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El diario de la planta (2001) 27 (6), 489 ± 501

NÚMERO ESPECIAL DE GM

Desarrollo y uso comercial de Bollgarda algodón en los EE. UU.

± promesas tempranas frente a la realidad actual
Frederick J. Perlak *, Mark Oppenhuizen, Karen Gustafson, Richard Voth, Saku Sivasupramaniam, David Heering, Boyd
Carey, Robert A. Ihrig y James K. Roberts
Monsanto Company, Chester®eld, MO 63198, EE. UU.

Recibido el 13 de marzo de 2001; revisado el 22 de junio de 2001; aceptado el 28 de junio de 2001.

* Para correspondencia (fax + 1636737 6662; correo electrónico frederick.j.perlak@monsanto.com ).

Resumen

Bollgarda el algodón es la marca registrada otorgada a una serie de variedades de algodón bio-diseñado para producir una
proteína insecticida a partir de Bacilo turingiensico (Bt). Cuando es producida por las plantas de algodón modificadas, esta
proteína controla ciertas plagas de insectos lepidópteros del algodón. Comercialmente disponibles desde 1996, estas
variedades de algodón se compran bajo un acuerdo de licencia en el que los productores pagan una tarifa y aceptan cumplir
con los términos, que incluyen una licencia de 1 año para usar la tecnología y un acuerdo para participar en un programa de
manejo de la resistencia a los insectos. . Hoy, Bollgarda el algodón se cultiva en más de un tercio de toda la superficie cultivada
de algodón en los Estados Unidos. Este producto ha reducido los costos de producción de algodón y el uso de insecticidas al
proporcionar una alternativa eficaz a los insecticidas químicos para el control del gusano de los cogollos del tabaco.Heliothis
virescens; gusano de algodón, Helicoverpa zea; y gusano rosado, Pectinophora gossypiella. La especificidad y el perfil de
seguridad de la proteína Bt producida en planta en algodón se mantuvo. Ha conservado su selectividad por los insectos
lepidópteros y carece de las características que se encuentran en las proteínas alergénicas potenciales. La calidad de la fibra,
las características agronómicas de la planta y la composición de la semilla permanecen inalteradas. Se está desarrollando una
nueva tecnología de algodón para proporcionar un mejor control de insectos y un espectro de actividad más amplio. Estos
productos futuros podrían reducir aún más el uso de insecticidas en la producción de algodón, manteniendo al mismo tiempo
el alto nivel de seguridad y confiabilidad que ha sido demostrado por cinco temporadas de Bollgard.a uso de algodón.

Palabras clave: Bacilo turingiensico, producción de algodón, cultivos transgénicos, control de insectos.

Introducción

La promesa de la ingeniería genética, una herramienta tecnológica que surgió
de los laboratorios de biología molecular en la década de 1970, alimentó el
optimismo, el entusiasmo y la inversión en la década de 1980. Fue visto como
una herramienta para abordar los misterios de la medicina y se planteó la
hipótesis como una forma de "diseñar" una dependencia reducida de los
combustibles fósiles. Era una forma de abordar cuestiones relacionadas con la
producción de alimentos, como hacer que los alimentos fueran más saludables
y nutritivos, reducir los efectos del estrés ambiental en el rendimiento de los
cultivos y disminuir la dependencia de los plaguicidas en las granjas. Después
de este aumento inicial de posibilidades, la dificultad de llevar al mercado
productos novedosos genéticamente modificados se afianzó en la década de
1990. Pocos conceptos sobrevivieron a las duras realidades de la practicidad, la
rentabilidad y la utilidad, al menos a corto plazo. Los pocos agrícolas
los conceptos que evolucionaron a productos comerciales en
esta década incluyen la tolerancia a herbicidas en soja, canola,
maíz y algodón; resistencia a virus en patatas y calabazas; y
resistencia a plagas de insectos específicas en maíz, papas y
algodón.
Bollgarda El algodón, diseñado biológicamente para resistir las plagas
de insectos lepidópteros, ha tenido un efecto dramático en la producción
de algodón. El concepto de producto principal fue sencillo.
Bacilo turingiensico (Bt), un microorganismo que se encuentra en el
suelo, era conocido por producir un insecticida proteico potente,
específico y seguro (Baum et al., 1999; Dulmage, 1981). Esta proteína
estaba bien caracterizada, considerada segura y específica para la
clase de insectos lepidópteros. Al introducir la información genética
que codifica la proteína insecticida de Bt en

