UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOANÁLISIS

1894 1950

CÁTEDRA DE TOXICOLOGÍA

2002
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
GENERAL

1
 PRÁCTICA N° 10.

Herbicidas: Paraquat

El paraquat, 1,1- dimetil-4,4- bipiridilo bicloruro, es un herbicida perteneciente al

grupo de los biperidilos, utilizado como indicador en las reacciones de óxido-
reducción y llamado también metil-viológeno. Químicamente es un catión
divalente de amonio cuaternario que posee dos anillos piridilicos en su
estructura (Figura 1)

Figura 1. Paraquat ( 1,1- dimetil-4,4 – bipiridilo bicloruro)

Es un compuesto muy polar con una solubilidad en agua de 700 gL-1 poco
soluble en alcohol e insoluble en solventes orgánicos, con un rango de fusión
comprendido entre 175-180 °C y un punto de ebullición a 300 °C; el pH de la
formulación liquida esta entre 6.5 – 7.5. Técnicamente el paraquat se presenta
de dos maneras, la sal de cloruro (C12H14N2Cl2) y dimetilsulfato
C12H14N2(CH3SO4)2 ,con pesos moleculares de 257.2 y 408.5 gmol-1
respectivamente y el peso molecular del ion paraquat es de 186.2 gmol-1.

Existen diversos métodos para la determinación de paraquat en agua y

matrices biológicas, fundamentados en técnicas como por ejemplo la
espectrofotometría UV-Visible, cromatografía liquida de alta resolución,
electroforesis capilar y la cromatografía electrocinética micelar, entre otros.

Por otra parte, el uso de métodos visuales que permitan la identificación

cualitativa del paraquat, en muestras biológicas y no biológicas, son los de
primera mano en la emergencia hospitalaria para el diagnóstico presuntivo e

2
inicial cuando se sospecha de intoxicación por paraquat. Los métodos visuales
se fundamentan en la reducción del dicatión paraquat (incoloro), en solución
alcalina, por su agente reductor como el ditionito de sodio, formándose un
radical libre altamente coloreado de azul (cromóforo) que absorbe en el
espectro visible a 600 nm. Sin embargo, una de las principales dificultades es
que el radical libre tiene una estabilidad limitada ( 5 – 10 minutos) debido a la
oxidación por el oxígeno atmosférico (Figura 2). Otro reactivo reportado como
agente reductor del dicatión paraquat es el ácido ascórbico, el cual es un
reactivo más estable que el ditionito en la formación del radical libre de color
azul y tiene una absorbancia máxima a los 600 nm. También, se ha utilizado el
tetraiodo mercurato de potasio y el borohidruro de sodio para reducir el
paraquat y formar el radical azul.

Figura 2. Reducción del dicatión paraquat a un radical catiónico coloreado.

Un test cualitativo para el análisis de paraquat en orina es distribuido por

Syngenta, el mismo consiste en dos sobres, un con 2 gramos de bicarbonato
de sodio y el otro con 1 gramo de Ditionito de sodio, con el objeto de
disponerlo como Kit de diagnóstico en orina y contenido estomacal, sin
embargo su disponibilidad depende de la distribución periódica de los mismos
hacia los centros de salud por parte de casa que lo suministra.

El inconveniente originado por la inestabilidad del cromòforo cuando se utiliza

Ditionito, y la disponibilidad y costos de los otros agentes reductores, se ha
solventado utilizando la glucosa como agente reductor del paraquat debido a
que permite una mayor estabilidad del radical coloreado, alrededor de 12
horas, y se puede producir el máximo de color cuando la solución de reactivos

3
y muestra se somete a calentamiento entre 70- 100 ªC. Por lo que existe la
posibilidad de utilizarlo en un test cualitativo de detección visual y relativamente
simple para ser aplicado como prueba rápida en caso de intoxicación por
paraquat.

Materiales y Métodos:

Los reactivos utilizados son de grado analítico: NaOH Merck, Darmstad,

Alemania, D(+) glucosa ( monohidratada) Merck, Darmstad, Alemania: metil
viológeno ( gramaxone, paraquat) : 1,1- dimetil-4.4- bipiridilo bicloruro, Sigma,
Sigma Chemical Company San Louis, USA; Solución concentrada (200 g L-1 de
Paraquat) de Gramoxone, N.F., Syngenta, Cagua, Estado Aragua, Venezuela.
Paraquat Test kit, Syngenta, Central Dispensary Syngenta CTL, Alderley Park,
Macclesfield, Cheschire, SK 10 78 Y, United Kingdom.

Preparación de reactivos:

1.- Reactivo reductor:

a.- Solución de Ditionito, disolver 1 gramo en 100 ml de NaOH 1N.

Preparar inmediatamente antes de su uso, debido a que es inestable,

puede ser descartado a las 2 horas.

b.- Glucosa, disolver 4 gramos de NaOH en 100ml de NaOH 1N

2.- NaOH 1N, disolver 4 g de NaOH en 100 ml de agua destilada

3.- Las soluciones de trabajo se prepararon diluyendo volúmenes apropiados

de la solución concentrada de paraquat en agua destilada para obtener
concentraciones de 200, 100, 50, 20, 10, 5, 2 y 1 ppm.

4
Procedimiento:

Se utilizo como agente reductor Ditionito de sodio y glucosa, con la finalidad de

observar como varia la intensidad de color a diferentes concentraciones y con
distintos agentes reductores.

1.- Medir 10 ml de solución de trabajo o muestra y colocarlo en un tubo de 15

ml

2.- Adicionar 2 ml del reactivo reductor, tapar y mezclar por inversión tres
veces sin agitar.

a.- En el caso de la glucosa, luego de mezclar a baño de Maria a 70ªC

durante 1 minuto, para permitir el desarrollo de color.

3.- Las muestras se tratan con el mismo procedimiento.