PRÁCTICAS DE LABORATORIO BIOQUÍMICA II

Práctica N° 01: Introducción a los materiales y mediciones del laboratorio de Bioquímica

OBJETIVOS:

- Reconocer los materiales del laboratorio y sus usos

- Conocer las distintas técnicas de medición en masa y volumen
- Determinar el error absoluto, relativo y porcentual de los instrumentos volumétricos indicados

EQUIPOS A UTILIZAR: Balanza Granataria

MATERIALES A UTILIZAR: Tubos de ensayos, Gradilla, Probeta, Bureta, Soporte universal, Vaso de precipitado,
Pipeta, Agitador, Matraz Erlenmeyer, Embudo, Cápsula de porcelana, Pinza para tubos de ensayo, Pinza para
Cápsula de porcelana, Piseta.

NOTAS DE SEGURIDAD:

REACTIVOS: Solución de Cloruro de Sodio (NaCl) y Agua destilada

FUNDAMENTO TEÓRICO

Se define como material de laboratorio, a todos los objetos utilizados en la ejecución de los experimentos, en
donde cada cual tiene su forma adecuada al propósito funcional.
El material de laboratorio es apreciado desde diferentes aspectos, por ejemplo:
a) Por su composición: metal, vidrio, porcelana, látex, madera, asbesto, plástico, corcho, etc.
b) Por su complejidad: aparatos y equipos.
c) Por su tamaño: microescala, mediana escala o industrial.
d) Por su capacidad: volumétrico, graduado o no graduado, etc.
e) Por su funcionamiento: para contención, calentamiento, medición, transporte, refrigerante, gotero, soporte,
etc.
f) Por su forma: tubo, matraz, soporte, trípode etc.
Un manejo consciente del material, tiene como objetivo su conservación y proporcionarle al estudiante
seguridad durante el trabajo de las prácticas del laboratorio.
CONCEPTOS BÁSICOS

- Apreciación: se define como la mínima división observable directamente, sobre la escala de medición
del instrumento. Este valor debe tomarse en cuenta al escribir el resultado de una medición o cálculo.

En el caso de un termómetro, la apreciación puede determinarse empleando dos valores de la escala del
instrumento y el número de divisiones entre las dos lecturas. Ejemplo:

A= (L mayor – L menor)/ Nº de divisiones

Dónde:
L = Lectura
Sustituyendo
A= 100°C - 90°C/5= 2°C.
La Apreciación del termómetro= 2°c
- Exactitud: indica que tan cerca está el valor medido o calculado del valor real o teórico y se describe en
términos del error absoluto o relativo.
- Precisión: se refiere a cuanto concuerdan dos o más mediciones de una misma cantidad.

La exactitud y precisión dependerá de la naturaleza del instrumento de medición y de la habilidad con la que se
le haya usado.

- Error Absoluto: es la diferencia entre el valor de referencia y el valor obtenido experimentalmente

(medido o calculado).

Error absoluto = valor de referencia- valor experimental

- Error relativo porcentual: es la relación entre el error absoluto y el valor verdadero multiplicado por
cien.

Error relativo porcentual = [Error Absoluto] x 100

Ejemplo: El punto de fusión teórica del ácido benzoico es de 121,5° C y en la práctica un alumno obtuvo un valor
de 120°C. Determine el error absoluto y relativo porcentual

En tal caso el error absoluto y relativo de la medición será:

Error Absoluto = [121,5°C – 120°C ]= 1,5°C;

Error relativo = 1,5°C / 121,5°C x 100 = 1,2 %

MATERIAL VOLUMÉTRICO

Para lograr medidas precisas de volúmenes de líquidos, se emplean instrumentos calibrados que
proporcionan la mayor exactitud en relación al volumen que desea medir, estos instrumentos se conocen como
materiales volumétricos graduados (buretas, cilindros y pipetas), ya que tienen una escala de graduación, es
decir que se pueden determinar diferentes volúmenes.

