Cuadernillo de Práctica Técnicas Analíticas Instrumentales 2023

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Guía de ejercicios – Espectroscopia UV-Vis

1. Se desea determinar la concentración de Fe en suelos mediante la técnica de espectrometría de

absorción molecular. El método a emplear se basa en la formación de un complejo, el cual
absorbe radiación electromagnética en la zona UV-Visible.

a) Indique qué ley relaciona la señal obtenida experimentalmente con la concentración del
analito. Indicar el significado que tiene cada uno de los parámetros.

b) Teniendo en cuenta que la siguiente curva espectrométrica corresponde al complejo:

i. Seleccione la longitud de onda apropiada para realizar la cuantificación.

ii. Describa cómo sería la curva espectrométrica si se aumentara la concentración de la

solución testigo utilizada.

iii. Explique las diferencias que obtendría entre las curvas de calibrado obtenidas
trabajando con cada una de las λ indicadas en el gráfico.

2. Para la medición de transmitancia en un espectrofotómetro UV- Vis de simple haz se siguen los
siguientes pasos:

1. Ajuste del 0% de transmitancia.

2. Ajuste del 100% de transmitancia.
3. Medición del % de transmitancia de la muestra y/o testigo.

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a) Indicar en cuál de estos 3 pasos se debe utilizar la celda con la solución de referencia
(blanco del método).

b) Mencione qué condición debe cumplir la solución de referencia.

c) Describir cómo obtendría experimentalmente un espectro de absorción del complejo

formado en el Problema 1.

d) Enumere y explique los pasos a seguir para determinar experimentalmente la

concentración de hierro en la muestra del Problema 1.

3. Una solución de KMnO4 de concentración 1,00 x 10-4 M, tiene una transmitancia igual a 0,500 a
525 nm, medida con una cubeta de 1,00 cm.

a) Calcular la Absorbancia (A) de dicha solución.

b) Calcular la A y la T% si la concentración de la solución fuera el doble. Justifique.

c) Calcular la concentración si la T fuera 0,750 y se utiliza la misma cubeta.

d) Calcular la T% y la A de la solución original cuando la misma está contenida en una celda

de 0,5 cm de longitud.

e) Calcular el valor de la absortividad específica. Indicar de qué depende este valor.

4. Un compuesto presenta una ε = 13117 L cm-1 mol-1 a una λ de 270 nm. Una solución que contiene
0,420 mg de dicho compuesto en 50,00 mL presenta una T% = 35,5 a la misma λ. Teniendo en
cuenta que la medición se realizó con una cubeta de 1,00 cm:

a) Determinar el peso molecular de dicha molécula.

b) Indicar de qué depende el valor de T%.

c) Indicar en que región del espectro electromagnético se observan dichas señales de A.

d) Teniendo en cuenta la siguiente información de materiales empleados en la fabricación de

cubetas indique qué clase de cubeta utilizaría para efectuar la cuantificación de dicho
compuesto.

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e) Calcular qué dilución de dicha solución se necesita realizar para obtener una señal de
absorbancia de 0,225.

f) Describa cómo procedería para realizar la cuantificación de dicho compuesto aplicando la

técnica de espectrometría de absorción molecular.

g) Indicar qué propiedad molecular debe presentar la estructura de dicho compuesto para
poder cuantificarlo por absorción molecular.

5. El siguiente dibujo presenta el diagrama óptico de un espectrofotómetro Spectronic 20 utilizado

para determinaciones cuantitativas:

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a) Especifique si se trata de un espectrofotómetro de simple o doble haz.

b) Indique cuál es la fuente de energía radiante. Indicar en qué región del espectro
electromagnético trabaja dicho componente y si se trata de una fuente de energía radiante
continua o de radiación de líneas espectrales.

c) Indicar cuál es el monocromador y cuál es su función.

d) Indicar por qué es conveniente utilizar una ranura ancha para realizar análisis cuantitativos
o cuando la sensibilidad del detector es baja.

e) Indique cuál es el dispositivo transductor de la señal óptica en eléctrica. Dicho dispositivo

genera una corriente eléctrica proporcional a:

i. La longitud de onda seleccionada.

ii. La intensidad de energía radiante.
iii. La corriente oscura.

6. Considerando el procedimiento y los datos del ejercicio 6 de la guía de repaso:

a) Informar la concentración de Co (II) en la muestra incógnita, expresando el resultado como

V1 ± V2 en mg L-1, teniendo en cuenta que 4,00 mL de la misma fue tratada con la solución
de NH4SCN al 50% (ac) en acetona y se enrasó finalmente a 100,00 mL, obteniéndose a
620 nm, una T% = 56,2.

b) Describir el procedimiento para seleccionar la λ.

c) Indicar qué clase de cubeta utilizó en este ensayo.

