SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE Versión: 01

SISTEMA INTEGRADO DE GESTIÓN

Código: 01
INFORME DE LABORATORIO
PREPARACIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES Y MEDIOS DE
CULTIVO

Programa Tecnología en química aplicada a la industria

Competen Aplicar procesos mediados por microorganismos de acuerdo con
cia protocolos establecidos en la organización. Código 291201043
Resultado Manejar equipos y materiales propios del proceso
de biotecnológico de acuerdo con recomendaciones del fabricante
aprendizaj y protocolos establecidos por la empresa.
e

Fecha 27 de febrero de 2020

Paola Brito Sierra 1.128437.254
Aprendi
z

1. Nombre cada uno de los equipos y materiales que se presenta a

continuación:

1 Micropipeta 8 Cámara de flujo laminar

2 Erlenmeyer 9 Incubadora
3 Tubos de ensayo 10 Probeta
4 Balanza Analítica 11 Beaker
5 Autoclave 12 Toallas de papel
6 Caja petri 13 Pipeteador
7 Pipeta graduada 14 Mechero

2. ¿Cuál es la función de la autoclave? Describa en un diagrama los

pasos más importantes asociados a su uso.
Un autoclave es un recipiente metálico de paredes gruesas con cierre
hermético que permite trabajar con vapor de agua a alta presión y alta
temperatura, que sirve para esterilizar material médico o de laboratorio.

Muchos autoclaves se usan para esterilizar equipos y suministros

sometiéndolos a vapor de agua saturado a alta presión a 121 °C durante
alrededor de 15 a 20 minutos dependiendo del tamaño de la carga y el
contenido. El autoclave fue inventado por Charles Chamberland en 1879.

La esterilización con vapor de agua es el método más efectivo, ya que actúa

coagulando las proteínas de los microorganismos llevando así a su
destrucción.

 Uso
ETAPA FUNCIONALIDAD
Puesta en marcha Se cierran las puertas
herméticamente para que la cámara
quede sellada.
En esta fase se eliminará el aire
contenido en la cámara y
Expulsión de aire se favorecerá a la eliminación
posterior del aire dentro de los
paquetes y de los
contenedores. Para ello se inyecta
vapor en la cámara y se activa el
sistema de vacío.
Para la extracción del aire de los
productos y de la cámara, se realiza
Preparación una serie de fases (hasta cuatro) de
inyección de vapor (de recámara
a cámara) seguidas de fases de
vacío (prevacío), mediante el
sistema de vacío, para eliminar
completamente el aire restante.
Se introduce vapor en la cámara y
Calentamiento en el interior de los contenedores,
hasta alcanzar la temperatura y
presión de esterilización.
Se mantiene constante la
Esterilización temperatura y presión en la cámara
durante el correspondiente tiempo
de esterilización.
El vapor de la cámara es eliminado
Desvalorización por el sistema de vacío y se produce
un descenso de la presión.
Se inicia un vacío final, profundo y
duradero. Se mantiene el vapor en la
 Secado recámara, para mantener caliente la
cámara y ayudar a secar el
producto a fin de evitar todo tipo de
recontaminación bacteriana durante
el transporte y el almacenamiento.

Entrada de aire atmosférico a la

Igualación
Finalización del Proceso
cámara, a través de un filtro de aire
estéril, para compensar la presión de
la cámara (que estaba en
depresión) con la atmosférica. El
vapor utilizado se condensa y se
convierte en agua transportándose a
un depósito.
Se liberan las puertas para que
puedan ser abiertas.

3. ¿Para qué se usa una incubadora?

Una Incubadora de laboratorio es un dispositivo utilizado para cultivar y

mantener cultivos microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora
mantiene una temperatura y humedad optima garantizando también otras
condiciones tales como el dióxido de carbono (CO 2) y contenido de oxígeno
presente en la incubadora. Las incubadoras de laboratorio son esenciales para
una gran cantidad de trabajos experimentales enfocados a la biología celular,
microbiología, y biología molecular.

4. ¿Cuál es la función de una cabina de flujo laminar?

Es un sistema diseñado para proporcionar un caudal de aire a través de un

filtro, direccionándolo hacia la parte inferior de la cabina y recirculando al
ambiente por la parte frontal, creando una presión que protege la muestra de
la contaminación.

5. ¿Cómo se clasifican los medios de cultivo según su consistencia?

¿Para qué sirve cada uno?
 Medios Líquidos: se utilizan preferentemente para favorecer el
desarrollo bacteriano de células estresadas. En determinadas ocasiones no
se pueden sustituir por los medios sólidos.
 Medios Sólidos: se utilizan para obtener bacterias aisladas por la
formación de colonias sobre la superficie del medio de cultivo y para el
estudio de la morfología de las colonias, lo que no permiten los medios
líquidos. Se diferencian porque tienen una sustancia de sostén, que puede
ser agar-agar.
 Medios Semisólidos: se utilizan para estudiar la motilidad de las
bacterias. Tienen un menor porcentaje de agar, por lo que no solidifican
 totalmente a la temperatura ambiente.

6. ¿Cómo se clasifican los medios de cultivo según su función?

¿Para qué sirve cada uno?

 Comunes o universales: Su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los

microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para mantener
colonias microbianas.

 Enriquecidos: Están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual se le
puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos. Se utiliza para
microorganismos que tienen grandes exigencias nutricionales.

 Selectivos: Son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones físicas
del medio ya sea añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con el fin de
inhibir el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio
sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibiendo el de otros. Se
utiliza para seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas.
7. ¿Qué cantidad en gramos (g) de agar nutritivo debo pesar, para
preparar 500 mL de medio? NOTA: según las instrucciones del
fabricante por cada 1000 cm3 de agua se deben agregar 0.034 kg
de agar nutritivo.

1 mL = 1 cm3

Aplicando regla de 3, tenemos:

Sí para : 1000 mL → 0,034 kg

500 mL → X
Despejando X, tenemos:

500 mL∗0,034 kg
∗1000 g
1000 mL
X= =17 g
1 kg

Se necesitan 17 g agar nutritivo para preparar 500 mL de medio.

8. ¿Cuáles son los métodos más corrientes utilizados para esterilizar

material de laboratorio?

La esterilización puede conseguirse usando calor, productos químicos y

radiación. El método a elegir dependerá del material a esterilizar y del equipo
e instalaciones disponibles. La esterilización del material de laboratorio es un
proceso que permite eliminar la carga microbiana patógena y no patógena,
incluidas las esporas, de productos e instrumentos que lo requieran como el
instrumental médico o los medios de cultivo.

Los materiales considerados críticos deben esterilizarse, los semi-

criticos deben someterse a una desinfección de alto nivel y los no-
críticos deben limpiarse y someterse a una desinfección de bajo nivel.

El método a elegir dependerá del material a esterilizar y del equipo e

instalaciones disponibles. Entre los más empleados tenemos:

o Autoclave
o Vía seca
o Métodos químicos
o Radiaciones ionizantes
9. Describa los componentes del medio de cultivo que le
correspondió preparar a su equipo. Indique además cual es la
fuente de carbono y energía, la fuente de nitrógeno,
micronutrientes y factores de crecimiento si los hay.
10. Con base en las instrucciones que se encuentran en medio de
cultivo que le asignaron a su equipo de trabajo. Describa paso a
paso el método de preparación (puede usar ilustraciones)