a 2001 Blackwell Science Ltd 489

490 Frederick J. Perlak et al.
plantas, estas plantas producirían su propio insecticida. Este
concepto simple prometía reducir las aplicaciones de insecticidas,
mejorar el control de insectos y brindar oportunidades para
sistemas agresivos de manejo integrado de plagas mientras se
mantiene la seguridad inherente de esta proteína insecticida. El
desarrollo de Bollgarda El algodón requirió superar varios obstáculos
técnicos importantes imprevistos cuando el concepto de producto se
propuso originalmente a principios de la década de 1980. Entre
estos se encontraban preocupaciones con los niveles deen planta
Expresión del gen Bt (Fischhoff et al., 1987); un programa de manejo
de la resistencia (Fischhoff, 1992); idoneidad de esta tecnología para
los sistemas de producción de algodón (Jenkinset al., 1993; Wilsonet
al., 1992); y estudios de riesgo ± beneficio ambiental, confirmación
de seguridad en insectos no objetivo, estudios de seguridad de
alimentos y piensos y estudios de persistencia y destino de la
proteína Bt (Betzet al., 2000). También se requirió un análisis para
confirmar que no había diferencias sustanciales en las propiedades
del algodón modificado por bioingeniería para resistir a los insectos.
Las características de crecimiento de las plantas de algodón
transformadas, las propiedades de sus semillas (aceite, proteína,
carbohidratos; Fuchset al., 1993), y se estudió de cerca la
germinación de las semillas en el campo. Se estudiaron
características de calidad como longitud, resistencia y micronaire o
grosor y usabilidad del ®ber para determinar si la expresión de Bten
planta,
directa o indirectamente, afectó la calidad de las características
inherentes de las variedades de algodón ofrecidas comercialmente
(Etheridge y Hequet, 2000; Jenkins et al., 1997; Jones
et al., 1996).
Habiendo superado estos desafíos técnicos, Bollgarda
El algodón se comercializó con éxito en 1996 y se plantó en 1,8 millones
de acres de algodón de EE. UU. (12% de la superficie de algodón de EE.
UU.) en su primer año de disponibilidad comercial. Adopción de Bollgarda
El algodón en los Estados Unidos ha crecido cada año a más de un tercio
de la superficie cultivada con algodón en los Estados Unidos en 2000 (más
de 4 millones de acres). La mayoría de las promesas iniciales de esta
tecnología se han cumplido. El uso de Bollgarda el algodón reduce el uso
de insecticidas químicos (Carpenter, 2001). Bollgarda ha sido responsable
de mejores rendimientos de algodón en comparación con el algodón
convencional rociado con insecticidas. Es una alternativa económica, más
segura y de mayor rendimiento que los insecticidas químicos para el
control del gusano de los cogollos del tabaco (Heliothis virescens),
el gusano rosado de la cápsulaPectinophora gossypiella) e
infestaciones moderadas de gusano del algodón (Helicoverpa zea).
Se ha implementado un agresivo programa de manejo de la
resistencia de los insectos, previsto en 1991 (Fischhoff, 1992) y
diseñado para retrasar el desarrollo potencial de la resistencia de los
insectos al Bt. Las características del algodón no se han alterado
como resultado de la adición del gen Bt que produce la proteína Bt.
La calidad de la fibra, la agronomía de las plantas y la composición
de las semillas permanecen inalteradas. La especificidad y el perfil
de seguridad de la proteína Bt producidaen planta en algodón se
mantuvo, y después de 5 años de uso comercial la seguridad
a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501
y eficacia de Bollgarda el algodón se aprecia en el
mercado.
El movimiento del concepto de producto original a la
comercialización fue posible gracias a la amplia participación de
la comunidad de investigación del algodón, que incluía
universidades, agencias gubernamentales, productores y
participación empresarial. Las mejoras en este producto son
posibles a medida que se disponga de nuevas proteínas,
promotores y sistemas de expresión. Estos nuevos productos en
desarrollo con la comunidad de investigación del algodón están
destinados a mantener la seguridad y conveniencia de Bollgard.a
algodón al tiempo que aumenta el espectro de actividad de los insectos y la
utilidad de las variedades de algodón de bioingeniería disponibles para los
cultivadores de algodón.
Clonación y expresión de genes Bt en E. coli
El potencial de la ingeniería genética para mejorar la agricultura
se reconoció a principios de los años ochenta. Tanto las
empresas agrícolas establecidas como las empresas de
tecnología emergente iniciaron programas para identificar
formas de aplicar los nuevos desarrollos en ingeniería genética
a los problemas agrícolas persistentes. La visión de introducir
un gen de Bt en las plantas para brindar protección contra las
lesiones causadas por insectos era un objetivo común. El primer
informe de clonación y expresión de un gen Bt enEscherichia
coli por el laboratorio de Helen Whiteley (Schnepf y Whiteley,
1981) indicó que, aunque la proteína Bt parecía expresarse en
Bt bajo el mismo control de expresión génica que la
esporulación, la expresión de una cry1Aa gen en E. coli fue
logrado. La proteína retuvo la actividad insecticida cuando se
expresó enE. coli, y posteriormente se informó que el
"truncamiento" limitado del gen (Schnepf y Whiteley,
1985) resultó en una proteína truncada que retuvo la
actividad insecticida. Se han identificado muchos otros
genes Bt, y ahora se aprecia la rica diversidad de genes
Bt y sus proteínas (Aronsonet al., 1986; Crickmoreet al.,
1998; Hofte y Whiteley, 1989).
Expresión de genes de proteínas insecticidas nativas de Bt en
plantas
La expresión de genes Bt para el control efectivo de insectos en
plantas no fue tan simple como se anticipó originalmente.
Aunque los genes Bt podrían clonarse, expresarse en bacterias
y usarse para construir genes quiméricos que se insertaron en
plantas, los niveles de expresión de secuencias codificantes de
Bt nativas en plantas fueron decepcionantes (Fischhoffet al.,
1987). La expresión fue mucho menor en plantas de lo que
se hubiera predicho en base a la experiencia limitada con
otros genes bacterianos como la neomicina
fosfotransferasa (Vaecket al., 1987).
Los primeros estudios en la década de 1980 se centraron en el trabajo de
expresión del gen Bt en el tabaco y el tomate (Barton et al., 1987; Fischhoff

