Departamento de Biología General

Escuela de Biología

TALLER DE MICROSCOPÍA

1. Introducción

Existen casos en los cuales la observación de los objetos a simple vista no nos
permite examinar algunos detalles que nos interesan. Los instrumentos de óptica se han
creado para facilitarnos y mejorar la observación de estos detalles. Lupas y microscopios
de distintos tipos son aparatos con los cuales se observan objetos que no podemos
percibir o distinguir a simple vista.

La microscopía inicia en 1590 y sufre cambios favorables durante el siglo XVII

(Campbell y Reece, 2007). En 1665 Robert Hooke emplea lentes simples y describe por
primera vez una célula. Sin embargo, la primera persona que vio con cierto detalle los
microorganismos fue el holandés Anton van Leeuwenhoek, quien empleó microscopios
simples hechos por él mismo (Solomon, Berg y Martin, 2008). Los microscopios que usted
utilizará en el laboratorio de Biología General son microscopios ópticos. Este tipo de
microscopio le permitirá observar estructuras celulares que tengan un diámetro superior a
0.2 micrómetros (μm) (Solomon y otros, 2008). Los microscopios ópticos son muy útiles
para observar a detalle los diferentes tipos de células que conforman los tejidos, como las
que integran estomas y las células sanguíneas.

Los microscopios estereoscópicos, también llamados estereoscopios (como les

llamaremos en el resto del manual), permiten hacer estudios de objetos y especímenes
demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista, pero demasiado grandes para
ser colocados sobre la platina de los microscopios de gran aumento. Los estereoscopios
también son conocidos como microscopios de disección, pues en muchas ocasiones son
usados durante la disección de especímenes o muestras, durante la cual se separan
aquellas partes que serán examinadas mediante otros tipos de microscopía.

El uso correcto de los instrumentos ópticos es una técnica básica que debe
adquirir todo estudiante de ciencias biológicas. Como toda técnica compleja, necesita
continua ejercitación para lograr niveles operativos aceptables. La observación a través
del microscopio debe ir acompañada por la esquematización y descripción de los objetos
observados, con el fin de integrar un material de estudio basado en la experiencia
personal. Para poder observar un objeto o una muestra a través de un microscopio, debe
tratarse con técnicas diferentes, algunas más especializadas que otras, dependiendo de la
muestra. Estas técnicas aseguran la integridad de las muestras y la seguridad de observar
lo que se desea.

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2. Objetivos

1. Desarrollar destrezas en el uso y transporte del microscopio y del estereoscopio.

2. Identificar las partes del microscopio y del estereoscopio mediante su
manipulación, con la guía del instructor de laboratorio.
3. Adquirir habilidad en la preparación de montajes húmedos.
4. Enfocar correctamente diversos objetos y estructuras biológicas a través del
microscopio y del estereoscopio.

3. Material y Equipo
● Estereoscopio ● Papel limpia-lentes
● Microscopio ● Papel periódico impreso
● Agua destilada en goteros ● Pequeñas flores
● Agujas de disección ● Pequeños invertebrados
● Cajas de Petri ● Pinzas
● Espátulas ● Porta y cubreobjetos
● Flores de distintas especies ● Vidrios de reloj
(para realizar un montaje húmedo
de polen)

4. Procedimiento

DÍA 1

4.1 Preparación previa

a. Se formarán grupos de trabajo y el instructor asignará un número de microscopio

y de estereoscopio a cada grupo, que será el que utilizará durante todo el taller.
b. Desocupe la mesa de trabajo para conservar sólo lo indispensable.
c. Lávese las manos antes de tomar el equipo óptico.

4.2 Montaje húmedo y uso del microscopio compuesto

a. En el centro de un portaobjetos, coloque un recorte de periódico

con una letra asimétrica.
b. Agregue una gota de agua.
c. Coloque el cubreobjetos en un ángulo de 45° respecto al
portaobjetos y bájelo lentamente, como se muestra en la figura 1.
d. Saque el microscopio con cuidado, sin arrastrarlo, y transpórtelo
a la mesa de trabajo, tomándolo del brazo con su mano
dominante (derecha si es diestro; izquierda si es zurdo),
sosteniendo la base con la otra mano, y manteniendo el aparato
pegado a su cuerpo.
e. Colóquelo suavemente sobre su mesa de trabajo en ángulo recto
con relación al largo de la misma y alejado del borde, sin
arrastrarlo.

