Tema 9: cultivos

celulares
1 ¿Por qué estudiar
los cromosomas?

2
Obtención de muestras

3
Técnicas de sacrificio

4 Métodos de tinción
y bandeado

5
Eliminación de la tinción

6
Ordenación de los cromosomas
¿Por qué estudiar los cromosomas?
Detectar anomalías cromosómicas
Anomalías congénitas Alteración en el desarrollo psicomotor

Alteración en el desarrollo sexual infertilidad

obtención de cromosomas
obtención de cromosomas- TIPOS DE MUESTRA
biopsia de vellosidades coriónicas
Venopunción
Amniocentesis

líquido amniótico
obtención de cromosomas- Procesado muestra
S e m b ra r p o
r
d u p lic a d o y
de
m a n e ra
in d e p e n d ie
n te p a ra
e v i ta r c o n ta
m i n a c ió n y
p é rd id a d e m
a te r i a l d e
e s tu d i o

Hay que controlar la osmolaridad, el pH, la temperatura, la

viscosidad, la tensión superficial y el tiempo de incubación
obtención de cromosomas- Procesado muestra
Todo lo necesario para que nuestras células crezcan

Factores de
Sales
crecimiento
Aminoácidos esenciales
Antibióticos
Vitaminas
Fungicidas
Glucosa
Mitógenos
Coenzimas
(fitohemaglutinina)
Hormonas
Suero
técnicas de sacrificio celular
Detención de la mitosis en metafase

30', 37º

1500 rpm
5-10'
técnicas de recogida, procesado y extensión

KCl

Centrifugar y resuspender ---> Fijación

técnicas de recogida, procesado y extensión

x3
técnicas de recogida, procesado y extensión

Se deja gotear la
suspensión para que las
células se rompan y se
dispersen sus cromosomas
obtención de cromosomas
eliminación de la tinción de los portaobjetos
Si hemos utilizado aceite de Alcohol
inmersión
Agua destilada (soluble)
Si hemos utilizado medio de
Xileno (insoluble/ montaje
montaje
permanente)

Fijador de etanol-acético
Si hemos utilizado tinciones
Deje de desteñir

Siempre que lavemos los portas luego hay que secarlos

ordenación de los cromosomas humanos
Tamaño y forma Posición centrómero, patrón de bandas