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Manual de Practicas de Botánica I

Bio. Javid Moisés Dovale Aguas

Práctica N° 1
Manejo Equipos
(Microscopios, Estereomicroscopios).
1. Introducción al manejo de equipos.

1.1 El Microscopio
El microscopio es un instrumento básico para el estudio de tejidos, organismos
microscópicos, y estructuras en la Biología, con esta herramienta de observación
podemos visualizar objetos o estructuras que son tan pequeños que no son visibles
a simple vista; sin esta herramienta de observación, no se habría obtenido la teoría
celular y no tendríamos el conocimiento sobre la existencia de los microorganismos
(bacterias, protozoos, algas), estos son tan pequeños que se supo de su existencia
hasta principios del siglo XVII cuando Robert Hooke observó por primera vez a los
hongos filamentosos, con un microscopio compuesto; las bacterias y los
protozoarios fueron vistos por primera vez por Anton van Leeuwenhoek en 1676 con
un microscopio simple [1]. (figura 1.1).

Figura 1.1. Microscopio óptico compuesto Tomado de tps://www.zeiss.com/microscopy/int/home.html

1.2 Sistemas en los microscopios


Existen dos sistemas que lo conforman las partes del microscopio (sistema óptico
y sistema mecánico)

1.2.1 Sistema óptico


Las partes ópticas son aquellas que se usan para generar y desviar la luz, siendo
esenciales para generar una imagen aumentada de la muestra. Las partes del
sistema óptico son las siguientes:
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• Lámpara: Genera una luz que va dirigida a la muestra.


• Condensador: Se encarga de concentrar los rayos de luz en la muestra.
• Diafragma: Regula la cantidad de luz que va a la muestra.
• Objetivo: Un conjunto de lentes que sirven para ampliar la imagen.
• Ocular: Amplía la imagen que ha sido ampliada por el objetivo.

1.2.2 Sistema Mecánico


Las partes mecánicas son todas aquellas que mantienen la estructura del invento,
permitiendo que todas las partes estén bien alineadas. Las partes del sistema
mecánico del microscopio óptico son las siguientes:
• Base o pie: Es la parte que se encuentra en la zona más inferior del
microscopio. Su función es que el microscopio se mantenga en pie,
soportando toda la estructura.
• Brazo: Es la parte que conecta todas las partes, siendo el esqueleto del
microscopio.
• Platina: Es una plataforma donde se coloca el elemento que se quiere
observar.
• Pinzas: Son dos pinzas que se usan para mantener sujeta la muestra que
está situada en la platina.
• Tornillo macrométrico: Se usa para ajustar la posición vertical de la
muestra, permitiendo desplazamientos amplios.
• Tornillo micrométrico: Se usa para conseguir un enfoque más preciso de
la muestra.
• Revólver: Sirve para cambiar fácilmente el objetivo usado para ver la
muestra.
• Tubo: Conecta el ocular y los objetivos.

1.3 Manejo del Microscopio.

1. Quitar su forro protector siguiendo los cuidados necesarios.


2. Coloca en un lugar adecuado a 10-15 cm del borde de la mase de trabajo el
microscopio
3. Colocar el objetivo de menor aumento, (4x) en el eje óptico moviendo el
revolver
4. Utilizando el tornillo macrométrico y observando lateralmente, acerca lo más
posible la platina al objetivo teniendo cuidado que no lleguen a tocarse.
5. Observa a través del ocular y trata de que todo el campo se vea iluminado,
esto se logra abriendo y cerrando el diafragma.
6. Colocación de la preparación (el portaobjeto con su muestra siempre cubierta
por su cubreobjeto).
7. Una vez iluminado el campo y utilizando el tornillo macrométrico, separa la
platina del objetivo lo suficiente para poder colocar el portaobjetos que
contiene la muestra a observar.
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8. Enfoque (10x) Utilizando el tornillo macrométrico y viendo lateralmente,


acerca el objetivo a la platina.
9. Afina el enfoque con el tornillo micrométrico hasta lograr una imagen nítida,
puedes mejorar la iluminación moviendo el condensador y el diafragma.
10. Enfoque a seco fuerte (40X) una vez afinada la imagen de (10X), centra en
el campo del microscopio la estructura que desea observar y viendo
lateralmente gira el revólver (sin mover el tornillo macrométrico) hasta colocar
en el eje óptico el objetivo (40x).
11. Observa a través del ocular y afina el enfoque con el tornillo micrométrico
exclusivamente.
12. Enfoque a inmersión (100X) agrega una gota de aceite de inmersión sobre la
preparación, con cuidado cambia el objetivo de inmersión (100x), enfocar la
preparación con el tornillo micrométrico.
13. Observa a través del ocular y afina la imagen moviendo exclusivamente el
tornillo micrométrico.
14. Después de utilizar el enfoque de (100X) limpiar cuidadosamente el objetivo
con papel de arroz.
15. Después de trabajar limpia y baja con cuidado la platina hasta una posición
media.
16. Baja la intensidad de los controles de luz LED.
17. Apagar el interruptor y luego desconectar.
18. Colocar el forro protector al microscopio.