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f. Retire la funda, dóblela y guárdela bajo la mesa de trabajo.

g. Verifique el estado del microscopio y regístrelo en la hoja de control
correspondiente. Si nota alguna anomalía, notifíquesela a su instructor o
instructora, para que quede constancia de que el microscopio ya estaba así. De lo
contrario, la responsabilidad de dicha anomalía recaerá en su grupo de trabajo.
h. Asegúrese de que el microscopio esté apagado antes de conectar el cable de
electricidad. COLOQUE EL EXCESO DE CABLE SOBRE LA MESA, pues si lo
deja colgando corre el riesgo de tirar de él.
i. Asegúrese de que el objetivo que esté en posición vertical sea el de menos
aumento.
j. Asegúrese de que la platina esté lo más abajo posible, alejada del objetivo.
k. Manipule el sujetador de portaobjetos (pinza) para poder colocar y ajustar el
portaobjetos con la muestra, soltando la pinza lentamente.
l. Retire la tapa protectora de la bombilla (para que no tope con el condensador) y
baje el condensador hasta su nivel más bajo.
m. Encienda el microscopio.
n. Si usa anteojos, quíteselos.
o. Separe o aproxime los oculares de acuerdo con la distancia de sus ojos, hasta ver
una sola imagen. Conserve los dos ojos abiertos todo el tiempo.
p. Con el tornillo macrométrico, suba la platina hasta su posición más alta.
q. Utilice los tornillos de desplazamiento de la platina para que la muestra quede
centrada.
r. Siempre con el tornillo macrométrico, baje la platina lentamente hasta que la
muestra quede bien enfocada.
s. Asegúrese de que los oculares estén en su posición más baja (más aumento). Si
tiene diferencia de agudeza visual entre los dos ojos, cierre el ojo que ve mejor (el
que necesita menor graduación) y use el TORNILLO MICROMÉTRICO para
enfocar perfectamente la imagen. Luego cierre el ojo que ve menos (el de mayor
graduación) y SIN TOCAR NINGÚN TORNILLO, gire el AJUSTE DEL OCULAR
por el cual está observando, para alejarlo hasta que vea perfectamente.
t. Compare cómo se ve la letra a través del microscopio y a simple vista. ¿Qué
puede usted notar al respecto? Mueva el portaobjetos hacia la derecha. ¿En qué
dirección se desplaza la imagen? Responda la primera pregunta de su hoja de
reporte / esquemas y descripciones.
u. Rote el revólver para observar con el objetivo de 10x. A PARTIR DE AHORA,
SÓLO PODRÁ MANIPULAR EL TORNILLO MICROMÉTRICO para enfocar. Cada
vez que pase a un objetivo de mayor aumento, deberá:
● subir un poco el condensador (éste debe estar totalmente abajo cuando se use
el objetivo de 4x, y CASI totalmente arriba cuando se use el de inmersión);
● aumentar un poco la intensidad de la luz;
● (tal vez abrir un poco más el diafragma).
v. Observe con el objetivo de 40x, tomando en cuenta las observaciones del inciso
anterior.
w. Cada vez que vaya a retirar el portaobjetos, debe tener estas precauciones: 1)
girar el revólver para ir pasando al objetivo de menor aumento, hasta llegar al de
4x; 2) bajar la platina, para evitar dañar el objetivo al retirar el portaobjetos.
x. Con la ayuda de una pinza o de agujas de disección, tome distintos granos de
polen y prepare un montaje húmedo con ellos. Observe con el microscopio.
Esquematice y describa en su hoja de esquemas y descripciones.

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y. Cuando termine de utilizar el microscopio, cumpla con todos los criterios señalados
en las hojas de revisión de microscopios.

Notas:
● Si puede ver sus pestañas al enfocar, acérquese más a los oculares.
● Si ve una línea negra que atraviesa el ocular, no se preocupe: es el puntero del
ocular; sirve para señalar algún detalle específico de la muestra.