et al., 1987; Vaecket al., 1987). Se descubrió que estas especies se
transformaban fácilmente, crecían rápidamente y podían cultivarse
fácilmente en cámaras de crecimiento o invernaderos en macetas
pequeñas. Eran muy susceptibles al ataque de insectos por varias
plagas de lepidópteros que eran fáciles de criar (gusano del tabaco,
Manduca sexta, y gusano de los cogollos del tabaco) y muy sensible
a las proteínas Bt (MacIntosh et al., 1990). Varios genes quiméricos
que comprenden un promotor vegetal, una secuencia codificante de
Bt de longitud completa y un 3¢ Se informó que la región no
traducida para la adición de poliadenilación no tiene expresión
detectable en el tabaco y niveles muy bajos en el tomate.
Truncamiento de la secuencia de codificación de Bt mediante la
eliminación de aproximadamente 3¢ la mitad de la secuencia
codificante mejoró la expresión hasta el punto en que la proteína y el
ARN mensajero se pudieron detectar de manera confiable. Este
trabajo, junto con otros estudios de este período, ha sido revisado
en varias publicaciones (Diehnet al., 1996; Estruchet al.,
1997; Mazieret al., 1997).
Los ensayos de laboratorio con insectos indicaron que se
retuvieron las actividades insecticidas de los genes Bt expresados
en plantas. En las primeras pruebas de campo de plantas Bt en 1987,
los tomates transformados con una versión truncada del
cry1Ab Gusano cuerno del tabaco completamente controlado, lo que
confirma pruebas de laboratorio previas (Perlak y Fischhoff,
1993). Se observó que hubo una reducción significativa en el
daño del tomate debido al gusano del fruto del tomate (H. zea).
Aunque el control de estas dos plagas en una situación de
campo fue alentador y confirmado por pruebas de campo
posteriores (Delannay et al., 1989), se consideró que la
expresión del gen Bt era demasiado baja para tener un éxito
comercial de forma constante. Se informó que la expresión de
genes Bt truncados en el algodón era muy baja, y una prueba
de campo indicó que no había control del gusano de las yemas
en el campo o cuando las muestras de plantas del campo se
analizaron en el laboratorio (Jenkinset al., 1991).
Genes sintéticos Bt y aumento de la expresión del gen Bt en
plantas
Los primeros informes publicados de en planta La expresión del gen Bt
sintético estaba en algodón (Perlak et al., 1990). Los niveles de proteína de
control de insectos (proteína Bt) aumentaron dramáticamente desde
niveles indetectables con el gen de tipo salvaje, a
0,05 ± 0,1% de proteína soluble total en plantas con el
gen sintético. En una publicación posterior (Perlaket al.,
1991) se describieron con mayor detalle las modificaciones
esenciales de los genes sintéticos de Bt para aumentar la expresión
de las plantas. La evidencia indicó que las secuencias señal de
poliadenilación potenciales estaban presentes en un segmento
relativamente pequeño de la secuencia (30 pb) que parecía estar
asociado con niveles más bajos de expresión. La alteración de esta
secuencia aumentó la expresión significativamente (10 veces). Otros
confirmaron este trabajo (Van der Salmet al., 1994). Se diseñó y
construyó un gen Bt resintetizado que
a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501
Desarrollo y uso de Bollgarda algodón 491
carecían de secuencias señal de poliadenilación potenciales,
áreas de riqueza A ± T y secuencias ATTTA. El uso de codones de
plantas también se consideró en el diseño de este gen sintético.
Las plantas mostraron aumentos significativos en los niveles de
proteína Bt y en la producción de ARNm, y se concluyó que
varios factores y regiones del gen estaban involucrados en los
bajos niveles de proteína de control de insectos observados con
los genes Bt nativos en las plantas. Investigaciones recientes
han confirmado que la poliadenilación prematura contribuye a
la mala expresión de los genes Bt en las plantas (De Rocheret
al., 1998; Diehnet al., 1998).
El resultado más dramático de las plantas de algodón descritas en una
publicación temprana (Perlak et al., 1990) fue el aumento en el control de
insectos. Las pruebas de invernadero que simularon una fuerte presión
de insectos en el campo mostraron una protección notable (70 ± 87%) en
condiciones en las que la mayoría (88 ± 100%) de las cápsulas y cuadrados
(flores de algodón) de las plantas de control fueron destruidas por el
gusano de la cápsula del algodón. Sería necesario realizar pruebas de
campo y cribado para identificar un evento algodonero transformado
adecuado para la comercialización, pero estos resultados preliminares
fueron muy alentadores.
Desarrollo de Bollgarda algodón
Selección de una línea de algodón transformada
para su comercialización.
El informe sobre el algodón resistente a los insectos (Perlak et al.,
1990) marcó el comienzo de un programa de análisis detallado y
extenso para seleccionar una línea que sería adecuada para
retrocruzamiento y eventual comercialización. Los datos de eficacia
inicial se recopilaron de un número limitado de eventos o líneas de
plantas individuales, descendientes de una sola planta después de la
transformación y regeneración. Antes de la comercialización se inició
un programa mucho más amplio, con cientos de plantas de algodón
transformadas.
Se informó que el algodón se había regenerado (Trolinder
y Goodin, 1987) y transformado (Firoozabady et al.,
1987; Umbecket al., 1987) por Agrobacterium-transformación
mediada, aunque solo a frecuencias muy bajas y esencialmente solo
en los antecedentes de variedades de algodón Coker. El proceso fue
muy largo (12 ± 18 meses desde la infección bacteriana hasta las
plantas) y muy laborioso (estimado en 60 ± 80 horas hombre por
planta). Debido al requisito de antecedentes de Coker para la
transformación, se requirió un programa de retrocruzamiento con
germoplasma de algodón de élite para producir variedades
comerciales, lo que alargó aún más el tiempo de comercialización. Se
estableció un gran programa de transformación del algodón para
seleccionar una línea de algodón que tuviera buenos niveles de
expresión del gen Bt y características agronómicas deseables. El
gran número de eventos transformados iniciales permitió realizar
pruebas exhaustivas de las combinaciones de promotor ± gen
estructural. El trabajo de expresión del gen Bt a principios de la
década de 1990 (Wonget al., 1992) informó que altos niveles de
492 Frederick J. Perlak et al.
la expresión del gen Bt fue posible en el tabaco. Sin embargo, los
repetidos intentos de extender estos resultados al algodón no
tuvieron éxito. Se ensayó un gran número de vectores de secuencia
codificante de Bt sintéticos de longitud completa, así como versiones
truncadas de la secuencia codificante de Bt, en ensayos de
invernadero y en el campo.
Programa de pruebas de campo precomerciales
El programa de pruebas de campo fue altamente regulado por el
Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA) y la
Agencia de Protección Ambiental (EPA). Involucró a investigadores
clave del USDA y universidades de estados productores de algodón.
Las regiones algodoneras de EE. UU. Representan una amplia
diversidad de climas y plagas de insectos. Las pruebas localizadas de
idoneidad del producto son un aspecto importante del proceso de
comercialización.
Las primeras pruebas de campo se realizaron con plantas que
expresan genes Bt truncados y fueron principalmente pruebas de
eficacia (Jenkins et al., 1997). Estos resultados indicaron un excelente
control del gusano de los cogollos del tabaco y se podría lograr un
buen control del gusano del algodón (Benedictet al., 1996; Rummel
et al., 1994; Wilsonet al., 1992). Las características agronómicas clave
como el rendimiento, la calidad de la pelusa, la morfología y otros
factores se evaluaron en pruebas de campo. El alcance de las pruebas se
amplió cuando el gen Bt se cruzó de nuevo con variedades de algodón de
élite. Más pruebas y experiencia después de la comercialización (Jenkinset
al., 1997) indicó que la protección de las plantas de algodón contra los
daños causados por el gusano de los cogollos del tabaco era muy buena,
pero que ocasionalmente se requerían algunas aplicaciones de insecticida
en condiciones de alta infestación de insectos por el gusano de la cápsula
del algodón. Estos resultados fueron consistentes con informes
publicados anteriormente (Mahaffey
et al., 1994). También se señaló que algunas líneas de algodón
exhibían una interacción genotipo por evento. Finalmente, se eligió
un solo evento, Monsanto 531, como el evento del que todos los
Bollgard actualesa las variedades de algodón han descendido. Esta
línea de algodón se transformó con un vector que contiene un
material sintético de longitud completa.cry1Ac-como la secuencia de
codificación Bt impulsada por un promotor 35S mejorado (Kay et al.,
1987). Esta línea exhibió un control constante de insectos diana en el
invernadero y el campo, y muy buenas características agronómicas
en una amplia variedad de variedades de algodón que fueron
retrocruzadas con la línea de algodón transformada original.
Bollgard comerciala Las variedades de algodón estaban
disponibles inicialmente en los Estados Unidos en 1996, y ese año se
plantaron casi 1.8 millones de acres. Bollgarda la superficie cultivada
de algodón se ha expandido a más de un tercio de la superficie total
de algodón de los Estados Unidos en 2000 (más de 4 millones de
acres). Debido a la amplia aceptación de Bollgarda algodón durante
los últimos 5 años, se ha aprendido mucho sobre la eficacia, los
beneficios para el productor, los beneficios para el medio ambiente y
el impacto de Bollgarda algodón sobre prácticas agronómicas.
a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501
Como parte del acuerdo de licencia comercial, los agricultores
deben participar en el plan de manejo de resistencia. Este
programa requiere que los productores tengan un porcentaje
de su cultivo que no contenga elcry1Ac-como gen. Esta porción
del cultivo funciona como refugio, proporcionando una arena
para que se desarrollen los insectos susceptibles a Cry1Ac. Los
agricultores tienen dos opciones de refugio: uno que representa
el 5% de su área de cultivo donde no se rocían insecticidas para
las plagas objetivo; o donde el 20% o más del área de cultivo se
planta a no Bollgarda algodón que se puede rociar con cualquier
régimen de manejo de insectos, excepto los aerosoles Bt
microbianos. Los productores reciben una guía detallada sobre
el concepto de uso de refugios en relación con el programa de
manejo de resistencia antes de plantar Bollgard.a semilla de
algodón, y el cumplimiento es obligatorio.
Eficacia de Bollgarda algodón en el control de insectos
lepidópteros
Bollgarda El algodón se concibió como una alternativa a los
insecticidas químicos para controlar las principales plagas
lepidópteros del algodón. Los primeros estudios en invernadero y en
pequeñas parcelas de campo demostraron que Bollgarda
proporcionó un control de insectos equivalente o mejor que el
control con los insecticidas utilizados en el algodón convencional. La
actuación de Bollgarda el algodón al proporcionar un nivel comercial
de control de insectos en el campo ha sido sobresaliente. Control de
la oruga del tabaco y la oruga rosada en los campos de Bollgarda el
algodón ha sido muy bueno en toda la zona de cultivo de algodón en
un número diverso de variedades de algodón. Control del gusano
del algodón con Bollgarda ha sido menos completo, requiriendo
ocasionalmente un control suplementario de insectos con aerosoles
químicos. La proteína producida en Bollgarda El algodón, Cry1Ac,
tiene muy buena actividad contra estas tres principales plagas del
algodón en comparación con otras proteínas Bt (MacIntosh et al.,
1990). La línea de algodón seleccionada para la comercialización,
Monsanto 531, una de los cientos de plantas de algodón
transformadas examinadas, ha proporcionado una protección bucal
constante y una buena expresión génica en una amplia variedad de
antecedentes genéticos comerciales. La dificultad para proporcionar
una protección completa contra el gusano de la cápsula del algodón
se predijo a partir de los primeros estudios en invernadero (Perlak
et al., 1990) y el trabajo de campo posterior (Jenkins et al.,
1997), especialmente en situaciones de presión de insectos extremadamente
alta con el gusano de la cápsula del algodón. Expresión de la proteína Bt en el
polen de Bollgarda el algodón es bajo y el polen es una fuente de alimento para
el desarrollo de gusanos de cápsula (Greenplate et al.,
1998). Gusanos de cápsula que sobreviven en Bollgarda Se ha observado que el
algodón se alimenta en flores frescas y en pequeñas cápsulas debajo de las
etiquetas de las flores (Brickle et al., 2001). Los primeros estudios (Perlaket al.,
1990) indicó cierto control del gusano cogollero de la remolacha (Spodoptera
exigua) con algodón Bt. Sin embargo, algunas de estas plantas produjeron la
proteína Cry1Ab, una proteína más eficaz contra el gusano soldado de la
remolacha y menos eficaz.