La superficie de los líquidos en este tipo de instrumento es curva, y recibe el nombre de menisco. Cuando el
líquido moja el tubo el menisco es cóncavo, si el líquido no moja el tubo se observa un menisco convexo (ej.: el
mercurio). Habitualmente trabajamos con líquidos que mojan el tubo, por consiguiente, los meniscos que
observaremos serán cóncavos.
 En el menisco cóncavo podemos considerar una curva inferior y una curva superior, para la medición de líquidos
claros, se lee la graduación tangente a la curva inferior del menisco, en el caso de líquidos oscuros, se lee la
graduación tangente a la curva superior, el instrumento debe colocarse o sostenerse en posición vertical y el
nivel de observación debe ser horizontal y al mismo nivel de la curva del menisco.

PROCEDIMIENTO: Realizar los procedimientos que se indican a continuación, puede agregar fotos o dibujos

- Describir los principales materiales del laboratorio de Bioquímica. (Material, graduación y todas las
características que estos posean)

- Leer la medida en cada instrumento según la solución

- La lectura siempre debe hacerse sobre una base firme y la vista debe estar a la altura de la medida, es decir,
los ojos deben estar horizontalmente observando la medida.

RECOMENDACIONES:

CALCULOS:

Escriba los cálculos y la cantidad de reactivo de ClNa que tuvo que utilizar para preparar 50 ml de reactivo de
ClNa

DISCUSIÓN: Los estudiantes anotaran las correcciones o sucesos ocurridos en la práctica

CONCLUSION: Los estudiantes describen lo que aprendieron en la práctica

Apellidos y Nombres, N° de C.I. y Sección

 PRÁCTICAS DE LABORATORIO BIOQUÍMICA II
Práctica N° 02: Identificar Presencia de Carbohidratos en los Alimentos

OBJETIVOS GENERAL:

- Identificar la presencia de Carbohidratos en nuestra alimentación

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

- Identificar la tonalidad que adquieren los alimentos ante la presencia del reactivo
- Determinar, según la variación de tonalidad, la presencia de Carbohidratos en los alimentos
seleccionados

EQUIPOS A UTILIZAR:

REACTIVO: Tintura de Yodo

MATERIALES A UTILIZAR: Trozos de papa cruda, pan, carne de res, carne de pollo, plátano, mortadela, arroz
cocido y un plato grande.

Se diluye el yodo con agua: Por cada gota de yodo mezclar 9 gotas de agua Colocar las muestras de alimentos en
el plato, y con el gotero añadir unas gotas de solución yodada a cada muestra. Los alimentos que cambian a
color azul violeta muestran presencia de carbohidratos.

NOTAS DE SEGURIDAD: Cumplir con las medidas de bioseguridad como es: Uso de material de barrera como son
guantes, bata, mascarilla y protector visual.