4.3 Estereoscopio

a. Saque el estereoscopio con cuidado, sin arrastrarlo, y transpórtelo a la mesa de

trabajo, tomándolo del brazo con su mano dominante (derecha si es diestro;
izquierda si es zurdo), sosteniendo la base con la otra mano, y manteniendo el
aparato pegado a su cuerpo.
b. Colóquelo suavemente sobre su mesa de trabajo en ángulo recto con relación al
largo de la misma y alejado del borde, sin arrastrarlo.
c. Retire la funda, dóblela y guárdela bajo la mesa de trabajo.
d. Verifique el estado del estereoscopio y regístrelo en la hoja de control
correspondiente. Si nota alguna anomalía, notifíquesela a su instructor(a), para
que quede constancia de que el estereoscopio ya estaba así. De lo contrario, la
responsabilidad de dicha anomalía recaerá en su grupo de trabajo.
e. Asegúrese de que el estereoscopio esté apagado antes de conectar el cable de
electricidad. COLOQUE EL EXCESO DE CABLE SOBRE LA MESA, pues si lo
deja colgando corre el riesgo de tirar de él.
f. Asegúrese de que el objetivo seleccionado sea el de 2x.
g. Coloque un pequeño invertebrado o una flor pequeña sobre un vidrio de reloj, y
éste sobre la platina.
h. Encienda la luz más adecuada (transmitida o incidente) para ver la muestra, o
ambas.
i. Si usa anteojos, quíteselos.
j. Separe o aproxime los oculares de acuerdo con la distancia de sus ojos, hasta ver
una sola imagen. Conserve los dos ojos abiertos todo el tiempo.
k. Utilizando el tornillo de enfoque, logre una imagen clara.
l. Si tiene diferencia de agudeza visual entre los dos ojos, deberá hacer lo siguiente.
Como el ocular izquierdo está fijo, cierre el ojo derecho y observando con el
izquierdo, suba o baje el cabezal hasta enfocar bien. Luego, cierre el ojo izquierdo
y SIN TOCAR EL TORNILLO DEL CABEZAL, gire el AJUSTE DEL OCULAR
derecho hasta ver lo mejor posible.
m. Elija el objetivo siguiente (4x) y enfoque.
n. Esquematice lo observado y señale sus partes.
o. Describa lo observado.
p. En un vidrio de reloj, coloque arena y obsérvela por el estereoscopio. Esquematice
y describa.
q. Cuando termine de utilizar el estereoscopio, cumpla con todos los criterios
señalados en las hojas de revisión de estereoscopios.

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DÍA 2

4.4 Observación a través del estereoscopio y del microscopio

a. Tome un objeto que desee observar a través del estereoscopio. Enfóquelo

adecuadamente. Esquematice y describa en su hoja de esquemas y descripciones.
b. Tome un objeto que desee observar a través del microscopio (asegurándose que
tiene el tamaño adecuado). Enfóquelo adecuadamente. Esquematice y describa en
su hoja de esquemas y descripciones.

4.5 Evaluación del uso del microscopio

a. Su instructor(a) evaluará su habilidad para usar el microscopio, desde su

transporte hasta su almacenamiento.
b. Tome una lámina fija y límpiela suavemente con el papel limpia-lentes. No debe
colocar cubreobjetos en este tipo de láminas.
c. Colóquela en el microscopio.
d. Enfoque y observe con objetivo seco débil y seco fuerte.
e. Esquematice y describa en su hoja de esquemas y descripciones.

NOTA
Todos los esquemas realizados durante este taller, podrá llevárselos al finalizar el taller.

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1.

Figura 2. Estereoscopio (o microscopio estereoscópico o de disección).

(imagen tomada de:
http://www.cientificaschonfeld.com.ar/cienciaeducacion/index.php?option=com_content&task=view&id=126&Itemid=140)

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Figura 3. Microscopio óptico común.

(imagen tomada de http://personales.ya.com/geopal/g-b_1bach/ejercicios/act10tema6.htm)

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2. Referencias bibliográficas

Campbell, N.A. y Reece, J.B. (2007). Biología. España: Médica Panamericana.

Solomon, E.P., Berg, L.R. y Martin, D.W. (2008). Biology. Estados Unidos de América:
Thomson Brooks/Cole.

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