Vivo en el gusano de la cápsula del algodón en comparación con Cry1Ac.
El Bollgard actuala El producto de algodón tiene poca actividad efectiva
contra el gusano cogollero de la remolacha y el gusano cogollero del
otoño (Spodoptera frugiperda), dos insectos con poca sensibilidad a la
proteína Cry1Ac (MacIntosh et al., 1990).
Seguridad de Bollgarda algodón
Había varias suposiciones de seguridad básicas cuando el
concepto de producto para Bollgarda se propuso el algodón.
Uno era que la especificidad y el perfil de seguridad de la
proteína Bt producíanen planta se mantendría. Un segundo
supuesto fue que la expresión delcry1Ac gen no afectaría
las características agronómicas de la planta, las
características de las semillas o la calidad del ®ber. Para
confirmar estos supuestos, se han completado numerosos
estudios.
La proteína Cry1Ac producida por bacilo turingiensico se sabe que
es extremadamente selectivo contra los insectos lepidópteros e
inofensivo para los seres humanos, los peces, la vida silvestre y los
insectos benéficos para la agricultura (McClintock et al., 1995). El
modo de acción de esta proteína requiere unirse a los receptores del
epitelio del intestino medio en el insecto (Hofmannet al.,
1988a; Van Rieet al., 1990a; Van Rieet al., 1990b). No se han
identificado receptores equivalentes en células intestinales
de mamíferos (Hofmannet al., 1988b; Sacchiet al.,
1986), explicando la clara ausencia de toxicidad de estas proteínas
para organismos no objetivo. Los estudios confirmaron el espectro
de actividad insecticida de la proteína producida por las plantas en
especies de insectos objetivo y no objetivo (Sims y Martin, 1997).
Además, los estudios de alimentación en dosis altas de la proteína
Cry1Ac, así como las extensas observaciones de campo, no
confirmaron efectos adversos en insectos no objetivo, como abejas
adultas y larvales, mariquitas, colémbolos, avispas parásitas y
crisopas verdes (Armstrong
et al., 2000; Sims y Martin, 1997).
Las proteínas, como clase, generalmente no son tóxicas para
los seres humanos y los animales (Betz et al., 2000). La baja
toxicidad para mamíferos de los insecticidas microbianos Bt y la
ausencia de toxicidad para las proteínas insecticidas Bt se han
demostrado en extensos estudios de seguridad realizados
durante los últimos 40 años, varios de los cuales se han
publicado (Fisher y Rosner, 1959; Meeusen y Atallah, 1990). ;
Siegel y Shadduck, 1990). La EPA ha concluido: "El gran volumen
de datos de toxicología presentados permite concluir que las
subespecies probadas no son tóxicas ni patógenas para los
mamíferos, incluidos los humanos" (EPA, 1998a; EPA, 1998b).
Confirmación de la seguridad humana y animal de la proteína
Cry1Ac producida en Bollgarda Las plantas de algodón
incluyeron estudios que caracterizan la equivalencia biológica y
fisicoquímica de la proteína producida por la planta a la
producida por Bt, así como evaluaciones de la potencial
toxicidad en mamíferos y el potencial alergénico de la proteína.
La proteína Cry1Ac producida en el algodón tiene el esperado
a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501
Desarrollo y uso de Bollgarda algodón 493
peso molecular, actividad insecticida e inmunorreactividad como la
producida por Bt (Fuchs et al., 1993). Ninguna proteína está
glicosilada, como se esperaba debido a la falta de secuencias de
dirección para la glicosilación. Además, los análisis bioinformáticos
indican que la proteína Cry1Ac no es estructuralmente similar a
ninguna toxina proteica conocida u otras proteínas asociadas con
efectos adversos para la salud humana o de mamíferos. La toxicidad
potencial de las proteínas se puede determinar en estudios de
laboratorio a corto plazo con especies sustitutas (Sjobladet al., 1992).
No se observaron efectos tóxicos agudos en ratones según el peso
corporal, el consumo de alimentos y la necropsia macroscópica
después de la administración por sonda de niveles altos de la
proteína Cry1Ac. Las consideraciones importantes que contribuyen a
la alergenicidad de las proteínas ingeridas por vía oral incluyen la
evaluación de los factores que contribuyen a la exposición, como la
estabilidad a la digestión y la prevalencia en los alimentos (Metcalfe
et al., 1996). Los alérgenos proteicos importantes tienden a ser
estables a la digestión péptica y a las condiciones ácidas del
estómago si van a llegar a la mucosa intestinal donde se puede
iniciar una respuesta inmune (Astwoodet al., 1996). Se confirmó que
la proteína Cry1Ac se degrada rápidamente mediante la digestión en
sistemas modelo, con una vida media de aproximadamente 15
segundos. Otro factor importante que contribuye a la alergenicidad
de ciertas proteínas alimentarias son sus altas concentraciones en
los alimentos (Taylor y Lehrer, 1996). La mayoría de los alérgenos
están presentes como componentes proteicos principales en un
alimento específico. En contraste con esta generalidad para las
proteínas alergénicas comunes, la proteína Cry1Ac se produce a
niveles muy bajos en los tejidos de algodón, que van del 0,0005 al
0,0020% FW. También es importante establecer que la proteína no
representa un alérgeno previamente descrito.bacilo turingiensico y
sus formulaciones utilizadas como plaguicidas microbianos no se
han descrito como alérgenos sensibilizantes, incluida la introducción
a través de la exposición oral (McClintock et al., 1995). La secuencia
de aminoácidos de la proteína Cry1Ac producida en el algodón se
comparó con las secuencias de proteínas asociadas con la
alergenicidad encontradas en bases de datos genéticas disponibles
públicamente (GenBank, EMBL, PIR y SwissProt) y las documentadas
en la literatura actual. Cry1Ac no comparte una secuencia
estructuralmente significativa similar a las secuencias dentro de la
base de datos de alérgenos, y no comparte secuencias de
aminoácidos potencialmente relevantes inmunológicamente
mayores de siete aminoácidos idénticos contiguos.
La seguridad ambiental de la proteína Cry1Ac producida por
Bt también es ampliamente conocida (EPA, 1998a; EPA, 1998b).
Además de la falta de efectos en organismos no objetivo, se
sabe que las proteínas en general, y Cry1Ac específicamente, se
degradan rápidamente en el medio ambiente (Palmet al., 1993;
Palmaet al., 1994; Palmaet al., 1996) y, por lo tanto, no se
acumulan en el suelo ni se filtran al agua subterránea. Los
estudios de laboratorio y de degradación del suelo en el campo
confirmaron estas características ambientales para el Cry1Ac.
494 Frederick J. Perlak et al.

