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Dendrobatidis
Batrachochytrium Conocido como el
dendrobatidis hongo quitrido de los
anfibios
Amenaza a má
Causante de s del
m e da d por 95% de anfibios
en fer
quitridio
1
Muestra
Se realizo hisopado
Animales vivos (piel)
Animales muertos (piel, cavidad orla,
tejido de extremidades)
2
Protocolo de la PCR
Levantamiento de información Ensayo de PCR
Investigar la técnica correcta de detección Centrifuga de
de la infección muestras en Los tubos se
vortex por 5 transfieren al
Recolección de muestras segundos termociclador
Necropsias en animales muertos ias
(extremidades y cavidad bucal). Volumen final 10 μl
Extracción de ADN
DESNATURALIZACION A 95°C 2MIN
ALINEAMIENTO Y EXTENSION A 63°C 15 SEG POR UN TOTAL DE 45 3
CICLOS POR 2 HR
Extracción del ADN
Protocolo utilizado En cada muestra se
Diseño de primers y
añadio
Green Y Sambook
600 μl de isopropanol cebadores
600 μl de Gramm- Primers-BLAST y primers3web
Glutamintransferasa
100 μl de cloroformo
4
En bact
ADN esp erias y
GEN DE és: aciador arqueas
INTERÉS de in te r precurs o , existe
INVESTI DE LA Gen or un único
GACIÓN c ia d o r policistr ITS,
Espa ónico ubicado
s c rit o entre lo
tran genes d s
int e r n o e ARNr
16S y 23
S
5
f e c t a a
a l q ue a
i o sa le t
d in fe cc
e r m e d a a o
na e n f e s en c i
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d io m ic o a n f d e t e c t
uitr i pa ra
La q e in t e ré s
d ad .
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la s r e g ia d el h d a d y s
l if ic a n au s e n c s pe c if i
Se a m p m á s e
iv a co n
s in va s
a m en o
t éc nic
Es un a
6
Bibliografía
Alvarado Casamín Solange Andrea.
(2020). Detección de la presencia del
hongo Batrachochytrium Dendrobatidis y
Batrachochytrium Salmandrivorans
mediante PCR en tiempo real en muetras
de tejidos de anfibios de centros de
conservación de Quito. 2020, 1(1), 67.
7
¡Gracias!
Por vuestra participación
en el proyecto