Programa Técnicas Avanzadas en Química (2003-04)

Lección 1: Principios de Análisis Químico Medioambiental

Lección 2: Tratamiento de muestras y
Técnicas de Separación de Analitos
Lección 3: Técnicas Clásicas de Análisis Químico
Lección 4: Técnicas Electroquímicas
Lección 5: Técnicas Espectroscópicas

Práctica 1: Determinación de fosfatos por espectrofotometría

Práctica 2: Determinación de Calcio y Magnesio por complexometría
Práctica 3: Determinación de ácidos y bases por valoraciones pH-métricas
Práctica 4: Determinación de materia orgánica en aguas: DQO
Práctica 5: Determinación de metales pesados mediante voltametría
Práctica 6: Técnicas de extracción de especies químicas de muestras sólidas
Práctica 7: Análisis de contaminantes mediante técnicas espectroscópicas
 Bibliografía Recomendada

Manual de la asignatura:
Daniel C. Harris, Análisis Químico Cuantitativo 2ª edición

Textos complementarios:
K.A. Rubinson, Análisis Instrumental.
D.A. Skoog, Principios de Análisis Instrumental
C. Baird, Química Ambiental

Libros de referencia especializados:

R.M. Silverstein, Spectrometric identification organic compounds
M.A.H. Frason Métodos normalizados para el análisis de aguas
potables y residuales
 Evaluación

1. Obligatorio para aprobar:

Asistencia obligatoria a todas las prácticas y entrega
de los informes de laboratorio dentro del plazo estipulado

2. Calificación
- Informes de laboratorio (5 puntos)
- Examen Final escrito (5 puntos)

El informe de cada práctica se entrega:

a) En un plazo máximo de 2 semanas desde la realización
de la práctica (1 punto menos por cada día de retraso)
b) Puede ser individual o conjuntamente con el compañero
con el que se haya trabajado en el Laboratorio.
No está permitido repetir compañero más de 2 veces.
 Cuaderno de Laboratorio

1. Objetivo (1 párrafo)

2. Metodología, técnica empleada (2-3 párrafos)

3. Resultados
3.1 Presentación de las medidas experimentales
3.2 Análisis y presentación de resultados

4. Discusión CIENTÍFICA
4.1 Resumen de los resultados y conclusiones
del experimento realizado
4.2 Crítica de la Técnica y metodología empleada
 Grupos de Prácticas

Grupo M1 de Teoría de mañana

Laboratorio de tarde: Grupos L5, L6, L7, L8
Grupo T2 de Teoría de tarde
Laboratorio de mañana: Grupos L1, L2, L3, L4
Comienzo de los Laboratorios: 20 de octubre

Material Docente de la Asignatura:

http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/quifTAQ.html
 Análisis químico medioambiental
ecosistema
extracción, muestra
(¿contaminado?) tratamiento
de muestras

tratamiento técnica
resultado de datos analítica
Método experimental y precisión de la técnica
esencial para el análisis e interpretación

Calentamiento global
¿mito o realidad?
Red de vigilancia Medioambiental
de la Junta de Andalucía

http://www.juntadeandalucia.es/medioambiente
 Red de vigilancia
de calidad del aire
de Sevilla
Detección de NOx: quimiluminiscencia

Problema de los NOx: ozono troposférico

NO2 + h  NO + O(1D)
g/m3
O( D) + O2  O3
1

Normativa (2010):
NO2 < 200 g/m3

Detección de NO2
NO2 + h  NO + O(1D) (fotólisis)
O3 + NO  NO2* + O2 (reacción)
NO2*  NO2 + h (quimiluminiscencia)
Consejería M.A.: 98% días NO2 buena o admisible

Ecologistas en Acción: detección de líquenes en la zona

centro (técnica cualitativa, límite detección 200-300 g/m3)
 NO2 mala o muy mala
Planteamiento del problema
Definir la información que se necesita
Análisis cualitativo: ¿hay tal contaminante?
Análisis cuantitativo: ¿en qué concentración?
Especiación: ¿en qué forma química?

Ejemplo: Detección de arsénico en un suelo

Análisis cualitativo: el suelo contiene arsénico
en una concentración superior a la sensibilidad
de la técnica experimental [As] > 0.1 g/m 3
Análisis cuantitativo: [As] = 2.5  0.2 g/m3
Especiación: arsenito [As3+] = 2.0  0.1 g/m3
arsenato [As5+] = 0.5  0.1 g/m3
Elección de la técnica experimental

