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INVESTIGACIÓN BÁSICA – TECNOLOGÍA

El efecto del protocolo de activación


Anastasios Retsas, DDS, MSc,*
Ren-e JB Dijkstra, Ing,†

del irrigante ultrasónico en la


Luc van der Sluis, doctor en medicina, doctorado,†

y Christos Boutsioukis, DDS,


MSc, PhD*
eliminación de una biopelícula de
doble especie de canales laterales
artificiales

ABSTRACTO
SIGNIFICADO
Introducción:Los canales laterales son particularmente difíciles de limpiar y desinfectar. El objetivo de este estudio
fue comparar la eficacia de eliminación de una biopelícula de doble especie de un modelo de canal lateral Los canales laterales son particularmente
mediante diferentes protocolos de activación de irrigante ultrasónico.in vitro.Métodos:Se fabricaron modelos de difíciles de desinfectar. La irrigación con
conductos radiculares artificiales con 270 conductos laterales simulados de polidimetilsiloxano. Una biopelícula de NaOCl y tres ciclos de activación
doble especie (Estreptococo oralyActinomyces naeslundi)fue crecidoin vitroen los canales laterales utilizando un ultrasónica pueden mejorar la
fermentador de película de profundidad constante. Se administró NaOCl al dos por ciento o agua desmineralizada eliminación de biopelículas de los canales
mediante una jeringa y una aguja de extremo abierto durante 30 segundos y posteriormente se activó mediante laterales.
una lima ultrasónica durante un tiempo de activación total de 30, 60 o 90 segundos divididos en 1 o 3 ciclos de
activación consecutivos. En los grupos de control, se permitió que el irrigante reposara durante 30, 60 o 90
segundos. El volumen de la biopelícula en el canal lateral se evaluó antes y después del protocolo de irrigación
final mediante tomografía de coherencia óptica. Los resultados se analizaron mediante análisis de varianza
factorial de 3 vías (a50,05).Resultados:La irrigación con NaOCl en lugar de agua desmineralizada resultó en una
eliminación más efectiva de la biopelícula del canal lateral.PAG, .001). Tres ciclos de activación ultrasónica
intermitente fueron significativamente más efectivos que ninguna activación (PAG5 .029). El tiempo total de
contacto del irrigante no afectó la eliminación de biopelículas (PAG5 .403). Conclusiones:El tipo de irrigante y el
protocolo de activación ultrasónica afectaron la eliminación de biopelículas de los canales laterales artificiales.
Ninguno de los protocolos comparados logró erradicar la biopelícula. (J Endod 2022;48:775–780.)

PALABRAS CLAVE
Del *Departamento de Endodoncia, Centro
Biopelícula; canal lateral; La tomografía de coherencia óptica; activación del irrigante ultrasónico Académico de Odontología
Amsterdam (ACTA), Universidad de
Amsterdam y Vrije Universiteit
Amsterdam, Amsterdam, Países Bajos; y†
La eliminación de bacterias de un sistema de conductos radiculares infectado es uno de los principales objetivos del tratamiento de Centro de Odontología e Higiene Bucal,
conductos.1. La irrigación con soluciones antimicrobianas se considera actualmente el principal medio de desinfección del conducto
Centro Médico Universitario de
Groningen, Universidad de Groningen,
radicular.2. Los irrigantes suelen administrarse mediante una jeringa y una aguja.3, pero esta técnica no puede crear un flujo adecuado
Groningen, Países Bajos
dentro de áreas estrechas como canales laterales e istmos4,5. Como resultado, una cantidad considerable de biopelícula intacta puede
Dirija las solicitudes de reimpresiones al Dr.
permanecer allí después de la preparación quimiomecánica.6,7. La infección persistente por biopelículas en los conductos laterales se
Christos Boutsioukis, Departamento de
ha implicado en el fracaso del tratamiento de conducto8. Endodoncia, Centro Académico de Odontología
Se han propuesto numerosos métodos de agitación y activación del irrigante para mejorar la limpieza y desinfección de las de Ámsterdam (ACTA), Universidad de
ramificaciones del canal, siendo la activación ultrasónica la más popular.3. Actualmente se utilizan una amplia variedad de protocolos Ámsterdam y Vrije Universiteit.
Ámsterdam, Gustav Mahlerlaan 3004, 1081
de activación ultrasónica sin ningún consenso sobre cuál es el más eficaz.9. La activación repetida de NaOCl durante períodos cortos
LA, Ámsterdam, Países Bajos. Dirección de
conduce a una eliminación más eficaz de los restos de dentina de los surcos artificialesin vitroque un único período de activación largo
correo electrónico:c.boutsioukis@acta.nl
10-12. Sin embargo, es probable que la eliminación de restos de dentina mediante NaOCl activado sea un proceso predominantemente 0099-2399
mecánico, por lo que el consumo del cloro libre disponible, que puede afectar la eliminación de la biopelícula13, no fue tenido en
Copyright © 2022 Los Autores. Publicado por
cuenta. Además, una biopelícula viscoelástica firmemente adherida a la dentina14puede reaccionar de manera diferente a la presión Elsevier Inc. en nombre de la Asociación
oscilante y al esfuerzo cortante durante la activación15en comparación con los restos de dentina más rígidos pero menos firmemente Estadounidense de Endodoncistas. Este es un
adheridos. Por tanto, los protocolos de activación que promueven la eliminación de restos de dentina pueden no ser tan eficaces artículo de acceso abierto bajo licencia CC BY (
http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).
contra la biopelícula.
Una densa biopelícula de doble especie (Estreptococo oralyActinomyces naeslundii)cultivado en istmos artificiales https://doi.org/10.1016/
transparentes y canales laterales utilizando un fermentador de película de profundidad constante (CDFF) ha sido j.joen.2022.03.005