7. A partir de una solución de trabajo de Zr de concentración 25 mg L-1 se prepararon una serie de

testigos, tomando los volúmenes indicados, agregando los reactivos adecuados y llevando a un

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volumen de 10,00 mL. Las correspondientes medidas de T% fueron leídas a 421 nm y se

muestran en la siguiente tabla:

Testigo mL T%

1 0,20 52,8

2 0,40 45,8

3 0,60 40,0

4 0,80 36,0

5 1,00 31,0

Para el análisis de una muestra de barros, conforme a normas, se pesaron 2,000 g de muestra
y se llevó a un volumen de 250,00 mL. De allí se tomaron 5,00 mL y se trabajó de igual forma
que con los testigos. La absorbancia promedio de 3 réplicas fue 0,370. En función de lo
mencionado:

a) Realice la curva de calibrado expresando los testigos en mg Zr L-1.

b) Indique como se obtiene la expresión que relaciona A vs concentración.

c) Calcular la sensibilidad del método.

d) Calcular los mg% de Zr en la muestra expresando el resultado como V1 ± V2.

8. Representar la curva de calibrado del ejercicio 7 en A vs mg de analito cada 100 g de muestra.

Calcular la concentración y compararla con el valor obtenido previamente.

9. Una de las técnicas para la determinación de manganeso en aceros es la oxidación de éste a

permanganato. Se toman 0,1000 g de muestra y se la disgrega apropiadamente con una mezcla
ácida. La solución resultante se lleva a volumen con agua destilada en un matraz aforado de
100,00 mL. De esta solución se toman 50,00 mL, se transfieren a un vaso de precipitado de 250
mL, se agregan los reactivos necesarios para la oxidación y se calienta a ebullición. Cuando esta
solución se enfría se llevan a un matraz aforado de 100,00 mL enrasando con agua destilada.
Las lecturas de los testigos fueron las siguientes:

mg Mn/100 g muestra T%
0,20 74,1
0,40 50,0
0,60 35,5
0,80 25,0
1,00 18,6

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a) Calcular qué volumen de la solución patrón (KMnO4 10-4 M) hay que tomar para preparar
cada uno de los testigos de la tabla anterior.

b) Informar la ecuación matemática de la recta de calibrado, expresando la pendiente en (mg

Mn / 100 g)-1.

c) Informar la ecuación matemática de la recta de calibrado, expresando la pendiente en (mg

Mn / L)-1.

d) Calcular la concentración de una muestra que tuvo una lectura de T = 0,44 expresando el
resultado como V1 ± V2.

10. El Ti y el V forman complejos con H2O2. Se prepararon patrones de estos metales disolviendo
en ambos casos 5,000 mg del metal y agregando HClO4. Finalmente, se llevó a 100,00 mL. Una
tercera solución fue preparada disolviendo 1,000 g de aleación, que contiene Ti y V y se trató
igual a los patrones. Los datos de absorbancia son los siguientes:

Solución A (410 nm) A (460 nm)

Ti 0,760 0,313
V 0,185 0,650
Aleación 0,715 0,657

a) Indicar qué material volumétrico utiliza para el agregado de HClO4.

b) Calcular los g% de Ti y los g% de V en la aleación.

c) Indicar cómo se seleccionaron las longitudes de onda de 410 y 460 nm.

11. Se desea determinar la concentración de Co (II) y Cr (III) en una muestra de lodo residual
proveniente de una curtiembre. Para ello se pesaron 5,000 g de lodo, se los colocó en un balón
y se adicionó 50 mL de una mezcla HCl:HNO3 (3:1). Se calentó a reflujo a 90 °C durante 3 h y
una vez enfriado se filtró y llevó a un volumen final de 100,00 mL. Los patrones de Co (II) y Cr
(III) se prepararon tomando 25,00 mL de una solución 1,203 M de Co(NO3)2 y 0,240 M de
Cr(NO3)3, respectivamente. Se agregó 50 mL de una mezcla HCl:HNO3 (3:1) y se llevó finalmente
a un volumen de 100,00 mL. Los datos y los espectros obtenidos fueron los siguientes:

Solución A (510 nm) A (575 nm)

Co (II) 0,670 0,062
Cr (III) 0,071 0,195
Muestra 0,587 0,210

a) Indique por qué se seleccionaron las longitudes de onda de 510 nm y 575 nm y si es posible
la aplicación del método utilizando el máximo de absorbancia para Cr (III) a 405 nm.

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b) Describa qué experimento adicional debió realizar para justificar la aplicación del método
de aditividad de absorbancias.

c) Calcular los g% de Co (II) y los g% de Cr (III) en base seca, teniendo en cuenta que la
humedad de la muestra de lodo es de 31 g%.