Tipo de análisis a realizar:

cualitativo, cuantitativo o especiación
Límite de detección: concentración mínima detectable
Precisión: error experimental requerido
Especificidad: ¿sensible sólo al analito de interés?
¿interferencias de otras especies o de la matriz?
Tipo y cantidad de muestra necesaria para aplicar
la técnica. ¿Se requiere pretratamiento?
Otros: precio, rapidez, residuos que produce, ...
Concentración de un analito
Molaridad: moles analito/ litro disolución
Molalidad: moles analito/ kg disolvente
% en peso: kg analito/ kg disolvente (x 100)

pH, escalas logarítmicas: p[C] = -log[C]

ppm, ppb, ppt : partes por millón, billón, trillón

millón: 106, billón: 109, trillón: 1012
masa/masa volumen/volumen masa/volumen
ppm g/g l/l mg/l
ppb ng/g nl/l g/l
ppt pg/g pl/l ng/l
Clasificación de los componentes de una muestra

Mayoritarios: C = 1 – 100 % peso (o volumen)

Minoritarios: C = 0.01 – 1 %

Traza: C < 0.01% = 100 ppm

Ultratraza: C < 1 ppb

1 ppm = 1 gota en 50 litros

1 ppt = 1 gota en una piscina olímpica
 Potencias de 10
1012 tera (T) 10-2 centi (c)

109 giga (G) 10-3 mili (m)

106 mega (M) 10-6 micro 

103 kilo (k) 10-9 nano (n)

102 hecto (h) 10-12 pico (p)

10 deca (da) 10-15 femto (f)

10-1 deci (d) 10-18 atto (a)

Incertidumbre de las medidas experimentales

Resultado = ( media  error ) unidades

Ejemplo: medidas de concentración de arsénico

error absoluto A
C = [As] = (0.024  0.006) ppm

error relativo R = A/media x 100 (porcentaje)

C = 0.024 ppm  25%

El valor real de C se encuentra en el intervalo

media  error con una probabilidad del 95%.
Expresión numérica de resultados experimentales

Resultado = ( media  error ) unidades

Ejemplo: medidas de concentración de arsénico

datos “crudos” C = 0.024435 ppm
A = 0.006123 ppm
error absoluto: una sola cifra significativa
media: última cifra la afectada por el error
C = (0.024  0.006) ppm (bien)
C = (0.024435  0.006123) ppm (fatal, suspenso)
C = (2.4  0.6) 10-2 ppm (bien)
C = (2.4 10-2  6 10-3 ) ppm (mal)
 Algunos casos particulares de redondeo

Redondeo al alza y a la baja

 = 0.006123 ppm   = 0.006 ppm
C = 0.024435 ppm  C = 0.024 ppm
C = 0.024535 ppm  C = 0.025 ppm

Redondeo del error a dos cifras

 = 0.0016369 ppm   = 0.0016 ppm
C = 0.0242435 ppm  C = 0.0242 ppm

C = (2.42  0.16) 10-2 ppm

o bien C = (2.4  0.2) 10-2 ppm
Tipos y fuentes de error experimental

error de escala: escala o tolerancia del aparato

valor real
escala del aparato
Tipos y fuentes de error experimental

errores sistemáticos: errores controlados e iguales

en medidas realizadas bajo las mismas condiciones
Pueden ser proporcionales a la cantidad de muestra
Ejemplos: Error de calibración del aparato
Incertidumbre en algún parámetro exptal.
Interferencia con la matriz o con alguna
otra especie química de la muestra

valor real
Tipos y fuentes de error experimental

errores aleatorios:
Debidos a alteraciones aleatorias de la medida
Relacionados con la estabilidad de la técnica
Son incontrolables pero se reduce su efecto con
un número suficiente de medidas

valor real
 valor real
escala del aparato
error
de escala

error
sistemático

error
aleatorio
 Algunos parámetros de calidad de una técnica
Propiedad parámetro de calidad

Precisión desviación estándar, s

(caracteriza la dispersión de las medidas)

Sesgo o exactitud desviación de la media de las medidas

sobre el valor real de un patrón conocido x – xreal

Sensibilidad variación de la señal frente a cambios de

concentración del analito S/C. Se toma como parámetro
el cociente de este valor con la desviación estándar:
 = (S/C)/s

Intervalo de respuesta lineal: proporcionalidad entre la

señal y la concentración de contaminante
 Precisión y exactitud. Analogía:
centro de la diana = valor real
cada tiro = una medida

poco preciso precisión media preciso preciso

exacto (?) exacto exacto no exacto

Alta precisión: si la dispersión de los datos es pequeña

Alta exactitud: la media de todas las medidas coincide
con el valor real de la magnitud que se mide
 errores aleatorios
40
experimentos
5 experimentos
frecuencia

10 experimentos
N
frecuencia

experimentos

valor medido (ppm)

valor medio



 N
error aleatorio experimentos

frecuencia
carácterístico
de una técnica

Resultado de la medida


N

 t de Student
Error aleatorio de (confianza 95%)
la media de una N t
serie de medidas
2 12.7
s 3 4.3
t
N 4 3.2
5 2.8
7 2.5
10 2.3
> 20  2.0
Errores aleatorios típicos en análisis experimental

100%

Desviación estándar
relativa s/ x

40%

20%
5%
2%
10% 0.1% 0.01% 1 ppm 1 ppb 1 ppt
Concentración de analito
 Propagación A= f(x, y, z, ....) A= ¿?
de errores x  x, y  y , z  z conocidos

f f f
A  x  y  z 
x x y z.. y x y z..
z
x y z..