JOSÉ-Volumen 48, Número 6, Junio 2022 Efecto antibiofilm de los protocolos de activación ultrasónica 775
utilizado anteriormente para evaluar el rendimiento de naeslundiSe usó T14V-J1 para inocular 10 ml de caldo (Ganymede II; Thorlabs, Newton, Nueva Jersey, EE. UU.)
varios irrigantes y métodos de riego de infusión cerebro-corazón modificado (BHI; Oxoid con un haz de luz blanca de longitud de onda central
in vitro16-18. Esta biopelícula tiene propiedades Ltd, Basingstoke, Reino Unido), que se cultivó a 37-C de 930 nm utilizando un sensor de 5 ! 5 ! Campo de
viscoelásticas realistas.19y se asemeja a una biopelícula durante 24 horas en aire ambiente. (S. oralis)o en visión de 1,34 mm (1000 ! 1000 ! 500 píxeles) y un índice
natural del conducto radicular rica en células formada condiciones anaeróbicas de refracción de 1,33 para la biopelícula. La frecuencia
bajo limitaciones de espacio14,20–22. Además, ni la (A. naeslundii).Estos precultivos se utilizaron para de imagen fue de 30 kHz con una sensibilidad de 101
irrigación con jeringa ni la activación ultrasónica inocular 200 mL de BHI modificado, el cual se dB. Los escaneos se procesaron inicialmente con el
consiguen eliminar este biofilm de los canales laterales incubó a 37-C durante 16 horas. Las bacterias se software ThorImage OCT 5.5 (Thorlabs) y luego se
artificiales.16-18, por lo que podría servir como un recogieron mediante centrifugación (6500 µg) y se exportaron a Fiji 1,50 g.25como imágenes de 8 bits para
desafío adecuado al comparar diferentes protocolos de lavaron dos veces en tampón de adhesión estéril calcular el volumen del canal lateral que estaba
activación ultrasónica.En el lugar La evaluación (0,147 g/l CaCl2, 0,174 g/LK2HPO4, 0,136 g/L KH2 ocupado por la biopelícula luego de una segmentación
tridimensional del volumen de la biopelícula antes y correos4, 3,728 g/l de KCl, pH 6,8). La suspensión se automática independiente del observador. No se hizo
después de la irrigación mediante tomografía de sonicó intermitentemente en agua helada (3 x 10 s) ningún intento de distinguir entre las bacterias y la
coherencia óptica (OCT) podría explicar la inevitable para romper las cadenas bacterianas. Luego se sustancia polimérica extracelular.
variabilidad en su volumen incluso cuando se cultiva.in contaron las bacterias en un Bu
vitrobajo condiciones estrictamente controladas14,21-23. €rker-tu€cámara rk (Marienfeld-Superior,
Lauda-Ko€nigshofen, Alemania) y diluido en
Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue tampón de adhesión estéril. Experimentos de activación de irrigantes
comparar la eficacia de eliminación de una biopelícula Se recolectó saliva entera humana estimulada Los experimentos siguieron un 2 ! 3 ! Diseño 3
de doble especie de un modelo de canal lateral de voluntarios de acuerdo con los lineamientos del factoriales. Las inserciones de PDMS se asignaron
artificial mediante NaOCl o agua desmineralizada Comité de Ética Institucional (carta de aprobación aleatoriamente (www.randomizer.org) a 18 grupos (
activada ultrasónicamente según diferentes 02-06-2009). La saliva recolectada se reunió, se norte515) que fueron regados con NaOCl o con agua
protocolos. centrifugó para eliminar partículas de comida y células, desmineralizada por el mismo operador. La activación
se estabilizó agregando un bloqueador de proteasa y ultrasónica se realizó durante un tiempo total de 30, 60
se liofilizó para su almacenamiento. Inmediatamente o 90 segundos divididos en 1 o 3 ciclos. Tres grupos de
MATERIALES Y MÉTODOS
antes de su uso, la saliva liofilizada se disolvió en control adicionales por irrigante no recibieron
Estimación del tamaño de la muestra tampón de adhesión (1,5 g/l), se agitó durante 2 horas activación (0 ciclos), pero en cambio se permitió que el
Se realizó una estimación del tamaño de la y se centrifugó (10.000 µg a 10-C) durante 5 minutos irrigante descansara durante 30, 60 o
muestra.a prioriusando G*Power 3.1.924, para crear saliva entera humana reconstituida (RWS).
suponiendo un análisis factorial de varianza de Se pipeteó RWS en cada inserto de PDMS y se dejó sin 90 segundos (tabla 1).
tres factores (F50,25;a50,05; fuerza590%). El alterar durante 14 horas a temperatura ambiente. Se preparó recientemente una solución de