12. Se realiza una titulación espectrométrica de una solución incógnita A con un agente valorado B,
según la siguiente reacción:

A+B⇌C

Cuando se trabaja a λ1 se obtiene: Cuando se trabaja a λ2 se obtiene:

AC AC

a) Explicar ambas curvas de titulación indicando en cada caso cuáles son las especies que
absorben a λ1 y λ2, respectivamente.

b) Indicar gráficamente los puntos finales de cada titulación.

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c) Indicar qué condición deben cumplir ambos puntos finales cuando la concentración de B
es la misma para ambas titulaciones de la misma muestra.

d) Describir como se realiza el trazado de estas curvas de titulación.

e) Una muestra de 1,000 g es disuelta completamente en un volumen de 100,00 mL de agua

destilada. Se toma un alícuota de 25,00 mL y se titula a λ1 para determinar la especie A
con una solución B (1x10-4 M). Determinar la concentración de A en la muestra sólida
expresada en % (PMA = 63,54 g mol-1).

f) Indicar cómo es la absortividad específica de B respecto de la de C a cada longitud de

onda.

13. Dada la reacción de titulación:

A + B + C ⇌ AC + BC

donde C es el agente valorado y considerando que Kest de BC >>> Kest de AC, se realizaron las
siguientes curvas espectrométricas:

a) Seleccionar la longitud de onda óptima de trabajo para realizar la titulación espectrométrica

simultánea de A y B.

b) Teniendo en cuenta las curvas de titulación que se muestran a continuación, indicar cuál
de ellas corresponde a la titulación realizada, trabajando a la longitud de onda seleccionada
en el inciso anterior. Explicar brevemente la curva de titulación elegida indicando el o los
puntos finales de la titulación, qué especies se encuentran presentes en cada tramo de la
curva de titulación y cuáles de ellas absorben en cada caso.

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14. El ión nitrito suele ser determinado mediante un procedimiento espectrofotométrico en el que se
utiliza la reacción de Griess. La muestra que contiene nitritos se hace reaccionar con
sulfanilamida y N-(1-naftil)etilendiamina para que se forme una especie coloreada que absorbe
radiación a 550 nm. Al aplicar la técnica de adiciones estándar a una muestra de agua de mar
se siguió el siguiente procedimiento: se toman alícuotas de 5,00 mL de la muestra y se descargan
en matraces volumétricos de 50,00 mL. Luego, en cada matraz, se agregan 0,00 mL; 2,00 mL;
4,00 mL; 6,00 mL y 8,00 mL de una solución patrón que contiene 10,00 µM de nitrito, y se añaden
los reactivos que forman el color, enrasando finalmente cada matraz con agua destilada. Las
lecturas de absorbancia de cada una de dichas soluciones fueron: 0,139; 0,299; 0,486; 0,689; y
0,865, respectivamente.

a) Grafique y calcule la curva de calibración de adiciones estándar.

b) Determine la concentración de nitritos en la muestra incógnita de agua de mar expresando

el resultado como V1 ± V2.

15. Una muestra de orina de 2,00 mL se trató con un reactivo que genera color con el ión PO 43- y
se diluyó a 100,00 mL con agua destilada. A una segunda muestra de 2,00 mL se le añadieron
exactamente 5,00 mL de una solución de PO43- que contenía una concentración de 0,0300 mg
de PO43- mL-1, y se la trató de la misma forma que a la muestra original. La absorbancia de la
primera solución fue 0,428 y la de la segunda fue de 0,538.

a) Calcule la concentración de PO43- expresada en mg mL-1 de la muestra de orina.

b) Mencione bajo qué supuestos puede utilizar esta técnica de cuantificación.

16. Se desea determinar la concentración de sulfatos en una muestra de agua de un canal de riego.
Para ello se dispone de 500 mL de muestra, se realiza una dilución tomando 1,00 mL de la misma
y llevando a 25,00 mL con agua bidestilada. De esta solución se toman 4,00 mL, se agregan 3,0
mL de KCl-HCl y se lleva a un volumen de final 20,00 mL. Finalmente se agregan 150 mg de
BaCl2, se agita enérgicamente y se lee la señal, siendo el valor promedio de cinco lecturas de
0,275. La curva de calibrado se realiza con una solución de trabajo de 29,0 mg % (m/v) de SO42-
, tomando alícuotas de 0,80; 1,60; 2,40; 4,00 y 8,00 mL, agregando 3,0 mL de KCl-HCl y llevando
al mismo volumen final que las muestras. Los valores de la señal son: 0,209; 0,255; 0,295; 0,364
y 0,520 respectivamente.

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a) Calcular la concentración de las soluciones testigo expresadas en mg de SO42- L-1.

b) Grafique la curva de calibrado.

c) Calcular el contenido de SO42- en la muestra, expresándolo como V1 ± V2 en mg L-1.

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