proteína producida en Bollgarda algodón (Betz et al., 2000).

Estos estudios abordaron los temas considerados principales
para la evaluación de seguridad ambiental por el Panel Asesor
Científico de la EPA, que incluyó la cantidad de proteína Cry que
ingresa al suelo con el tiempo y el tiempo que la proteína
persiste en una forma biológicamente activa. Además, la
bioingeniería del algodón no genera una mayor preocupación
por el movimiento de genes introducidos de Bollgard.a en
parientes del algodón silvestre. Solo dos parientes silvestres del
algodón se encuentran en los EE. UU.:Gossypium thurbei en
Arizona y Gossypium tomentosum en Hawaii.
Gossypium thurbei no es sexualmente compatible con
variedades comerciales de Gossypium hirsutum. Gossypium
tomentosumes sexualmente compatible con variedades
comerciales de G. hirsutum; sin embargo, el algodón no se
cultiva comercialmente en Hawái (Betz et al., 2000).
El segundo supuesto que se hizo en la fase de concepto
de producto para el algodón protegido contra insectos fue
que la mejora genética no cambiaría las características
fundamentales de las plantas de algodón. Este principio
básico se ha denominado "equivalencia sustancial" y fue
establecido a principios de la década de 1990 por la
Figura 1. Clasificaciones de Micronaire.
Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la (a) Clasificaciones de micronaire de 19 031 fardos de algodón. Datos recopilados en
Alimentación, la Organización Mundial de la Salud y la 1999 de AR, AZ, LA, MS, NC, TN, TX, VA. Variable dependiente = tecnología, tipo III F =

Organización para la Cooperación y el Desarrollo 662.22, P> 0.0001.

