Ciclo de los ácidos tricarboxílicos

1. Suponga que dispone de glucosa marcada en C2 con 14C. Siga el curso del carbono marcado a través de la
glucólisis y del ciclo del ácido cítrico. ¿En cuál paso se liberará 14CO2? ¿Cuántas vueltas del ciclo se requieren para la
oxidación de todos los carbonos marcados? Repita el ejercicio con el piruvato con 14C en su grupo metilo.
Resp: 14C2: En la segunda vuelta, 14C1: A partir de la tercera vuelta. En ambos casos en aquellos pasos catalizados por la isocitrato
deshidrogenasa y α-ceto-glutarato deshidrogenasa (únicas descarboxilaciones).

2. La forma reducida de la dihidrolipoil deshidrogenasa (E 3H2), pero no su forma oxidada (E3), reacciona con yodo
acetato (ICH2COO-) inactivando la enzima. Explique por qué esto ocurre.
Resp: la enzima E3 posee dos grupos tiol catalíticos, que se oxidan durante la transferencia de electrones al NAD+

3. Calcule ∆G a condiciones fisiológicas (25°C y pH= 7) para la reacción catalizada por la isocitrato
deshidrogenasa, sabiendo que la razón es NAD+/NADH=8, [α-cetoglutarato]=0.1 mM y [isocitrato]=0.02mM. Asuma
que ∆G°´=-21 kJ/mol incluye la concentración de CO2. Explique si este es un punto adecuado para ejercer un control
metabólico en el ciclo de Krebs.
Resp: ∆G=-22.16 kJ/mol; Si, es un punto susceptible de control metabólico, ya que es un paso que está alejado del equilibrio

4. El malonato actúa como un inhibidor competitivo en la reacción catalizada por la succinato deshidrogenasa.
Dibuje el gráfico de los inversos (1/v vs 1/s) que sería obtenido usando tres diferentes concentraciones de malonato
(baja, media, alta). Explique cómo un aumento en la concentración de oxalacetato puede superar la inhibición por
malonato.
Resp: Las rectas se interceptan en la ordenada. La velocidad de la vía es en parte controlada por la disponibilidad de oxalacetato, su
adición provocará un aumento en la concentración de succinato,

5. Durante la segunda guerra mundial se utilizó como gas venenoso la Lewisita, un compuesto derivado del
acetileno y el arsénico. Su antídoto, denominado antilewita británica, fue desarrollado en tiempo récord por
bioquímicos británicos y estadounidenses usando un enfoque basado en un profundo conocimiento del
metabolismo celular. Explique, el efecto de la lewisita en el catabolismo de los carbohidratos y cómo ejerce su acción
terapéutica la antilewisita británica.
Pista: lea el artículo en la página: http://www.chm.bris.ac.uk/motm/bal/development.html . Recuerde oprimir el botón next .

6. Una célula eucariota puede utilizar glucosa (C6H12O6) y ácido hexanoico(C6H14O2) como fuente de energía.
Basándose en su formulas estructurales, ¿Qué sustrato libera mayor cantidad energía?
Resp: La razón H/C del ácido hexanoico es 11/6, mientras que en el caso de la glucosa es 7/6, con lo cual el ácido hexainoico está más
reducido y libera más energía durante su oxidación total.

7. En individuos con una carencia de tiamina en su dieta, se ha detectado una elevada concentración de piruvato
en la sangre. Expliqué en términos bioquímicos.
Pista: La tiamina es el precursor del TTP (grupo prostético de la PDH y la α-cetoglutarato deshidrogenasa).

8. El fluoroacetato es un veneno utilizado para el control de roedores. Después de ingresar en la célula se

convierte en fluoroacetil-CoA por la acción de la enzima acetato-tioquinasa. El efecto tóxico de este compuesto fue
estudiado en células de corazón de ratas perfundidas con fluoroacetato 0.22 µm, en donde disminuyó la velocidad
de captación de glucosa y de la glucólisis. Al mismo tiempo se acumulo glucosa 6-fosfato y fructosa 6-fosfato. Un
análisis de los intermediarios del ciclo del ácido cítrico, revelo que todos los intermediarios se encontraban en un
nivel bajo el normal a excepción del citrato cuya concentración fue 10 veces lo normal.

i). ¿Qué enzima se vio bloqueada?

Dr. Carlos Vera

ii). El fluoroacetil-CoA se transforma enzimáticamente en el ciclo del ácido cítrico. ¿Cuál es la estructura del producto
formado por la metabolización del fluoroacetato?¿Por qué bloquea el ciclo de Krebs?¿Cómo se podría superar la
inhibición?
iii) ¿Por qué se acumulan intermediarios de la glucólisis?
iv) ¿Por qué el envenenamiento por fluoroacetato es letal?
Resp: i) Aconitasa ii) fluorocitrato, un inhibidor competitivo de la aconitasa. Un incremento en el citrato reduce la inhibición. iii) Citrato
inhibe la PFK, causando la acumulación de F6P y G6P/ iv) G6P inhibe la HK. El fluoroacetato bloquea la glicólisis y el ciclo de Krebs
impidiendo la generación de ATP

9. La producción industrial de ácido cítrico a partir de sacarosa se lleva a cabo mediante el cultivo controlado de
Aspergillus niger. El rendimiento del proceso depende fuertemente de la concentración de FeCl 3 en el medio de
cultivo, tal como se muestra en el gráfico. ¿Por qué el rendimiento baja cuando la concentración de Fe 3+ es menor o
mayor que el valor óptimo? Escriba la secuencia de reacciones para la producción de ácido cítrico a partir de
sacarosa. Con base en esto último, señale si el proceso es llevado a cabo en condiciones aeróbicas o anaeróbicas.
Pista: La aconitasa pose un Cluster 4Fe-4S. Para que se acumule citrato, la velocidad de la aconitasa debe ser menor que la de citrato
sintasa.
Resp: Sac+H20+2Pi+ADP+6NADH+→2 citrato+2ATP+6NADH+10H+ (Considere la Piruvato carboxilasa) /Aeróbico. Note que se
requieren regenerar 3NADH por hexosa.

10. A pesar de que el ciclo de Krebs no requiere directamente de O2. ¿Por qué ocurre sólo en condiciones aerobias?
Resp: El ciclo de Krebs produce altas cantidades de NADH, el cual si se acumula inhibe a la α-ceto-glutarato dehidrogenenasa
bloqueando el ciclo.

11. El sabor agrio de algunos vinos es debido a elevadas concentraciones de L-malato. Escriba la secuencia de
reacciones que permiten a las levaduras sintetizar L-malato a partir de glucosa y del CO2 disuelto (HCO3-) en
condiciones anaerobias. Tenga presente que la reacción global no puede alterar el balance NADH/NAD+ o consumir
intermediarios del ácido cítrico.
Resp: Glu+2C02 →2L-Malato +2NAD+.

Dr. Carlos Vera