 Preparación del lugar de

trabajo

 Preparación de
materiales

 Preparación de medios
de cultivo

 Siembra de medios de
cultivo
Medios de cultivo (para el crecimiento)

Material de vidrio (pipetas, matraces, placas Petri, tubos,

etc.)

Materiales diversos (hisopos, algodón abatelenguas, batas,

asas de nicromel, desinfectar mesas de trabajo, etc.)

Espacios (campana de flujo laminar, habitaciones, etc.)

Sustancias que estarán en contacto con la muestra a

analizar
• Uso de autoclave

• Empleando horno de calor seco

• Empleando antisépticos y desinfectantes

• Utilizando fuego directo

• Empleando membranas filtrantes (0,2-0,45 micras)

• Empleando radiaciones UV
Papel de estraza
Esporas:
formas de vida
resistentes al calor

Célula vegetativa:
estadío en el que las
bacterias son
vulnerables al calor
• Las esporas no sobreviven a un presión de vapor de 15
libras (1.06 kg/cm2) durante 15 minutos.
– Las suspensiones de esporas se utilizan para verificar los
procedimientos de autoclave

• Bacterias capaces de formar esporas:

– Géneros:
• Bacillus spp y Clostridium spp
¿De que depende el uso de estos métodos?
 • Fácil manejo
• Escasa capacidad de penetración
Luz UV •
•
Esterilización de ambientes
λ 250 a 265 nm

• 1884 filtro de Chamberland (porcelana sin vidriar)

• Fluido estéril se conduce por succión al matráz
Filtración •
•
Filtros de membrana (recuento de mo)
Para materiales que se dañan con el calor

• Son subproducto metabólico de algún mo.

• A. Fleming (1927) Descubrimiento de la penicilina
Penicillium notatum VS Staphylococcus aureus
Antibióticos (Gram positiva)
• S. Waksman (1944) Descubrimiento de la
estreptomicina Streptomyces griseus VS Gram
negativas 1940
• Implica la eliminación de todas las formas de vida, es
libre de microorganismos

• Otras metodologías, como desinfección, pasteurización,

antiséptico, etc., conllevan una eliminación parcial de los
microorganismos existentes.
Flujo del vapor en un autoclave
La temperatura del objeto se eleva mas lentamente que la
temperatura del autoclave.
Siembra por extensión
 Micrografías al microscopio electrónico de dos
membranas de filtro de diferente tamaño de poro
 La placa original de Fleming
demostraba la inhibición de S. aureus
(las colonias de la parte de abajo) por
una colonia de P. notatum (la colonia
blanca circular en la parte superior).
Esto condujo al descubrimiento de la
penicilina.
Coagulación de Lesiones de las Inhibición de Antagonismo
las proteínas M. celulares enzimas químico
• Calor • Detergentes • Supresión de • Compuestos
• Formalina catiónicos grupos –SH químicos muy
• Fenol • Sustancias que libres parecidos a
• ROH´s alteren la • Cloro sustratos
permeabilidad • Yodo esenciales de
• Cloro las enzimas,
de la • Peróxido de
• Yodo membrana generalmente
hidrógeno
• Cresol celular inhiben la
• Sales de
• Ácidos reproducción
metales celular
• Álcalis pesados:
mercurio,
plata, cobre
Mecanismos de
resistencia
antimicrobiana