1.4 Estereomicroscopio
Su nombre se debe a que la iluminación se hace directamente sobre el objeto que
se va a observar, permitiendo obtener una imagen estereoscópica (3D) de la
muestra. Se utiliza para observar objetos de tamaños relativamente grandes, por lo
que no es necesario utilizar diferentes objetivos, ni que la luz pase a través de la
muestra la cual se enfoca desde un par de centímetros entre está y el objetivo (figura
1.2).

La microscopía nos permite conocer cómo están formados los organismos. A


diferencia del microscopio óptico que se emplea regularmente para observar
organismos completos muy pequeños (bacterias, protozoos, hongos, ácaros, etc.)
o preparaciones fijas o frescas de un tejido u órgano; el estereomicroscopio se usa
para hacer disecciones de organismos de mayor tamaño o de sus partes, por lo que
es más empleado en botánica, mineralogía, medicina e incluso en la industria. [2].
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Figura 1.2. Estereomicroscopio Sremi 305 Tomado de tps://www.zeiss.com/microscopy/int/home.html

1.5 Sistemas en los Estereomicroscopios


Existen dos sistemas que lo conforman las partes del estereomicroscopio (sistema
óptico y sistema mecánico)

1.5.1 El sistema óptico


Está compuesto por los sistemas de espejos pata aumentar las muestras que se
analizan, asimismo este compuesto por el conjunto de luces LED, entre estos
componentes podemos mencionar:
• Lentes objetivos.
• Lentes oculares.
• Lampara LED de objetivos.
• Lampara LED de Plantina.
• Lampara LED de movimiento inclinado.

1.5.2 El sistema Mecánico


Este sistema se caracteriza por mantener al estereomicroscopio en su lugar y con
sus partes funcionando perfectamente y alineado para un mejor enfoque de las
muestras, entre estos componentes podemos mencionar:
• La Base.
• La plantina.
• Tornillo macrométrico.
• Zoom manual 5:1.
• El soporte.
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1.6 Manejo del Estereomicroscopio.


1. Quitar su forro protector siguiendo los cuidados necesarios.
2. Coloca en un lugar adecuado a 10-15 cm del borde de la mase de trabajo el
estereomicroscopio
3. Conecta directamente a la toma de corriente, y enciende la lámpara.
4. Sube los controles de luz LED para ir modulando la luz.
5. Toma la muestra que se encuentra dentro de la caja Petri y colócalo en el
centro de la plantina o placa de vidrio.
6. Mira a través de los oculares y sube lentamente el tubo usando el tornillo
macrométrico hasta enfocar la muestra.
7. Mira a través de los oculares y usando el zoom manual en sus posiciones
establecidas puedes alejar o acercar la imagen para mejor detalle.
8. Después de trabajar limpia la plantina y baja el tubo utilizando el tornillo
macrométrico hasta una posición media.
9. Baja la intensidad de los controles de luz LED.
10. Apagar el interruptor y luego desconectar.
11. Colocar el forro protector al estereomicroscopio.

2. Objetivo de la practica en el Laboratorio


✓ Identificar las diferentes partes del Microscopio óptico compuesto y
reconocer las funciones de cada una de ellas para su correcta manipulación
en el laboratorio.

✓ Identificar las diferentes partes del Estereomicroscopio y reconocer las


funciones de cada una de ellas para su correcta manipulación en el
laboratorio.

✓ Adquirir la habilidad en el uso y manejo de forma correcta de estos equipos


siguiendo las recomendaciones de las guías y del docente.

3. Materiales Equipos, Reactivos y Material Biológico.

Materiales, Equipos y Reactivos que serán suministrados en el laboratorio


Materiales y Equipos Reactivos

• Microscopio • Azul de Metileno


• Estereomicroscopio • Lugol
• Portaobjeto • Agua destilada.
• Cubreobjetos
• Pipeta
• Gotero
• Bisturí o Escalpelo
• Caja de Petri
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Material Biológico a cargo de los estudiantes


Material Biológico
• Hoja de Elodea.
• Tallo de margaritas.
• Corteza de Arboles (robles o acacias)
• Semilla de Frijol.
• Buldó de cebolla.
• Rosa china con polen. H. Rosa-sinensis

4. Parte experimental
4.1 Microscopio
Siguiendo los pasos del manejo del microscopio, enfoca las muestras y realiza un
esquema de lo observado con los aumentos de 10x, 20x y 40x; anotando las
estructuras que identifiques, así como su aumento.

