Lucía Morales Martín IES Martínez Uribarri

2º Laboratorio Clínico y Biomédico Curso 2023-2024

DIARIO DE TRABAJO LABORATORIO DE

MICROBIOLOGÍA CLÍNICA
15/01/2024

Hemos realizado una tinción de Gram para identificar una colonia crecida en un agar
nutritivo, el cual, debería haber sido una Escherichia coli pero al estar contaminado, el
resultado ha sido la visualización de estafilococos Gram +.

También hemos realizado una tinción de azul de lactofenol con cubreobjetos para
identificar una colonia de hongos cultivados en agar CLED. El aspecto a nivel macroscópico
de la colonia es blanca y con textura algodonosa. A nivel microscópico se observa alguna
hifa pero apenas se veía algo. (Se realizó la tinción con cubreobjetos y también con celo)

Posteriormente hemos sembrado esta muestra (hongo) en un agar Sabouraud-

Cloranfenicol pero el agar estaba caducado y la solidificación no fue correcta. De todas
formas decidimos sembrarlo como pudimos para ver si crecía el hongo.

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2º Laboratorio Clínico y Biomédico Curso 2023-2024

17/01/2024

Realizamos una tinción de azul de lactofenol en un hongo de otra placa diferente a la del
día anterior (Placa 23/11/2023 Nº4). No ha sido posible visualizar, debido a que el hongo
estaba muy compacto y la cantidad que se adhirió al celo y la cantidad que se pudo coger
para visualización con cubreobjetos fue mínima.

Posteriormente sembramos este hongo en un agar EMB (eosina-azul de metileno).

Cogimos otra placa con otro hongo (29/11/2023 agar CLED) e intentamos sembrarlo en otra
placa con agar Sabouraud-Cloranfenicol pero tampoco solidificó correctamente el agar.

Por último, cogimos una muestra de mi piercing de la nariz y otra muestra de la alfombra de
la entrada del instituto y ambas las sembramos cada una en un agar nutritivo para que
pudiera crecer todo lo que habíamos recogido y las llevamos a incubar a la estufa a 37ºC

18/01/2024

Visualicé los resultados del crecimiento en agar nutritivo en ambas placas

• Muestra piercing: Apenas se veían colonias tras las 24 horas, eran pequeñas y de
color blanco
• Muestra alfombra: Crecimiento de un hongo algodonoso, color blanco y colonias
pequeñas y blancas de bacterias

En la tinción de Gram de las colonias del agar con la muestra de la alfombra se observaron
Cocos Gram Negativos (estafilococos)

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En la tinción de Gram de las colonias del agar con la muestra del piercing se observaron
Cocos Gram Positivos (estafilococos)

El hongo lo dejé que creciera para visualizarlo días después ya que su crecimiento es más
lento.

22/01/2024

Se realizó otra tinción de Gram en la colonia del agar con la muestra de la alfombra (hoy se
observaban estafilococos Gram+ y Gram-)

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Lucía Morales Martín IES Martínez Uribarri
2º Laboratorio Clínico y Biomédico Curso 2023-2024

A parte se hicieron las pruebas de la catalasa y oxidasa en las colonias de la muestra de la

alfombra y del piercing.

Los resultados fueron:

• Muestra piercing: Catalasa+ y oxidasa-

• Muestra alfombra: Catalasa+ y oxidasa-

Para realizar una identificación más segura, decidimos apuntar los tipos de agares que se
debían hacer para el día 24

En cuanto al hongo, se realizó una tinción de azul de lactofenol con cinta adhesiva y se
observaron hifas segmentadas y un amontonamiento de esporas.

24/01/2024

Hemos elaborado los agares correspondientes para la identificación de Cocos Gram+ y

alguno Gram-. En concreto se realizó Agar DNAsa (0,5 L), Agar manitol salado (0,5 L),
Muller-Hilton (menos cantidad ya que poca gente iba a realizar las pruebas con los
antibióticos)

Los metimos en el autoclave para esterilizarlos, y mientras estuvimos observando

bacterias y hongos bajo el microscopio. Cuando terminó la esterilización pusimos en
marcha la campana de bioseguridad, y los mecheros Bunsen para crear una zona segura y
evitar la contaminación de las placas. Antes de todo, se marcaron las placas por la parte
trasera y se prepararon para echar el medio de cultivo. Dejamos solidificar los agares a
temperatura ambiente.

Después de todo el procedimiento de elaboración de los medios de cultivo. Cogí una placa
de agar DNAasa y otra placa con agar Manitol Salado en las cuales sembramos una colonia
pequeña y blanca.

En el agar DNAsa se siembra una línea en el centro para que al día siguiente al echar el HCl
1N se pueda observar el halo transparente alrededor

En el agar Manitol salado se realizó una siembra en césped para al día siguiente observar si
nuestras bacterias han fermentado o no

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2º Laboratorio Clínico y Biomédico Curso 2023-2024

25/01/2024

Comprobamos las pruebas de los agares realizados, el agar manitol salado ha sido
fermentado (viraje de color de rojo a amarillo) por los estafilococos.

Sin embargo, la prueba de la DNAsa ha dado negativa. Así que nos hace suponer que las
bacterias que han fermentado el manitol, son otras cepas del Staphylococcus epidermidis
que pertenecen a un subgrupo específico de esta especie

Si las pruebas del manitol y DNAsa hubieran sido ambas positivas sería más probable que
estuviéramos trabajando con un Staphylococcus aureus.

A parte en el agar DNAsa se ha observado la presencia de otras colonias alrededor de la

siembra que se hizo, esto significa que ha habido contaminación. Para identificar que
contaminación era se hizo una tinción de Gram, y el resultado fueron estafilococos Gram+,
seguramente haya sido por dejar las placas abiertas mientras solidificaban aunque
estuviera el mechero Bunsen encendido (por el paso de la gente). Después de observar la
contaminación, se añadió el ácido clorhídrico 1N para terminar de realizar la prueba. No se
observó ningún halo.

En conclusión, es una cepa de Staphylococcus epidermidis capaz de fermentar el manitol

pero no de usar la enzima DNAsa. A partir de aquí, se debería de identificar que tipo de
subgrupo específico es.