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NITROGENO TOTAL EN AGUA POR EL METODO SEMI-MICRO KJELDHL ELECTRODO DE AMONIACO

TTULO:

NITROGENO TOTAL EN AGUA POR EL METODO SEMI-MICRO KJELDAHL - ELECTRODO DE AMONIACO.

CDIGO:

TP0432

VERSIN: 02 FECHA LTIMA REVISIN: COPIA N:

ELABORADO POR: CARLOS HERNN RODRGUEZ M. TECNICO QUMICO REVISADO POR: ROCIO DEL PILAR BOJAC B. QUMICA U.N. APROBADO POR: MARTA ELENA DUQUE S. Coordinadora GLCA

* Este documento debe ser revisado por lo menos cada dos aos.

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NITROGENO TOTAL EN AGUA POR EL METODO SEMI-MICRO KJELDHL ELECTRODO DE AMONIACO

1. INTRODUCCIN: De acuerdo con el ciclo del Nitrgeno, una concentracin alta de Nitrgeno orgnico es caracterstica de una contaminacin fresca o reciente, y por consiguiente de gran peligro potencial. Todo el Nitrgeno presente en compuestos orgnicos puede considerarse Nitrgeno orgnico. El contenido de Nitrgeno orgnico en un agua incluye el Nitrgeno de aminocidos, aminas, polipptidos, protenas y otros compuestos orgnicos del Nitrgeno. El Nitrgeno amino de la mayora de materiales orgnicos y el amoniaco libre son convertidos a amonio en presencia de H2SO4, sulfato de potasio (K2SO4), y sulfato de Cobre II (CuSO4) como catalizador. Durante la digestin, el carbono y el hidrgeno son oxidados a dixido de carbono y agua, mientras el sulfato es reducido a dixido de azufre y el grupo amino es liberado como amoniaco, el cual no puede escapar del medio cido y permanece como una sal de amonio. Despus de la adicin de Hidrxido, el amoniaco es destilado desde el medio alcalino y absorbido en cido sulfrico 0.02M, de la solucin cida el amoniaco es liberado por adicin de NaOH a pH 11 y es ledo con un electrodo selectivo de amoniaco. El mtodo se aplica en este laboratorio para la matriz aguas residuales industriales y superficiales. Se emplea para el intervalo de 0,50 a 1.000 mg de N/L. Es un mtodo electromtrico, en el que se determina el amoniaco y se expresa como Nitrgeno (N). El mtodo Kjeldahl determina el Nitrgeno en estado tri negativo; el Nitrgeno Kjeldahl es la suma del Nitrgeno Orgnico y el Nitrgeno Amoniacal.

2. DEFINICIONES: EIS = Electrodo de in selectivo LDM = Lmite de deteccin del mtodo

3. ASPECTOS DE SALUD Y SEGURIDAD LABORAL Utilice los implementos de seguridad como son: Blusa de laboratorio, pantaln, zapatos antideslizantes, gafas de seguridad, respirador, guantes de caucho.

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El cido Sulfrico y el hidrxido de Sodio son compuestos con los que debe trabajarse con extremo cuidado por su alta corrosividad, por lo tanto es necesario emplear los implementos mencionados anteriormente. (ver hojas de seguridad No. 44 y 163 respectivamente) 4. LIMITACIONES E INTERFERENCIAS Nitrato: Durante la digestin Kjeldahl, un exceso de nitrato superior a 10 mg/L puede oxidar una porcin del amoniaco liberado a partir del Nitrgeno orgnico digerido, para producir N2O y causar una interferencia negativa. Cuando est presente suficiente materia orgnica en un bajo estado de oxidacin, el nitrato puede ser reducido a amoniaco, resultando en una interferencia positiva. Las condiciones bajo las cuales ocurren interferencias significantes no estn bien definidas y no hay una va probada para eliminar la interferencia en conjuncin con los mtodos Kjeldahl. Sales y slidos inorgnicos: El contenido de cido y sal del reactivo de digestin Kjeldahl tiene la intencin de producir una temperatura de digestin cercana a 380C. Si la muestra contiene una cantidad muy grande de sales o slidos inorgnicos que se disuelvan durante la digestin, la temperatura puede elevarse sobre 400C, punto en el cual empieza a ocurrir una prdida piroltica de Nitrgeno. Para prevenir una temperatura de digestin excesiva, agregar ms H2SO4 para mantener el balance cido-sal. No todas las sales causan precisamente la misma elevacin de temperatura, pero la adicin de 1 mL H2SO4/g de sal en la muestra da resultados razonables. Demasiado cido puede disminuir la temperatura de digestin por debajo de 380C y resultar en una digestin y recuperacin incompleta. Grandes cantidades de sales o slidos tambin pueden causar sacudidas durante la destilacin. Si esto ocurre, agregar ms agua de dilucin despus de la digestin. Materia orgnica: Durante la digestin Kjeldahl, el H2SO4 oxida la materia orgnica a CO2 y H2O. Si est presente una gran cantidad de materia orgnica, se consumir una gran cantidad de cido, se incrementar la relacin de sal a cido, y se incrementar la temperatura de digestin. Si est presente suficiente materia orgnica, la temperatura puede ascender sobre 400C, resultando en una prdida piroltica de Nitrgeno. Para prevenir esto, diluir la muestra de manera que sea suficiente el reactivo de digestin adicionado.