Económicos. La equivalencia agronómica se demostró en
extensas observaciones de plantas en invernadero y
pruebas de campo durante varios años, e incluyó el análisis
de más de 40 componentes de morfología, madurez,
desarrollo, rendimiento, características de las plantas y
susceptibilidad a enfermedades e insectos. Además,a
plantas de algodón, que incluyen nutrientes, aminoácidos,
ácidos grasos, vitaminas y minerales, así como
componentes antinutricionales naturales como el gosipol.
Se confirmó que estos componentes eran sustancialmente
equivalentes a las variedades de algodón convencionales
comparables (Berberichet al., 1996). Las conclusiones sobre
la falta de propiedades tóxicas y alergénicas de la proteína
Cry1Ac producida en el algodón y la equivalencia nutricional
de la semilla de algodón se confirmaron adicionalmente en
una serie de estudios de alimentación animal realizados con
ratas, codornices, gatos, cabras y vacas.
Algodón ®ber de Bollgard comerciala Las variedades también se
han estudiado extensamente y se ha demostrado que no se ven
afectadas por la presencia del material genético insertado. Los datos
de la calidad de la fibra de fardos de algodón cultivados
comercialmente, desmotado y clasificado se recopilaron en 1999 y
2000 de todo el cinturón algodonero. Longitud media de la fibra y
micronaire de miles de fardos de algodón producidos a partir de
variedades convencionales, fardos de Bollgarda y pacas producidas
en Bollgarda con Roundup Readya Las variedades de algodón se
compararon mediante instrumentación de gran volumen. La calidad
del ®ber producido a partir de Bollgarda variedades de algodón no
era diferente de la calidad de ®ber de
(b) Clasificaciones de micronaire de 76 992 fardos de algodón. Datos recopilados
en 2000 de AR, AZ, CA, MS, NC, TN. Variable dependiente = tecnología, tipo III F =
536.81, P> 0.0001.
variedades convencionales (Figuras 1 y 2). Varios otros
informes confirman los resultados de estos estudios
(Etheridge y Hequet, 2000; Kerbyet al., 2000a; Kerbyet al.,
2000b; Moseret al., 2000; Speed y Ferreira, 1998).
Se confirmó la seguridad ambiental y para mamíferos de
la proteína Cry1Ac. en planta, y se demostró la equivalencia
de la planta de algodón transformada y sus productos con
el algodón convencional.
Beneficios de Bollgarda algodón
BENEFICIOS DE SEGURIDAD
El complejo de cogollos / cogollos es una plaga importante del
algodón, que causa graves daños a las estructuras orales de la
planta de algodón y requiere un tratamiento extenso con
insecticidas químicos en el algodón convencional. La eficacia de
Bollgarda el algodón ha dado lugar a una reducción drástica del uso
de insecticidas químicos. Las estimaciones de la reducción indican
que se utilizan 2,2 pulverizaciones menos por año para el control del
gusano de la cápsula y el gusano de las yemas en todo el cinturón
algodonero (Benedict y Altman, 2000). Se reducen los viajes por el
campo, se reduce la exposición de los trabajadores, se reduce la
carga química en el medio ambiente y se reduce la exposición de las
comunidades que rodean las áreas productoras de algodón. Está