tamaño de muestra mínimo calculado de 14 NaOCl al 2% a partir de una solución madre del 12% al
muestras de biopelícula por grupo se aumentó a El CDFF junto con los insertos y los medios de 15% (Sigma-Aldrich, St. Louis, MI, EE. UU.). La
15 para compensar cualquier incertidumbre en cultivo se esterilizaron en autoclave durante 30 concentración se verificó mediante titulación
estas suposiciones. minutos a 121-C. Posteriormente, se cargaron los yodométrica. Se utilizó agua desmineralizada estéril
insertos de PDMS recubiertos con RWS en el plato como control para estudiar el efecto de limpieza
Sistemas de conductos radiculares artificiales giratorio del CDFF y se inoculó gota a gota con 100 ml mecánica pura de la activación ultrasónica. El irrigante
Se fabricaron cincuenta y cuatro conductos radiculares de la bacteria de doble especie. se administró en cada muestra utilizando una jeringa
artificiales transparentes (tamaño apical 35/cono 06, 18 mm suspensión (S. oralis6 ! 108bacterias/mL y de 12 ml (Terumo Europe, Lovaina, Bélgica) y una aguja
de largo, sistema apicalmente cerrado) con rebajes A. naeslundii2 ! 108bacterias/ml) se llevó a cabo durante de punta abierta de 30 G (Navitip; Ultradent Products
cilíndricos adecuados a partir de 1 hora mientras el plato giratorio giraba lentamente. A Inc, South Jordan, UT, EE. UU.) insertada a 2 mm del
polidimetilsiloxano (PDMS; Sylgard 184; Dow-Corning, continuación, se detuvo la rotación y se permitió que extremo apical de la raíz. canal a un caudal de 0,2 ml/s.
Midland, MI, EE. UU.) como se describió anteriormente las bacterias se adhirieran a los insertos durante 30 El caudal se controló manualmente mediante un
18. Se utilizaron moldes cilíndricos con pasadores minutos. Luego se reanudó la rotación y se suministró temporizador. Dependiendo del grupo, el parto se
metálicos delgados para crear 270 insertos PDMS con continuamente BHI modificado (45 ml/h) para permitir realizó durante 1,30 segundos (antes del período de
canales laterales cerrados simulados. (d50,25 que las biopelículas se desarrollaran durante las descanso en los grupos de control o antes del ciclo de
milímetros,yo51,5 milímetros, siguientes 96 horas a 37-C. Las palas raspadoras fijas activación único) o
volumen50,075 milímetros3) que encajaba en el hueco del CDFF aplicaron la presión necesaria para la
cilíndrico de los modelos de conducto radicular (Figura compresión mecánica de la biopelícula y también 3!10 segundos (antes de cada uno de los 3 ciclos de
1). Se vertió PDMS desgasificado en los moldes y se distribuyeron nutrientes sobre los insertos. activación). El volumen total de irrigante administrado fue
dejó curar durante 24 horas a temperatura ambiente de 6 ml en todos los grupos.
para evitar el atrapamiento de burbujas. Cuando se Los insertos rellenos de biopelícula se almacenaron La activación ultrasónica se realizó utilizando
ensamblaron los modelos, la entrada del conducto dentro de un frasco que contenía tampón de adhesión hasta un cono de tamaño 20/.00 y una lima Irrisafe de 21 mm
lateral se ubicó a 2 mm del extremo apical del conducto su uso para evitar la deshidratación y solo se colocaron en el (Acteon Satelec, Merignac, Francia) conectada a un
radicular principal. hueco cilíndrico del conducto radicular artificial dispositivo de ultrasonido (P5 Newtron XS, Acteon
inmediatamente antes de los experimentos. Se aseguró un Satelec). La configuración de potencia fue 9/20 (45%)26,
ajuste hermético. la lima se colocó a 2 mm del extremo apical del
Formación de biopelículas conducto radicular y la pieza de mano se estabilizó
Se cultivó una biopelícula de doble especie densa y rica en células utilizando un soporte personalizado para garantizar
en estado estacionario en los canales laterales artificiales La tomografía de coherencia óptica una dirección de oscilación estándar hacia el conducto
utilizando un CDFF, de manera similar a estudios anteriores.dieciséis, La biopelícula fue escaneada en tres dimensiones mediante lateral. En los grupos de control, la lima ultrasónica se
18. Una sola colonia de cualquiera de los dos.S. oralisJ22 oA. un escáner OCT de dominio espectral. insertó en el