FUNDAMENTO TEÓRICO

Los carbohidratos son unas biomoléculas que también toman los nombres de hidratos de carbono, glúcidos,
azúcares o sacáridos; aunque los dos primeros nombres, los más comunes y empleados, no son del todo
precisos, ya que no se tratan estrictamente de átomos de carbono hidratados, pero los intentos por sustituir
estos términos por otros más precisos no han tenido éxito. Estas moléculas están formadas por tres elementos
fundamentales: el carbono, el hidrógeno y el oxígeno, este último en una proporción algo más baja. Su principal
función en el organismo de los seres vivos es la de contribuir en el almacenamiento y en la obtención de
energía de forma inmediata, sobre todo al cerebro y al sistema nervioso.
Esto se cumple gracias a una enzima, la amilasa, que ayuda a descomponer esta molécula en glucosa o azúcar
en sangre, que hace posible que el cuerpo utilice la energía para realizar sus funciones.
Tipos de carbohidratos
Existen cuatro tipos, en función de su estructura química: los monosacáridos, los disacáridos, los
oligosacáridos y los polisacáridos.
Monosacáridos
Son los más simples, ya que están formados por una sola molécula. Esto los convierte en la principal fuente
de combustible para el organismo y hace posible que sean usados como una fuente de energía y también en
biosíntesis o anabolismo, el conjunto de procesos del metabolismo destinados a formar los componentes
celulares. También hay algunos tipos de monosacáridos, como la ribosa o la desoxirribosa, que forman parte del
material genético del ADN. Cuando estos monosacáridos no son necesarios en ninguna de las funciones que les
son propias, se convierten en otra forma diferente como por ejemplo los polisacáridos.
Disacáridos
Son otro tipo de hidratos de carbono que, como indica su nombre, están formados por dos moléculas de
monosacáridos. Estas pueden hidrolizarse y dar lugar a dos monosacáridos libres. Entre los disacáridos más
comunes están la sacarosa (el más abundante, que constituye la principal forma de transporte de los glúcidos en
las plantas y organismos vegetales), la lactosa o azúcar de la leche, la maltosa (que proviene de la hidrólisis del
almidón) y la celobiosa (obtenida de la hidrólisis de la celulosa).
Oligosacáridos
La estructura de estos carbohidratos es variable y pueden estar formados por entre tres y nueve moléculas de
monosacáridos, unidas por enlaces y que se liberan cuando se lleva a cabo un proceso de hidrólisis, al igual que
ocurre con los disacáridos. En muchos casos, los oligosacáridos pueden aparecer unidos a proteínas, dando lugar
a lo que se conoce como glucoproteínas.
Polisacáridos
Son cadenas de más de diez monosacáridos cuya función en el organismo se relaciona normalmente con
labores de estructura o de almacenamiento. Ejemplos de polisacáridos comunes son el almidón, la amilosa,
el glucógeno, la celulosa y la quitina.
Función de los carbohidratos
Aunque su función principal es la energética, también hay ciertos hidratos de carbono cuya función está
relacionada con la estructura de las células o aparatos del organismo, sobre todo en el caso de los polisacáridos.
Estos pueden dar lugar a estructuras esqueléticas muy resistentes y también pueden formar parte de la
estructura propia de otras biomoléculas como proteínas, grasas y ácidos nucleicos. Gracias a su resistencia, es
posible sintetizarlos en el exterior del cuerpo y utilizarlos para fabricar diversos tejidos, plásticos y otros
productos artificiales.
Nutrición
En el ámbito de la nutrición, es posible distinguir entre hidratos de carbono simples y complejos, teniendo
en cuenta tanto su estructura como la rapidez y el proceso a través del cual el azúcar se digiere y se absorbe por
el organismo.
Así, los carbohidratos simples que provienen de los alimentos incluyen la fructosa (que se encuentra en las
frutas) y la galactosa (en los productos lácteos); y los carbohidratos complejos abarcan la lactosa (también
presente en productos lácteos), la maltosa (que aparece en ciertas verduras, así como en la cerveza en cuya
elaboración se emplea el cereal de la malta), y la sacarosa (que se encuentra en el azúcar de mesa o azúcar
común).
Algunos alimentos que son ricos en carbohidratos simples son las frutas y verduras, la leche y los productos
derivados de esta como el queso o el yogur, así como en los azúcares y productos refinados (en los que también
se produce el suministro de calorías, pero a diferencia de los anteriores se trata de calorías vacías al carecer de
vitaminas, minerales y fibra); entre ellos se encuentran la harina blanca, el azúcar y el arroz. En cuanto a los
carbohidratos complejos, se incluyen alimentos como legumbres, verduras ricas en almidón y panes y otros
productos que incluyan cereales integrales.

DESARROLLO DE PROCEDIMIENTOS GENERALES PARA LA PREPARACION DE SOLUCIONES

PROCEDIMIENTO: Realizar los procedimientos que se indican a continuación, puede agregar fotos o dibujos

- Se diluye el yodo con agua: Por cada gota de yodo mezclar 9 gotas de agua
- Colocar las muestras de alimentos en el plato, y con el gotero añadir unas gotas de solución yodada a
cada muestra.
 - Los alimentos que cambian a color azul violeta muestran presencia de carbohidratos.

