MICROSCOPÍA, TÉCNICAS

FUNDAMENTO DE HEMATOXILINA Y EOSINA (RE TOMADO EN UN ORAL)

 Se denomina acidofilia a la capacidad de tinción con los colorantes ácidos y basofilia, a la

capacidad de tinción con los colorantes básicos
 un ácido es una sustancia capaz de liberar un protón y una base es una sustancia capaz de
aceptarlo).
 En el lenguaje histoquímica, un colorante ácido (aniónico) tiene capacidad para formar un
enlace electrostático (iónico) con un grupo tisular con carga positiva.
 En cambio, un colorante básico (catiónico) puede formar un enlace electrostático con un
grupo tisular con carga negativa. Así, las uniones entre colorantes ácidos (aniónicos) y
básicos (catiónicos) y Los grupos tisulares tienen, esencialmente, características
electrostáticas
 Para las tinciones histológicas comunes, se utiliza un pH del que por experiencia se conoce
su buen contraste de color. Con el pH elegido, algunos componentes tisulares son
acidófilo, mientras que otros serán basófilos.
 Basófilo: seria REG, los ácidos nucleicos (ARN /ADN)
 Acidofilo: proteínas, mitocondrias etc.

RESUMEN:
PASOS DE LA MUESTRA PARA MICROSCOPÍA OPTICA
La parafina es una sustancia de aspecto ceroso que está formada por mezclas de
hidrocarburos saturados. A temperatura ambiente es sólida y su punto de
fusión puede variar entre 40 °C y 70 °C según la composición de la mezcla de
hidrocarburos.
la parafina no es miscible con agua, mientras que todos los tejidos están formados
principalmente por agua.

Después de la tinción, por lo general se deshidrata nuevamente la muestra de tejido y se

monta, es decir, se cubre con una gota de medio de montaje transparente. Después, se
coloca un cubreobjetos para proteger el preparado.
PARA CHOICES:
Inmunohistoquímica:
Se basa en: la detección de reacciones antígeno-anticuerpo por medio
De la marcación de los anticuerpos.
Sirve para: detectar sustancias (principalmente proteínas), muy específicamente, que
pueden estar en muy bajas concentraciones en el tejido en estudio.
MICROSCOPÍA

Parte mecánica
- Pie o estativo
- Brazo o columna: se articula con el pie por medio de un tornillo llamado charnela.
- Tubo: se encuentran las lentes objetivo y ocular.
- Par de tornillos: macrométrico y micrométrico.
- Platina: plataforma ubicada encima del condensador.

Funciones:
- El tubo se puede desplazar en forma ascendente y descendente para enfocar el
preparado por medio de los tornillos macrométrico y micrométrico.
- El tornillo macrométrico sirve para enfocar grandes distancias, fácilmente apreciables por
el observador.
- El tornillo micrométrico sirve para enfocar pequeñas distancias, difíciles de apreciar por
elobservador pero imprescindibles para lograr el foco a grandes aumentos.
- La platina es la superficie plana de forma circular o cuadrara en la cual se apoya el
portaobjeto con la sección coloreada del tejido a observar.
Posee un orificio amplio por el cual pasa la luz proveniente del condensador, y posee un
carro que permite el movimiento del preparado por medio de dos tornillos en los dos ejes
del plano de la platina.
- Debajo de la platina, hay un sistema denominado subplatina que sostiene el aparato de
iluminación (consta de diafragma, anillo portafiltro y espejo o fuente de luz).
Parte óptica
- Espejo o fuente de luz incorporada
- Condensador con diafragma
- Lentes denominadas ocular y objetivo:
La lente ocular se encuentra en la parte superior del tubo y su aumento es generalmente
de 10X. Dichas lentes son lentes convergentes: aumentan de tamaño la imagen real, para
obtener una imagen mayor, virtual e invertida respecto del objeto observado.
Las lentes objetivo están montadas en el revólver. Sus aumentos suelen ser: 4X
panorámico, 10X objetivo seco débil y 40X objetivo seco fuerte. Algunos poseen 100X
objetivo de inmersión.
Las lentes objetivo suelen tener inscritos los números que indican el aumento y su
apertura numérica.
- El cálculo del aumento final de la imagen se realiza multiplicando la magnificación del
ocular por la magnificación del objetivo que se emplea en cada caso.

- El condensador es una lente o un conjunto de lentes de tipo convergente que tiene por
finalidad
concentrar los rayos de la fuente luminosa en el plano de la cara superior del portaobjeto.
Límite de Resolución: Mínima Distancia que debe existir entre 2 puntos para ser
Vistos como separados
Poder Resolutivo: Capacidad de un Sistema Óptico para ver Detalles
Microscopio electrónico
- Hay dos tipos de microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de transmisión
(MET) y el microscopio electrónico de barrido (MEB). En los MET, la sección es atravesada
por el haz de electrones, mientras que en los MEB los electrones no atraviesan la muestra
sino que chocan contra la superficie misma.
- MET: permite el estudio de ultraestructuras celulares, como organoides, elementos del
Citoesqueleto y membranas biológicas. Permite obtener información tridimensional, en
blanco y negro.
- MEB: permite obtener información de la morfología de la superficie celular con un alto
grado de resolución. Las imágenes se muestran en forma tridimensional y la superficie de
las estructuras biológicas estudiadas se ven en blanco y negro.

DIFERENCIA ENTRE MICROSCOPIO OPTICO VS ELECTRÓNICO

La imagen (i) que resulta será real (imagen del lado opuesto a la lente), invertida
(orientado en sentido inverso al objeto) y mayor (en tamaño) .