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FIGURA 1 -Dibujo esquemático del modelo de conducto radicular y el inserto PDMS con el conducto lateral artificial. PDMS, polidimetilsiloxano.

conducto radicular, pero no se produjo ninguna activación para calcular el porcentaje de biopelícula eliminada de Los ciclos de activación y el tiempo total de contacto
(período de descanso). Se utilizó una nueva lima y un nuevo cada canal lateral. El efecto del tipo de irrigante, el con el irrigante no tienen un efecto significativo sobre
modelo de conducto radicular cada 5 muestras de conducto número de ciclos de activación y el tiempo total de el porcentaje de biopelícula que se eliminó. Para las
lateral. La biopelícula que quedó en los canales laterales después contacto con el irrigante se analizaron mediante comparaciones por pares se empleó la prueba post hoc
de la irrigación se escaneó nuevamente mediante OCT. análisis de varianza factorial de 3 vías. La normalidad se de diferencias honestamente significativas de Tukey. El
evaluó en gráficos QQ y la igualdad de las varianzas del nivel alfa se fijó en 0,05. A este nivel se le aplicó la

Análisis estadístico error se evaluó mediante la prueba de Levene. La corrección de Bonferroni para comparaciones

La diferencia en el volumen de biopelícula antes y hipótesis nula fue que el tipo de irrigante, el número de múltiples, cuando correspondía. El análisis estadístico

después del riego se dividió con el volumen inicial. se realizó utilizando SPSS 27 (IBM Corp, Armonk, NY).

TABLA 1 -Descripción general de los protocolos de activación ultrasónica y de administración de jeringas utilizados en los grupos experimental y de

control
RESULTADOS

Jeringuilla Ultrasónico Descansar Activación total irrigante total El volumen medio inicial de biopelícula fue de 0,042 mm.3
Grupo entrega(s) activación(es) tiempo(s) tiempo(s) tiempo de contacto (s) (Desviación Estándar50,009 milímetros3), por lo que
Experimental 1 ! 30 1 ! 30 — 30 60 aproximadamente el 57% del canal lateral estaba
3 ! 10 3 ! 10 — 30 60 ocupado en promedio. El riego resultó en una
1 ! 30 1 ! 60 — 60 90 disminución media del 10,34% (desviación estándar 5
3 ! 10 3 ! 20 — 60 90 8,74%) en el volumen de biopelícula, pero no se logró la
1 ! 30 1 ! 90 — 90 120 eliminación total en ninguna de las muestras (Figura 2).
3 ! 10 3 ! 30 — 90 120
Ninguna de las interacciones entre las variables
Control 1 ! 30 — 30 0 60
independientes fue significativa (PAG . .4), por lo que se
1 ! 30 — 60 0 90
interpretaron los efectos principales. NaOCl redujo
1 ! 30 — 90 0 120
significativamente la cantidad de biopelícula en
Todos los experimentos se realizaron por duplicado utilizando NaOCl o agua desmineralizada como irrigante. comparación con el desmineralizado