A xyz  A  x  y  z

ejemplos A  xyz 
 A x y z
    
1  A x y z
A
x  y  z 
 Q de Dixon
Rechazo de medidas:
(confianza 95%)
Test de la Q de Dixon
N QDIXON
3 0.94
valor en cuestión - valor más próximo
Q
valor superior - valor inferior  4 0.77
5 0.64
6 0.56
7 0.51
si Q > QDIXON se puede
10 0.41
rechazar la medida
 Comparación de 2 técnicas de análisis:

Técnica 1: N1 medidas, media x1, desviación s1

Técnica 2: N2 medidas, media x2, desviación s2

ttest 
x1  x2 N1 N 2
sP 
N1  1s12  N 2  1s22
sP N1  N 2 N1  N 2  2

si ttest < t-Student para N1+N2-2 medidas,

Los resultados de ambas técnicas son consistentes
 Respuesta de un instrumento de medida

B
A-B: intervalo de
límite de respuesta lineal
Respuesta

detección (señal proporcional

A a la concentración
de analito)
S=aC

Concentración de analito
 Recta de calibrado con patrones
de concentración conocida
y B

Recta de calibrado
Respuesta

(regresión lineal)
A y=ax+b

C1 C2 C3 C4 C5

Concentración de analito x
 y Regresión lineal (mínimos cuadrados)
y=ax+b

(x4,y4) (x5,y5)
Respuesta

(x3,y3)
Recta que minimice el
(x1,y1) cuadrado de las desviaciones:

(x2,y2) i (y – yi)2 = i (a xi+ b – yi)2

x
debe ser mínimo
Concentración
de analito
 Regresión lineal:
y = (a  a) x + (b  b)

C coeficiente de
a , b  y -a x correlación
A
Z D C
a  , b  a  , 
A  N  2  N A B
definiciones
1 1
x   xi y   yi
N N
A   ( xi  x ) 2 B   ( yi  y ) 2
C   ( xi  x )( yi  y ) D   ( xi ) 2
Z   (axi  b  yi ) 2
 ejemplos de coef. de correlación
0.98
regresiones lineales

coef. de correlación
0.995
señal

coef. de correlación
0.90

concentración
 efecto de matriz: medida de un “blanco”
(cuando otras especies de la muestra o el propio
disolvente o matriz alteran la respuesta del analito)

al
re
z
ri
Señal experimental

at
e s
on

m
r

la
at
p
en
o l os
n
it
e
al

to
an

al i
n
el

l a l)
ld

de ea
id
ña

al
ñ riz
Se

e
S at
(m
Concentración de analito
 Método de adiciones estándar
(para eliminar efectos de matriz se
trabaja sobre la matriz real)
y B
adiciones regresión lineal
patrón 3 y=ax+b
2
muestra
original (C ) 1
x
Cx= b/a
Señal

A
extrapolación
a señal cero

- Cx 0 C1 C 2 C3 x
concentración de analito añadida
 Método de adiciones estándar
(para eliminar efectos de matriz)

En el intervalo de respuesta lineal la señal es

proporcional a la concentración de analito

S = k (Cs + Cx) Cs: concentración añadida

Cx: concentración inicial
relación lineal S vs. Cs:
y = a x + b con y = S , x = Cs
a = k, b = k Cx  b/a = Cx

Cx se puede obtener gráficamente extrapolando la

recta de adiciones estándar a señal nula (y = 0)
y = 0 = a x + b  x = - b/a = - Cx
 Método del Patrón interno
patrón interno: cantidad conocida de un compuesto que se añade a la
muestra para reducir errores aleatorios relacionados principalmente
con alteraciones del detector o en la inyección de la muestra en el
instrumento de medida.

S: señal del
analito
problema SP: señal del experimento
patrón
interno
repetición

(señal distinta por errores

aleatorios que afectan tanto
al analito como al patrón interno)
 Método del Patrón interno
patrón interno: cantidad conocida de un compuesto que se añade a la
muestra para reducir errores aleatorios relacionados principalmente
con alteraciones del detector o en la inyección de la muestra en el
instrumento de medida.

S: señal del
analito En lugar de la señal S, se utiliza la
problema SP: señal del señal del analito relativa a la del
patrón patrón S/SP como dato experimental
interno para hacer rectas de calibrado y
medir muestras problema (el patrón
siempre a la misma concentración)

S/SP
Recta de
calibrado

Concentración de analito