DISCUSIÓN: Los estudiantes anotaran las correcciones o sucesos ocurridos en la práctica

CONCLUSION: Los estudiantes describen lo que aprendieron en la práctica

Apellidos y Nombres, N° de C.I. y Sección

 PRÁCTICAS DE LABORATORIO BIOQUÍMICA II
Práctica N° 03: Lípidos en los alimentos con el uso de alcohol

OBJETIVOS:

- Reconocer los Lípidos usando alcohol isopropílico en los alimentos

- Conocer la técnica y los procedimientos para identificar Lípidos en alimentos

MATERIALES A UTILIZAR:

Alimentos con los que experimentar, por ejemplo chocolate o maní, aceite, fruta, hortaliza, tocineta, salchichas,
frutos secos, patatas fritas… Solo es necesaria una pequeñísima cantidad de cada uno.

Utensilios de cocina: tabla para cortar, cuchillo o tijeras, mortero (depende de los alimentos que usemos),
Pipetas o cucharillas, Alcohol Isopropílico, Agua y Vasos de Precipitado

NOTAS DE SEGURIDAD: Cumplir con las medidas de bioseguridad como es: Uso de material de barrera como son
guantes, bata, mascarilla y protector visual.

PROCEDIMIENTOS: Realizar los procedimientos que se indican a continuación, puede agregar fotos o dibujos.

DESARROLLO DE PROCEDIMIENTOS GENERALES PARA LA PREPARACION DE MUESTRAS

- Pon los alimentos (muy poca cantidad) dentro de un vaso de precipitado o un tarro. Si son sólidos tendrás que
haberlos cortado o machacado con el mortero. Debes rotularlos.

- Cubre con alcohol y agita o remueve

- Deja que la mezcla repose unos minutos. Deberías obtener un líquido transparente flotando sobre el alimento.
Si el líquido es blanquecino es que has utilizado demasiado alimento o poco alcohol.

- Pon un poco de líquido transparente en un vaso. Para ello puedes usar una pipeta a modo de pitillo.

- Añade agua. Si el líquido deja de ser transparente y se vuelve turbio el test de presencia de lípidos da positivo,
si, por el contrario, no hay cambios es que la muestra no contiene lípidos, al menos no en cantidades
significativas.

REACTIVOS: Agua y Alcohol Isopropílico

FUNDAMENTO TEÓRICO

CONCEPTOS BÁSICOS

Los lípidos son un grupo de moléculas biológicas que comparten dos características: son insolubles en agua y
son ricas en energía debido al número de enlaces carbono-hidrógeno. Un lípido es un compuesto orgánico
molecular no soluble compuesto por hidrógeno y carbono. Los dos tipos principales de lípidos en la sangre son el
colesterol y los triglicéridos. En cuanto a su propósito en el cuerpo humano los lípidos son de crucial importancia
para el almacenamiento de energía y el desarrollo de la membrana celular. Si los niveles de los lípidos llegan a
ser demasiado altos pueden acumularse en las paredes de las arterias hasta formar una placa que puede
obstruir el paso de la sangre. Hay cierta confusión entre los lípidos y las grasas. No todos los lípidos son grasas
pero todas las grasas son lípidos. La estructura química de los lípidos es diversa. Los triglicéridos son el tipo más
común de lípido encontrado en el cuerpo y alimentos. La clasificación de los lípidos es posible basándose en
propiedades físicas a temperatura ambiente, polaridad y su estructura.

Tipos principales de lípidos que se encuentran en los organismos vivos

1. Fosfolípidos: Consisten en dos cadenas de ácidos grasos, un grupo fosfato y un grupo glicerol. Contienen
moléculas que atraen y repelen el agua, desempeñando un papel clave en la constitución de las membranas
celulares. Existen muchos tipos de fosfolípidos en el cuerpo, especialmente en el cerebro. En el cuerpo se
encuentran varias formas que participan en la digestión de la grasa en el intestino delgado. El cuerpo es capaz
de producir todos los fosfolípidos que necesita.

2. Glicolípidos: Los glicolípidos son moléculas grasas que contienen una unidad de azúcar, tal como glucosa o
galactosa. Las cadenas cortas de azúcar forman glicolípidos los cuales pueden encontrarse en la superficie
exoplasmática de una membrana celular. Juegan un papel importante en el desarrollo del sistema inmune del
cuerpo.