a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501

Figura 2. Clasificaciones de grapas.
(a) Clasificaciones de grapas de 19031 fardos de algodón. Datos recopilados en
1999 de AR, AZ, LA, MS, NC, TN, TX, VA. Variable dependiente = tecnología, tipo
III F = 862.40, P> 0.0001.
(b) Clasificaciones de grapas de 76 814 fardos de algodón. Datos recopilados en
2000 de AR, AZ, CA, MS, NC, TN. Variable dependiente = tecnología, tipo III F =
1845.57, P> 0.0001.
Figura 3. Eficacia relativa de insectos de Bollgarda y Bollgarda II algodón en comparación
con los tratamientos convencionales sin pulverizar.
estimó que casi 2 millones de libras de ingrediente activo
insecticida no se rociaron en 1998 debido al uso de Bollgard
a algodón (Benedict y Altman, 2000). Otros estudios
(Gianessi y Carpenter, 1999; Gianessi y Carpenter, 2001)
informan resultados muy similares (2,7 millones de libras
por año en 2000). Estos beneficios económicos se revisan en
otra parte (Edgeet al., 2001; Falcket al., 2000; Falck-Zepedaet
al., 1999). La reducción del uso de insecticidas es más
dramática en algunas áreas que en otras. En Arizona, donde
Bollgarda el algodón ha tenido una adopción rápida y
significativa en los últimos 5 años, ha habido una
a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501
Desarrollo y uso de Bollgarda algodón 495
disminución drástica del uso general de insecticidas en el
algodón (Agnew y Baker, 2001).
BENEFICIOS ECONÓMICOS
Bollgarda Las variedades de algodón se compran mediante un
acuerdo de licencia en el que los productores pagan una tarifa a
Monsanto de entre 20 y 32 dólares estadounidenses por acre, según
la tasa de siembra, las prácticas agronómicas de una región
determinada y los niveles anuales típicos de infestación de insectos
lepidópteros. Los productores acuerdan cumplir con los términos
que incluyen una licencia de 1 año para usar la tecnología y la
participación requerida en un programa de manejo de la resistencia
a los insectos. A pesar del gasto inicial de esta tecnología, Bollgarda
El algodón siempre ha proporcionado valor a los productores, como
lo demuestra la adopción de Bollgard.a en más de un tercio de toda
la superficie cultivada de algodón en los Estados Unidos. El valor de
Bollgarda El algodón para un productor es variable y depende de tres
criterios: qué tan bien el productor maneja su cultivo para las
condiciones ambientales de un año en particular; la cantidad de
presión de los insectos; y el precio del algodón.
Bollgarda El algodón es una herramienta que brinda a los productores
un enfoque económico para manejar el gusano de los cogollos del tabaco,
el gusano rosado de la cápsula y el gusano de la cápsula del algodón,
pero no aborda todos los problemas de manejo de plagas de insectos. A
medida que aumenta el potencial de rendimiento del algodón, debido, en
parte, al manejo varietal y a factores ambientales satisfactorios, el valor
de la protección brindada por Bollgarda aumenta. En segundo lugar,
cuanto mayor es el nivel de infestación de plagas objetivo, más dinero se
ahorra en costos de control de insectos en comparación con el algodón
convencional manejado con programas de insecticidas convencionales.
Los programas de manejo de insectos para el algodón convencional a
menudo requieren monitoreo adicional y aplicaciones de insecticidas bajo
niveles altos de infestación de plagas, mientras que estas aplicaciones no
son necesarias en Bollgard.a ® campos. Finalmente, el precio del algodón
influye directamente en el valor que Bollgarda el algodón entrega al
cultivador. Como Bollgarda
el algodón protege el rendimiento, cuanto más alto es el precio del
algodón por libra, mayor es el valor. Además de la economía,
Bollgarda puede brindar beneficios tales como ahorro de tiempo,
simplicidad de manejo y mayor seguridad a través de la reducción de
aplicaciones de insecticidas. Estos factores pueden afectar
significativamente el valor general que un productor individual
otorga a Bollgard.a algodón. Comparaciones económicas de Bollgard
a al algodón convencional utilizando programas químicos de
control de insectos se han llevado a cabo en muchas áreas del
cinturón algodonero de EE. UU. desde su introducción en 1996
(Bryant et al., 1999; Cookeet al., 2000; Karneret al., 2000; Mullins y
Mills, 1999; Juncoet al.,
2000; ReJesuset al., 1997; Sewardet al., 2000; Stark, 1997; Presaet al.,
1998). Las comparaciones realizadas por terceros independientes
muestran que, en promedio, los productores se benefician de Bollgarda
algodón debido a un mayor rendimiento, menores costos de control de
insectos o ambos. Monsanto ha realizado actividades económicas
496 Frederick J. Perlak et al.
Tabla 1. Datos de toxicidad (LC50) para las toxinas primarias y la proteína quimérica contra las plagas del algodón en los EE. UU.
Cry1Ac
Gusano de los cogollos del tabaco 0,02
Gusano de algodón 2.11
Gusano rosado 0,01
Gusano cogollero de la remolacha >> 100
Gusano cogollero >> 100
LC50, concentración letal en metrog ml± 1, en el que el 50% de las larvas están muertas o sin mudar.
comparaciones desde 1995 en 485 sitios de campo grandes, lo que
resultó en una base de datos que cubre una variedad de condiciones de
crecimiento y poblaciones de plagas objetivo. La mayoría de los estudios
han indicado que Bollgarda Los rendimientos de algodón tienden a
exceder los rendimientos de los campos de algodón convencionales,
incluso bajo niveles bajos de infestación de plagas. Esto se debe al control
proporcionado por Bollgarda algodón de las poblaciones de plagas
objetivo cuando las poblaciones están por debajo de los umbrales de
tratamiento o simplemente no se pueden detectar mediante la
exploración de rutina (Moser et al., 2000). La prevención de lesiones, ya
sea bajo niveles bajos de infestación o cuando los umbrales se alcanzan
solo marginalmente, se ha denominado protección "subumbral". En
ensayos independientes, la ventaja económica media de Bollgarda sobre
el algodón convencional de 1995 a 1999 fue de 49,80 dólares EE.UU., con
una ventaja de rendimiento promedio del 10% sobre los productos no
Bollgarda comparaciones. Esto es consistente con la ventaja promedio (US
$ 44,70 y aumento del 7% por acre) calculada para Bollgard.a de ensayos
patrocinados por Monsanto. El Bollgarda La ventaja está relacionada con
los niveles de población de plagas en una temporada determinada. Sin
embargo, es evidente que incluso en años muy ligeros de insectos, como
1997 y 1999, cuando los costos de control de insectos eran más altos en
Bollgarda algodón (tarifa de tecnología incluida) que convencional para
algunos ensayos, hubo una ventaja económica general de mayores
rendimientos en Bollgarda algodón. Esta ventaja de rendimiento
constante puede explicarse por las ventajas agronómicas de Bollgarda
variedades y / o un mejor control de insectos (incluida la protección por
debajo del umbral) con Bollgarda variedades (Ihrig y Mullins, 2001).
Desarrollo de Bollgarda II
Desde el primer desarrollo de Bollgarda algodón, se anticipó que
el apilamiento de un segundo gen Bt proporcionaría una mayor
actividad y un espectro ampliado de control de insectos. Se
consideraron varias proteínas candidatas. Las proteínas Cry2A
fueron las principales candidatas porque carecen de reactividad
cruzada inmunológica con la proteína Cry1Ac, lo que permite
que la proteína Cry2A se siga de forma independiente cuando
se "apila" o se modifica mediante ingeniería biológica en
Bollgard.a algodón. Las proteínas Cry2A parecen tener
características claramente diferentes en comparación con las
Cry2Ab2 Cry1Fa Híbrido Cry1Ac / Cry1Fa
0,44 0,61 0,04
16,75 >> 100 2,26
0,04 2,24 0,01
43,81 4,73 1,93
76,31 3,81 3,99
Proteína Cry1Ac encontrada en Bollgarda (English y Slatin,
1992; ingléset al., 1994).
Se realizaron estudios de dosis ± respuesta sobre la
susceptibilidad de las diferentes especies de insectos a diversas
toxinas mediante la incorporación de la dieta (Stone et al., 1989).
Gusano cogollero del tabaco criado en laboratorio, gusano cogollero
del algodón, gusano cogollero de la remolachay El gusano cogollero
se obtuvo de Ecogen, Inc., Langhorne, PA, EE. UU., y el gusano
rosado de la cápsula se obtuvo de la instalación de cría de insectos
en el Laboratorio de Investigación del Algodón Occidental, Phoenix,
AZ, EE. UU. Se utilizaron cepas recombinantes de Bt para expresar
las toxinas primarias: Cry1Ac, Cry2Ab2 y Cry1Fa, y la toxina híbrida
Cry1Ac / Cry1Fa. A continuación, las toxinas se aislaron y purificaron
a partir de cultivos esporulados y lisados utilizando procedimientos
estándar (Donovanet al., 1988; Donovan, 1991; Malvaret al., 1994).
Las preparaciones cristalinas de las proteínas se trataron luego con
tampón de pH alto para solubilizar las proteínas, después de lo cual
se corrieron en geles SDS ± PAGE (4 ± 20% de acrilamida) y se
cuantificaron frente a un estándar de albúmina de suero bovino
(Dankocsiket al., 1990). En cada caso se utilizó una serie de seis a
ocho concentraciones preparadas mediante dilución en serie. Los
recién nacidos fueron infestados con la dieta. Las medidas de
mortalidad se registraron 7 días después de la infestación. Las
regresiones de concentración ± mortalidad se estimaron asumiendo
el modelo probit (SAS
Instituto, 1995). Los resultados se expresaron como LC50 en metrog ml± 1
dieta.
Los resultados de estos estudios se presentan en la Tabla 1. El
espectro de actividad de la proteína Cry2Ab2 indicó que sería
complementaria a la actividad de la proteína Cry1Ac, especialmente
contra ambas plagas de gusanos soldados del algodón.
Con el fin de acelerar la introducción del algodón que expresa
dos genes Bt, se utilizó la transformación con pistola de
partículas (McCabe y Martinell, 1993) para transformar un
cultivo comercial de algodón con el cry2Ab2 gene. La variedad
Delta y Pineland DP50 que contiene el Bollgarda gene
(cry1Ac) se transformó con una versión sintética del
cry2Ab2 gen impulsado por el promotor 35S mejorado (Kay
et al., 1987) y la poliadenilación NOS 3¢ fin. los
resultante R1 Las líneas se seleccionaron utilizando varios criterios,
incluido el fenotipo de la planta, la bioactividad y la expresión de
la proteína Cry2Ab2. Los bioensayos se realizaron utilizando
a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501