JOSÉ-Volumen 48, Número 6, Junio 2022 Efecto antibiofilm de los protocolos de activación ultrasónica 777
FIGURA 2 -Biopelícula eliminada de los canales laterales artificiales tras la activación ultrasónica de NaOCl o agua desmineralizada. La eliminación se expresa como el porcentaje promedio del volumen inicial de
biopelícula. Los resultados se organizan según el tiempo total de activación/descanso y el número de ciclos de activación.Barras de errorindicar la desviación estándar.

agua (PAG , .001; Intervalo de confianza del 95%: gradiente de concentración favorable que impulsa la debe probarse en estudios futuros, pero debe tenerse en
4,30%–8,20%). El número de ciclos de activación difusión de moléculas e iones hacia el canal lateral4, cuenta que la activación prolongada también puede
también tuvo un efecto significativo en el porcentaje de donde podrían reaccionar con la biopelícula. provocar la eliminación inadvertida de más dentina.33.
biopelícula que se eliminó. (PAG5 .026). Las Estudios anteriores han demostrado que la En condiciones ideales, el flujo de irrigación
comparaciones post hoc indicaron que tres ciclos de activación del irrigante ultrasónico puede mejorar la puede penetrar el canal lateral hasta una distancia del
activación fueron más efectivos que ninguna activación eliminación de restos de tejido pulpar, restos de dentina o doble de su diámetro antes de que la difusión se
(PAG5 .029; Intervalo de confianza del 95%: 0,26%– biopelículas de los canales laterales u otras ramificaciones convierta en el proceso de transporte dominante.4. Esta
6,03%). No se encontraron diferencias significativas artificiales.in vitro17,30–32. En el presente estudio se encontró distancia corresponde a un tercio de la longitud del
entre ninguna activación y un ciclo de activación (PAG una diferencia significativa en la eliminación de biopelículas canal lateral utilizado en el presente estudio, pero la
5 .097) o entre tres ciclos de activación y un ciclo de de un canal lateral cuando biopelícula no se eliminó consistentemente de esta
activación (PAG5 .874). El efecto del tiempo total de comparando 3 ciclos de activación con ninguna activación, área. Es probable que la biopelícula creara un
contacto con el irrigante no fue significativo (PAG5 . mientras que no se encontró diferencia entre un solo ciclo obstáculo físico adicional para el flujo que no se tuvo
403). de activación y ninguna activación, cuando el tiempo total en cuenta en los cálculos anteriores.4. Además, aunque
de contacto con el irrigante se mantuvo constante. Estos el patrón de flujo de irrigación dentro de los canales
hallazgos coincidieron con informes anteriores sobre la laterales vacíos parece correlacionarse bien con la
DISCUSIÓN eliminación de restos de dentina.10-12. La principal ventaja eliminación de biopelículasin vitro18, la mera
Los conductos laterales en el tercio medio y apical de la raíz de la activación intermitente durante periodos cortos frente penetración del irrigante puede no ser suficiente para
son particularmente difíciles de limpiar y desinfectar a la activación continua durante un periodo más largo se ha lograr la eliminación total del biofilm.
durante el tratamiento no quirúrgico.6–8,20, por lo que son atribuido al intenso streaming que se produce durante la La corrientein vitroEl modelo tiene algunas
indispensables métodos de activación de irrigantes que fase de arranque. (fiprimeros 50 ms) de activación12. limitaciones que deben tenerse en cuenta. Los
sean capaces de llegar a estas zonas.5. El objetivo de este conductos radiculares artificiales se fabricaron con
estudio fue determinar el protocolo de activación El tiempo total de contacto del irrigante no afectó la PDMS para garantizar la precisión dimensional.18y
ultrasónica óptimo para la eliminación de biopelículas de un eliminación de biopelículas en este modelo. Dado que el permitir mediciones de alta resolución del volumen de
canal lateral.in vitro,un tema que no había sido abordado en tiempo de contacto juega un papel crítico tanto en la biopelícula mediante OCT. Aunque la biopelícula puede
la literatura. Los hallazgos reafirmaron la importancia del difusión4y las reacciones químicas que tienen lugar29, este adherirse al PDMS y resistirse a la eliminación
NaOCl y los múltiples ciclos de activación para este proceso. hallazgo parecía contradecir la importancia del efecto mediante una variedad de métodos de irrigación16-18,34–
químico del NaOCl. Se podría plantear la hipótesis de que 36, aún no está claro si la adhesión al PDMS es similar a
Una gran parte de la eliminación de los tiempos de contacto examinados en el presente estudio la adhesión de una biopelícula real del conducto
biopelículas observada se atribuyó al efecto químico (60-120 s) no fueron lo suficientemente largos como para radicular sobre la dentina.en vivo.Debido a dificultades
disruptivo del NaOCl.27, que parecía ser más tener un efecto notable sobre la difusión o las reacciones técnicas, la longitud y el diámetro de los canales
importante que el efecto de limpieza mecánica pura de químicas, dada la limitada superficie de contacto entre el laterales simulados estaban dentro de los rangos de los
la activación ultrasónica que se demostró en los grupos irrigante y la biopelícula en el lateral. canal. Un estudio canales laterales reales pero cerca de sus límites
regados con agua desmineralizada. Sin embargo, es anterior indicó que la alteración química de la biopelícula in superiores.37,38. Las condiciones pueden ser
probable que la activación ultrasónica también haya vitropor NaOCl que se difunde a través de una pequeña ligeramente diferentes en canales más pequeños.
podido mejorar el efecto químico del NaOCl.28,29. La superficie de contacto se hizo perceptible sólo después de También se debe enfatizar que el efecto químico del
agitación del NaOCl en el canal principal podría haber un tiempo prolongado (300 s)21. Tiempos de contacto más NaOCl puede haber sido sobreestimado debido a la
mantenido un largos ausencia de dentina y a la dentina acumulada.