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5. RESULTADOS DE LA VALIDACIN DEL MTODO

NITROGENO TOTAL EN AGUA POR EL METODO SEMI-MICRO KJELDAHL ELECTRODO DE AMONIACO. TP0432 06/10/06 UNIDADES mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L OBSERVACION Corresponde al lmite de cuantificacin. Nivel de Concentracin 0.5 mg/L Nivel de Concentracin 100 mg/L Nivel de Concentracin 0.5 mg/L Nivel de Concentracin 100 mg/L Sin dilucin de la muestra Con una dilucin de 10 veces Nivel de Concentracin 5.0 mg/L Nivel de Concentracin 25 mg/L

NOMBRE DEL METODO: CDIGO DEL PSO:

FECHA DEL INFORME DE ESTANDARIZACIN: PARMETRO LIMITE DE DETECCION PRECISION EN TRMINOS DE %CV EXACTITUD EXPRESADO COMO % DE ERROR RELATIVO RANGO DE TRABAJO (Lectura Directa) INTERVALO DE APLICACIN DEL METODO RECUPERACION EXPRESADO COMO % VALOR 0.5 2.9 1.1 -0.5 -1.7 0.5 - 100 0.5 - 1000 91.6 95.1

6. TOMA Y PRESERVACIN DE LA MUESTRA Tome la muestra de tal manera que sea representativa del punto de muestreo en estudio. Utilice frascos plsticos de polipropileno de 500 o 1000 mL de capacidad. Los resultados ms significativos se obtienen en muestras frescas. Si no es posible un anlisis inmediato, preservar las muestras para digestin Kjeldahl acidificando a pH < 2,0 con H2SO4 concentrado y almacenndolas a 4C. Efecte el anlisis dentro de los 28 das siguientes a la toma de la muestra, cuando sta ha sido preservada. 7. APARATOS, REACTIVOS Y MATERIALES 7.1. Aparatos

Balanza analtica de cuatro cifras decimales (Mettler Toledo AG 204) Aparato de digestin: Unidad de digestin BCHI 435 Usar tubos de digestin con una capacidad de 200 mL en un bloque de digestin con elementos de calentamiento para acomodar los tubos y una salida de

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succin para el escape de los gases. Los elementos de calentamiento deben proveer un rango de temperatura de 375 a 385C para una digestin efectiva. Aparato de destilacin: Unidad de destilacin BCHI 323 Scrubber BCHI 412 Potencimetro (Orion 920A). Electrodo selectivo a amoniaco (Orion) Agitador magntico, con barra recubierta de TFE. Reactivos

7.2.

