3.4.

1 ESTUFAS DE CULTIVO
ESPECIALES
Sistemas de Laboratorio y Hemodiálisis
EC2A

Sistemas de laboratorio y hemodiálisis EC2A 1

 INCUBADORA SOBREMESA

Para realizar la técnica de

reproducción asistida llamada
“fecundación in vitro”,
necesitamos extraer los óvulos de
la mujer y fecundarlos en el
laboratorio. Los embriones
obtenidos serán transferidos de
nuevo a la mujer.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Mientras tenemos óvulos y
embriones fuera del cuerpo de la
mujer, necesitamos una
incubadora. Las incubadoras
típicas de laboratorio son como
neveras de grande. En la misma
incubadora se cultivan los
embriones de muchos pacientes

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 INCUBADORA SOBREMESA
¿Qué necesita un embrión para
ser cultivado in vitro?
Los óvulos y embriones humanos
necesitan principalmente cuatro
condiciones indispensables para
ser cultivados in vitro:

Control de temperatura: Deben

estar a 37ºC
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 INCUBADORA SOBREMESA
Control de osmolaridad: La
osmolaridad viene controlada por
la concentración de sales en el
medio de cultivo. Esto se controla
adquiriendo medios de cultivo
comerciales que certifican la
osmolaridad de los medios y son
testados para su uso con
embriones humanos.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Control del pH: Los embriones
humano necesitan un pH de
entre 7.3 y 7.4. Esto se consigue
con unas sustancias que llevan los
medios de cultivo que se llaman
tampones. Para que estos
tampones funciones, la atmósfera
de las incubadoras deben
contener un 6% de CO2 en lugar
del 0.03% que contiene el aire.
Sistemas de laboratorio y hemodiálisis EC2A 6
 INCUBADORA SOBREMESA

Por tanto, necesitamos

botellas de CO2
comprimido que inyecten y
controlen la cantidad de
CO2 dentro de las
incubadoras.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Control de humedad: Para evitar
que el medio de cultivo se
evapore, necesitamos una
humedad alta. Para conseguir
mantener la humedad del cultivo,
cubrimos de aceite mineral las
gotitas de cultivo donde
cultivamos los embriones.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Inconvenientes de las
incubadoras clásicas
La forma en la que antes se
cultivábaban los embriones no
era del todo eficiente. Las
incubadoras ocupaban mucho
espacio y las condiciones del
cultivo no eran idóneas.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Al incubar todos los pacientes en
el mismo espacio, necesitábamos
abrir la misma puerta de la
incubadora cada vez que
necesitábamos chequear la
evolución de los embriones de
cada paciente.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Estas aperturas continuas hacían que a la
incubadora no le diera tiempo de reequilibrarse y
recuperar la temperatura y la atmósfera de cultivo.
Todo esto hacía que el cultivo se viera
perjudicado.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Para estos casos se han creado las incubadoras de
sobremesa o “sandwicheras” que tienen dos
grandes revoluciones:
• La reducción del espacio
de cultivo. De esta
manera el volumen de
cultivo que tiene que
recuperar las condiciones
de temperatura y
atmósfera de CO2
(para controlar el pH)
Sistemas de laboratorio y hemodiálisis EC2A 12
 INCUBADORA SOBREMESA

• El cultivo individualizado. En la
actualidad tenemos una
puerta para cada paciente.
De esta manera sólo se abre
una vez y no afecta al cultivo
del resto de pacientes.

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 INCUBADORA SOBREMESA
Estos cambios se han conseguido con las incubadoras
de sobremesa, que
además de ocupar
menos espacio,
consumen menos CO2
para estabilizar el pH.

https://www.youtube.com/watch?v=R4WbH21_3yk

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 INCUBADORA DE ESPORAS
En esterilizadores de vapor, los
Controles Biológicos son cultivos de
microorganismos no patógenos en
forma de esporas que ofrecen gran
resistencia a los agentes esterilizantes.
Es el único sistema fiable que nos
asegura la destrucción total de los
microorganismos.

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 INCUBADORA DE ESPORAS
¿Cómo funcionan?

Los indicadores biológicos son

preparaciones estándar (conforme a
la normativa EN866) de
microorganismos en forma de esporas
de Bacillus Stearothermophilus, que
está especialmente indicado porque:

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 INCUBADORA DE ESPORAS

Es uno de los microorganismos más

resistentes al calor húmedo
• No es patógeno
• No es tóxico
• No es pirógeno

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 INCUBADORA DE ESPORAS
¿Qué debemos hacer?
Los indicadores, que se suministran
en tiras de papel o en frascos, se
pueden embalar en una bolsa doble
y colocarlos en la cámara, en los
puntos más críticos del proceso (las
esquinas de cámara y el conducto
de salida del aire) para detectar la
posible formación de burbujas de
aire.
Sistemas de laboratorio y hemodiálisis EC2A 18
 INCUBADORA DE ESPORAS

Si los microorganismos no están vivos

(informe «Negativo»), significa que el
proceso de esterilización ha sido eficaz.

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 INCUBADORA DE ESPORAS
¿Como realizar el test biológico?
Se coloca el test dentro de un paquete, que irá pasar
por el ciclo de esterilización de
la autoclave. Normalmente
los hospitales lo utilizan en el
primer ciclo, y coloca el
paquete test en el punto mas
frio de la autoclave, que es
abajo junto al dreno.

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 INCUBADORA DE ESPORAS
Terminado el ciclo, se abre el paquete
se recupera el tubo plástico, se
aguarda15 min. para que enfríe y
pierda la presión. Se Aprieta la
ampolla plástica (activación)
consecuentemente se quiebra la
ampolla de vidrio interna, exponiendo
las esporas al medio de cultivo.

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 INCUBADORA DE ESPORAS
Se coloca para incubar el indicador
test, que paso por esterilización, en
incubadora propia junto con otro
indicador de control. El indicador de
control no se coloca en el autoclave,
pero debe ser activado de la misma
forma. La finalidad es probar tanto la
viabilidad de las esporas como verificar
si la incubadora esta funcionando
correctamente.
Sistemas de laboratorio y hemodiálisis EC2A 22
 INCUBADORA DE ESPORAS
El resultado esperado es que la
ampolla de control cambie de
color morado a amarillo. Este
cambio de color es dado por la
alteración del pH de la solución
que resulta de la actividad
microbiana.

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 INCUBADORA DE ESPORAS
La ampolla test no debe mudar de
color, pues lo esperado es que los
microorganismos hayan sido destruidos
en el proceso de esterilización en la
autoclave. La lectura final es realizada
después de 24 a 48h de incubación de
los indicadores.

https://www.youtube.com/watch?v=Z2pI_YCPjys

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 FIN

3.4.1 ESTUFAS DE CULTIVO

ESPECIALES

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