778 Retsas et al. JOSÉ-Volumen 48, Número 6, Junio 2022


escombros que podrían haber consumido sustancia polimérica. La microscopía de barrido láser CONCLUSIONES
parcialmente el cloro disponible13o impidió el confocal combinada con tinción fluorescente de la
La irrigación con NaOCl en lugar de agua desmineralizada y
acceso de los irrigantes al biofilm39. En los biopelícula podría haber proporcionado dicha
3 ciclos de activación ultrasónica intermitente en lugar de
experimentos no se utilizó ácido información sobre la biopelícula que queda después de
ninguna activación dieron como resultado la eliminación de
etilendiaminotetraacético para reducir el número la irrigación.23, pero no habría podido determinar el
una cantidad significativamente mayor de biopelícula del
de factores de confusión, aunque puede estado inicial del biofilm en cada ejemplar antes del
canal lateral simulado. El tiempo total de contacto con el
desestabilizar la matriz de la biopelícula.14, por lo riego. Estudios anteriores han validado el uso de OCT
irrigante no afectó la eliminación de biopelículas. Ninguno
que podría haber facilitado la eliminación del para la evaluación de una biopelícula similar rica en
de los protocolos probados logró erradicar la biopelícula.
biofilm durante el riego posterior con NaOCl. células de especies duales en comparación con la
OCT es un método no invasivo para microscopía de barrido láser confocal.14,21,22. También
cuantificar la eliminación de biopelículas en tres se ha sugerido que el resultado preferible en el
dimensiones que permite mediciones repetidas en tratamiento de conducto radicular es la eliminación de
las mismas muestras antes y después de la biopelículas en lugar de la destrucción de bacterias, EXPRESIONES DE GRATITUD
irrigación para tener en cuenta la variación debido a que diversas bacterias
Los autores niegan cualquier conflicto de intereses
inevitable en el volumen inicial de biopelícula. Sin
relacionado con este estudio.
embargo, no puede distinguir entre bacterias vivas Los componentes aún pueden inducir inflamación periapical

y muertas o entre bacterias y extracelulares. incluso después de que se matan las bacterias.23.

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780 Retsas et al. JOSÉ-Volumen 48, Número 6, Junio 2022

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