Agua ultra pura. Usar agua ultra pura para preparar todos los reactivos, las diluciones de muestra y enjuagues. cido Sulfrico concentrado. H2SO4 Reactivo Analtico (aprox 98 %) Hidrxido de Sodio. NaOH. Reactivo Analtico (En lentejas) Hidrxido de Sodio. NaOH. Reactivo tcnico o industrial (En laminas) Sulfato de Potasio K2SO4. Reactivo Analtico. Sulfato de Cobre CuSO4 . Reactivo Analtico. Sal tetrasdica del cido etilendiaminotetraactico dihidrato (Na4EDTA.2H2O) (Titriplex III) EDTA Cloruro de Amonio NH4Cl. Reactivo Analtico. Reactivo de digestin: Disolver 134 g de K2SO4 y 7,3 g de CuSO4 en cerca de 800 mL de agua. Cuidadosamente agregar 134 mL de H2SO4 conc. Cuando se haya enfriado hasta temperatura ambiente, diluir la solucin a 1 L con agua. Mezclar bien. Mantener a una temperatura cercana a 20C para prevenir la cristalizacin. Hidrxido de sodio, NaOH, 32%. Disuelva 320 g de NaOH Reactivo tcnico en aproximadamente 800 mL de agua, luego complete a 1L. Solucin absorbente, cido Sulfrico 0,02 M. Disuelva 1.1 mL de H2SO4 concentrado en aproximadamente 800 mL de agua y complete 1L Solucin patrn de EDTA 1000 mg N/L. Disuelva 13,4286 g de sal tetrasdica del cido etilendiaminotetraactico en aproximadamente 800 mL de agua y complete a 1L en un baln aforado. Solucin de NaOH/EDTA, 10 N. Disolver 400 g de NaOH Reactivo analtico, en 800 mL de agua; agregar 45,2 g de sal tetrasdica de cido etilendiaminotetraactico dihidrato (Na4EDTA.2H2O) y agitar para disolver. Enfriar y diluir a 1000 mL con agua.

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Solucin estndar de amonio. Disolver en agua 3,819 g de NH4Cl anhidro, secado a 100C, a peso constante y diluir a 1000 mL; 1,00 mL = 1,00 mg N = 1,22 mg NH3. Soluciones patrn de amonio. A partir de la solucin estndar de NH4Cl prepare los estndares de 100, 10.0 y 1.0 mg/L . Materiales

7.3.

Botellas de Polipropileno de 500 mL o 1 L. Tubos para la digestin BCHI Microesptula metlica. Baln aforado de 1L Clase A. Balones aforados de 100 mL Clase A y Clase B. Erlenmeyer de 125 mL. Pipetas graduadas de 1, 10, 25 mL. Clase B Pipetas aforadas de 5, 10, 20, 50 mL Clase A Probetas de 25 y 50 mL Frasco lavador

8. PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA DE VIDRIERA: Lave toda la vidriera con jabn alcalino, enjuague con agua de la llave, posteriormente djelo en H2SO4 diluido al 5% y enjuague muy bien con agua destilada. Remtase al Procedimiento TP0125 (Lavado de material) Utilice la vidriera a la que se le haya efectuado control de calidad .

9. PROCEDIMIENTO DE PREPARACIN DE ESTNDARES En un pesa - sustancias coloque 13,4286 gramos de EDTA. Transfiralos de forma cuantitativa a un baln aforado de 1 litro, utilice agua ultrapura para esta operacin. La solucin as obtenida tiene una concentracin de 1000 mg N/L. Para las diluciones posteriores es conveniente preparar una solucin de 100 mg/L, a partir de la solucin de 1000 mg/L. 9.1 Estndares de calibracin y control:

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Estndar de 1,0 mg N/L . Tome 10 mL del patrn de 10 mg/L y adicione 40 mL de agua ultrapura en el tubo de digestin. La concentracin reportada se encuentra en el destilado. Estndar de Control de 5,0 mg N/L . Tome 5 mL del patrn de 100 mg/L y adicione 45 mL de agua ultrapura en el tubo de digestin. La concentracin reportada se encuentra en el destilado, este es el estndar de control de bajo. Estndar de 10,0 mg N/L . Tome 10 mL del patrn de 100 mg/L y adicione 40 mL de agua ultrapura en el tubo de digestin. La concentracin reportada se encuentra en el destilado. Estndar de Control de 50 mg N/L . Tome 5 mL del patrn de 1000 mg/L y adicione 45 mL de agua ultrapura en el tubo de digestin. La concentracin reportada se encuentra en el destilado, este es el estndar de control alto. Estndar de 100 mg N/L . Tome 10 mL del patrn de 1000 mg/L y adicione 40 mL de agua ultrapura en el tubo de digestin. La concentracin reportada se encuentra en el destilado.

