo Fase A Fase B (%)

(min) (%)
0 95 5
25 70 30
30 40 60
35 95 5
40 95 5

Ensayos de capacidad antioxidante