3. Colesterol: El colesterol se encuentra en las células y el torrente sanguíneo de los seres humanos. Debido a
que no es soluble en la sangre debe ser llevado a las células con la ayuda de lipoproteínas. A pesar de que
demasiado colesterol puede ser malo para el cuerpo, el colesterol es una molécula importante. Es necesaria
para formar membranas celulares, y es el precursor de otros esteroides, como la testosterona y el estradiol.

4. Triglicéridos: Las moléculas de triglicéridos están hechas de tres moléculas de ácidos grasos y una molécula
de glicerol. La grasa puede ser insaturada o saturada. Un triglicérido se clasificará como grasa si se solidifica a
una temperatura de 20ºC, de lo contrario se clasifican como aceites. Los triglicéridos son cruciales en el cuerpo
para el almacenamiento de energía. Se obtienen de fuentes alimenticias de grasa, como aceites de cocina,
mantequilla y grasa animal. Desempeñan un papel importante en como el cuerpo utiliza las vitaminas. Cuando
no se queman todas las calorías que consumen, se convierten en triglicéridos y se almacenan para uso futuro.Si
usted consume más calorías de las que quema o come demasiada comida rica en grasas, su nivel de triglicéridos
podría llegar a ser demasiado alto y plantear un riesgo para la salud.

5. Esteroides: Algunos tipos de esteroides comunes son el colesterol, la testosterona, la vitamina D2 y el

estrógeno. Los esteroides son un tipo de lípido que incluye hormonas y colesterol. El colesterol es producido por
el cuerpo y consumido a través de los alimentos, y desempeña un papel en la producción de hormonas. Las
hormonas incluyen las hormonas sexuales estrógeno y testosterona y otras hormonas como la adrenalina,
cortisol y progesterona.

6. Lipoproteínas: Una lipoproteína es una combinación de proteínas y lípidos que se encuentran en la

membrana de una célula. La lipoproteína ayuda a que la grasa se mueva alrededor del cuerpo en el torrente
sanguíneo y existe en forma de lipoproteína de baja densidad (HDL) y lipoproteína de alta densidad (LDL).

7. Cera: Las ceras son lípidos muy comunes y se pueden encontrar en las plumas de los animales, en los oídos
humanos e incluso en las hojas de las plantas. Su función principal es la de protección.

Es fundamental recordar que, los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas principalmente por carbono,
hidrógeno y oxígeno. Además de acumular gran cantidad de energía, realizan muchísimas funciones en los seres
vivos: forman las membranas biológicas, protegen algunos órganos de los golpes (como los riñones), regulan
otras funciones del organismo (como las hormonas sexuales y vitaminas A, D, K, E), son aislantes del frío,
transportan grasas durante la digestión, constituyen esencias y pigmentos vegetales (como el mentol, alcanfor,
xantófilas, carotenoides), recubren y preservan plumas, pelo, piel, frutos y hojas… Los lípidos son insolubles en
agua pero sí lo son en solventes orgánicos como el alcohol. Esta propiedad es la que vamos a utilizar en nuestro
experimento. El alcohol disuelve los lípidos presentes en las muestras de alimentos. Cuando se añade agua el
líquido se vuelve turbio. Se debe a que se forma una emulsión de lípidos y agua en la que el alcohol actúa de
agente emulgente.

Una emulsión es una mezcla de sustancias inmiscibles, en nuestro caso, lípidos y agua. Para que se pueda
llevar a cabo es necesaria la actuación de un emulgente o emulsionante, el alcohol. El emulgente hace que los
lípidos permanezcan suspendidos en el agua en forma de pequeños glóbulos. Debido a la suspensión la mezcla
adquiere un aspecto turbio y blanquecino característico que indica la presencia de lípidos en la muestra.

DISCUSIÓN: Los estudiantes anotaran las correcciones o sucesos ocurridos en la práctica

CONCLUSION: Los estudiantes describen lo que aprendieron en la práctica