10. PROCEDIMIENTO DE ANLISIS Verificacin del Medidor de Iones y del Electrodo: Es recomendable que el analista verifique que el sistema de medicin este funcionando adecuadamente. Utilice estndares no digeridos de NH4Cl, para hacer una precalibracin y lea a manera de prueba uno o dos estndares como muestras. Evalu los resultados para continuar con el procedimiento de anlisis. Digestin: agregue cuidadosamente 10 mL de reactivo de digestin al tubo que contiene 50 mL de la muestra o alcuota conveniente, completada a 50 con agua ultrapura. Ajuste cada unidad de calentamiento en el aparato de digestin hasta el punto 3 y coloque los tubos accionando el equipo de evacuacin disponible para remover los vapores cidos. Aumente el calentamiento gradualmente hasta la posicin 5 pero evitando que la ebullicin sea muy fuerte y produzca salpicadura. Continuar la ebullicin hasta que la solucin se haga transparente y verde esmeralda y se observen copiosos vapores en todos los tubos, entonces gire el control de cada unidad de calentamiento al punto 6 y permita que haya digestin entre 10 y 15 min. adicionales. La digestin se ha completado en el punto en el cual, se observa el cido sulfrico en reflujo en la parte mas alta del tubo (aproximadamente 5 cm por debajo de la boca del tubo). Apague la unidad y saque el montaje colquelo en el soporte para este fin, deje enfriar y apague la unidad de extraccin.

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Destilacin: Prepare el numero de balones conveniente de 100 mL con 30 mL de H2SO4 0.02 M, coloque el baln en el soporte e introduzca el tubo se salida del destilador cuidando que quede sumergido en la solucin absorbente. Realice un enjuague a las paredes del tubo con una pequea porcin de agua, coloque el tubo de digestin en el soporte del equipo y siga el procedimiento descrito en el manual del destilador BCHI 323. Verifique en la programacin del equipo las siguientes condiciones: 10 mL de agua, 15 mL de hidrxido de sodio al 32% y un tiempo de destilacin de tres minutos. Medicin final de amonio: transfiera la muestra destilada a un erlenmeyer de 125 mL, aadir suficiente solucin de NaOH 10 N (1 mL suele ser suficiente) para aumentar el pH por encima de 11, agite de manera constante e introduzca el electrodo selectivo de amoniaco. Permita que haya estabilidad en la lectura y registre el resultado en el formato TF0021 Captura de datos Electrometra. Calibracin del Medidor de Iones: Comprobar el funcionamiento del elemento sensor del electrodo segn las instrucciones del fabricante para asegurar que es correcto. Ver instructivo No. TI0364. Curva de Calibracin: Realizar la calibracin del equipo siguiendo el procedimiento TP 0134 de determinacin de amonio, trabajando sobre los patrones digeridos y destilados. NOTA: Si la concentracin de la muestra es superior a 100 mg N/L, tome una alcuota menor e inicie la digestin. 11. PROCESAMIENTO DE DATOS Y CLCULO DE RESULTADOS: La concentracin de Nitrgeno Total es determinada directamente por el instrumento de medida, pero, es importante tener en cuenta el factor de dilucin para realizar el clculo respectivo. Debido al proceso de digestin sobre 50 mL de muestra y destilacin a 100 mL, esta se encuentra afectada por un factor de dilucin de dos. Si se realiza dilucin adicional multiplicar los factores de dilucin.

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12. SECCIN DE CONTROL DE CALIDAD (CC) Y ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Los resultados son diligenciados en el formato FT0021 correspondiente a captura de datos electromtricos, y debe ser entregado al lder del grupo de anlisis fisicoqumicos. Cuando realice la curva de calibracin acptela si cumple con las especificaciones dadas en el instructivo TI0364 ( Pendiente entre 54 mV y 60 mV) En forma paralela, con cada grupo o lote de muestras, es necesario procesar en un mismo da, un blanco, un duplicado de muestra, un estndar de control (Cuando se procesen muestras de agua residual procese un estndar de control de 50 mg de N/L y cuando se trate de muestras de agua superficial procese un estndar de control de 5,0 mg de N/L). Registre los resultados en la CARTA DE CONTROL del mtodo. Si estos resultados estn por fuera de los limites de control consulte con el lder de Anlisis. La diferencia entre los duplicados no debe ser mayor al 10%, si la variacin excede este lmite, debe repetirse el anlisis.

13. REFERENCIAS: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. American Public Health Association, American Water Works Association, Water Pollution Control Federation. 19ed., New York, 1995. Pp 5-36 5- 39. ROMERO ROJAS J A. (2002). Calidad del Agua. 1. Edicin, Escuela de Ingeniera 2002 IDEAM, Grupo Laboratorio de Calidad Ambiental. Nitrgeno Amoniacal Electromtrico Amoniaco TP0134. Bogot, 2005. IDEAM, Grupo Laboratorio de Calidad Ambiental. Instructivo del electrodo de amoniaco Orion 95 12, TI0398. Bogot, 2005.