Procedimientos montaje:
1. Realice cortes transversales y longitudinales de cada material biológico.
2. Realice un montaje de cada corte sin colorantes, observando en los
diferentes aumentos del microscopio en 10x, 20x, 40x e identifique el tipo de
tejido.
3. Realice un montaje de cada corte utilizando colorantes, observando en los
diferentes aumentos del microscopio en 10x, 20x, 40x e identifique el tipo de
tejido.
4. Haga un esquema organizado de lo que observo.
5. Dibuje los diferentes tejidos señalando sus partes.

Procedimientos colorantes:
Los colorantes se utilizarán de la siguiente manera:
• Colorear la muestra por 5min.
• Lavar con abundante agua para quitar el exceso de colorantes.
• Si el montaje lleva dos coloraciones aplique el segundo colorante por 5min
• Nuevamente lavar con abundante agua.
• Colocar cubreobjeto y observar.

4.2 Estereomicroscopio
Siguiendo los pasos del manejo del estereomicroscopio, enfoca las muestras con el
tornillo macrométrico y realiza un esquema de lo observado con los Zoom de mayor
acercamiento anota las estructuras que identifiques.

Procedimientos montaje:
1. Realice un montaje observando en los diferentes aumentos del zoom manual
en 0.8x, 4.0x e identifique la estructura de la muestra biológica.
2. Haga un esquema organizado de lo que observo.
3. Dibuje los diferentes tejidos señalando sus partes.
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5. Desarrollo de la parte Experimental

Universidad de Cartagena
Programa de Biología
Asignatura de Botánica I

Fecha: ______________ Grupo de Laboratorio N°__________________

Integrantes: _______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________

Informe N° 1
Manejo Equipos (Microscopios, Estereomicroscopios).

5.1 Cuestionario
Las respuestas a las preguntas del cuestionario las pueden traer realizadas con anterioridad a este informe, o
desarrollarlas el día de la práctica.
1. ¿Cuál es la función y cómo están compuestos los lentes objetivos lupa 4x?

2. ¿Cuál es la función y cómo están compuestos los lentes objetivos seco


débil 10x y 20x?

3. ¿Cuál es la función y cómo están compuestos los lentes objetivos seco


fuerte 40x?

4. ¿Cuál es la función y cómo están compuestos los lentes objetivos


inmersión 100x?

5. Explica brevemente el uso del estereomicroscopio en el área de la


botánica.
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6. Basándote en las diferencias estructurales de los microscopios utilizados


(compuestos y estereomicroscopios), marca con una X las partes presentes en
cada microscopio según sea su caso.

5.2 Microscopio
Siguiendo los pasos del manejo del microscopio, enfoca las muestras, realiza una
descripción de lo observado y dibuja las muestras en 10x y 40x anotando las
estructuras que identifiques.

Nota: en la descripción de la observación tendrán que mencionar cualidades como (colores particulares de sus
estructuras, textura, tamaño aproximado, tipo de células, tipo de tejidos, organelas visibles)
Muestra Aumento de 10x Aumento de 40x
Descripción de la Observación
Elodea:

Polen:
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Cebolla Allium cepa

Corteza de Árbol: ________

5.3 Estereomicroscopio
Siguiendo los pasos del manejo del estereomicroscopio, enfoca las muestras,
realiza una descripción de lo observado y dibuja las muestras en Zoom 1,0x y 4,0x
anotando las estructuras que identifiques.

Muestra Zoom de 1.0x Zoom de 4.0x


Descripción de la
Observación
Rosa china sacos polínicos:
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Rosa china Ovarios y óvulos:

Semilla de Frijol “Embrión”

Tallo de Margarita:

6. Bibliografía
1. Elena de Erice Arturo González (2009),“Biología la ciencia de la vida”;
Editorial Mac Graw Hill; México DF
2. Campbell, Neil (2001), “Biología conceptos y relaciones”; Editorial Pearson
Educación 3era Edición; México
3. Gray, P. (2001). Instrucciones de manejo. Axiostar plus. Microscopio de luz
transmitida y Fl.
4. Gray, P. (2019). Stereomicoscopes. Stemi DV4. Operation Manual. Carl
Zeiss Ligth Microscopy. Gottingen, Germany

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