tanto cuadrados frescos como discos de hojas contra el gusano del
algodón y el gusano cogollero. Las líneas se seleccionaron en
función de la eficacia mejorada contra el gusano cogollero del
algodón y el gusano cogollero (la bioactividad se correlaciona con la
expresión) y el fenotipo. Se utilizó un ensayo de inmunoabsorción
ligado a enzimas (ELISA) para determinar los niveles de expresión de
las proteínas Cry2Ab2 y Cry1Ac.
Se determinó experimentalmente que la expresión del
cry1Ac gen no se vio afectado por la introducción de la
cry2Ab2 gene. El patrón de expresión delcry1Ac gen en las diferentes
partes de la planta, y en diferentes etapas de la vida del crecimiento
de la planta, era el mismo en Bollgarda algodón como en Bollgarda
plantas de algodón transformadas con cry2Ab2. los en planta El nivel
de expresión de Cry2Ab2 es más alto que el observado para Cry1Ac
en Bollgard.a algodón. Debido a que la proteína Cry2Ab2 ha sido una
proteína desafiante para trabajar debido a su escasa solubilidad y
tendencia a agregarse, se empleó un método alternativo que se
había desarrollado para cuantificar los niveles de proteína Cry. Esta
técnica para evaluar el nivel de expresión de la proteína Cry2Ab2
implica el uso de un bioensayo cuantitativo desarrollado por
Greenplate
(1999). Este método tiene la ventaja de utilizar un insecto muy
susceptible, el gusano de los cogollos del tabaco, para estimar la
cantidad de proteína Cry, basándose en la inhibición del desarrollo.
Es una medida más directa de la actividad de las proteínas Cry y no
está sujeta a las dificultades encontradas en la extracción y
solubilidad de las proteínas. Utilizando una curva estándar de
Cry1Ac, la cantidad de actividad total de lepidópteros podría
estimarse y expresarse en equivalentes de Cry1Ac (Greenplateet al.,
2000). Los niveles de expresión en muestras recolectadas de
senderos de campo de 2 años se han estimado usando el bioensayo
cuantitativo. Estas pruebas de campo se realizaron en cuatro lugares
y se tomaron muestras en varios momentos durante la temporada.
Los datos derivados de muestras de campo han demostrado que
cry2Ab2 El gen presente en los eventos de algodón transformado
aumentó la eficacia general contra las plagas de insectos
lepidópteros clave del algodón aproximadamente cuatro veces.
Ensayos de campo con Bollgarda II eventos del algodón en 2000
mostraron que el aumento de la actividad de los lepidópteros
observado en los ensayos de laboratorio se tradujo en un mayor
control de las plagas de lepidópteros en el campo (Voth y
Greenplate, 2001). Variedades similares de algodón bio-diseñado
con Bollgarda, Bollgarda II o el algodón convencional se compararon
en ensayos replicados en parcelas pequeñas. Cada parcela consistió
en cuatro filas de 50 pies de largo, replicadas cuatro veces. Las
parcelas no fueron fumigadas para insectos lepidópteros, por lo que
se pudo determinar la eficacia relativa de cada tratamiento. En el
campo se ha observado que el control del gusano del cogollo del
tabaco y del gusano rosado es esencialmente completo para
Bollgard.a y es lo mismo para Bollgarda II. De particular interés es la
eficacia de Bollgarda II sobre aquellas especies que no están
completamente controladas con Bollgarda. La Figura 3 muestra la
eficacia relativa en las cuatro especies primarias donde un mayor
control tendría valor para el algodón.
a Blackwell Science Ltd, The Plant Journal, (2001), 27, 489 ± 501
Desarrollo y uso de Bollgarda algodón 497
productores. Para el gusano de la cápsula del algodón, Bollgarda Por lo general,
proporciona un buen control, aunque a veces se necesitan más pulverizaciones.
Para el gusano cogollero del otoño, el gusano cogollero de la remolacha y el
garfio de soja Bollgarda proporciona un control limitado, mientras que Bollgarda
Proporcioné un excelente control. Estos resultados
correlacionar bien con estimaciones de LC50 determinado utilizando
bioensayos incorporados en la dieta en colonias de laboratorio de
Gusano cogollero del algodón, gusano cogollero de la remolacha y
gusano cogollero del otoño (Sivasupramaniam et al., 2000; Tabla 1).
El mayor espectro de plagas de lepidópteros controladas por
Bollgarda El algodón II se atribuye al espectro más amplio de
actividad de Cry2Ab2, así como a la mayor expresión de este gen en
Bollgard.a Línea II (Figura 3). Los resultados de los ensayos de campo
de 3 años muestran que Bollgarda II proporciona un excelente
control de las especies de lepidópteros de importancia económica en
los EE. UU. El control mejorado de Bollgarda II ha dado como
resultado una mayor retención de cápsulas y mayores rendimientos
(datos no mostrados).
Los datos indican que la combinación de cry2Ab y
cry1Ac genes en Bollgarda El algodón II proporciona un control superior
de las plagas de lepidópteros. Esta mejora observada en el control de
estas plagas debería resultar en una mayor disminución en el uso de
pesticidas convencionales en la producción de algodón (Ridgeet al., 2000).
Los niveles más altos de expresión y las mejoras relacionadas en la
bioactividad proporcionan un excelente control de todas las especies de
gusanos de la cápsula que atacan al algodón y tienen implicaciones
positivas para los problemas de manejo de la resistencia, especialmente
con referencia al gusano de la cápsula del algodón. Información
relacionada con la seguridad medioambiental, alimentaria y de piensos de
Bollgarda II se ha presentado a las agencias reguladoras de EE. UU.
Correspondientes y actualmente se encuentra en proceso de revisión.
Mejoras futuras a Bollgarda algodón
Como corolario de las mejoras aportadas por el desarrollo
de Bollgarda II algodón, los esfuerzos de ingeniería de
proteínas se han centrado en mejorar la actividad de la
cry1Ac gene. Se lograron mejoras adicionales en la eficacia de
los insectos mediante el uso de proteínas quiméricas Cry1Ac /
Cry1Fa (Malvaret al., 2000). Se han realizado estudios de eficacia
en una proteína quimérica Cry1Ac / Cry1Fa en algodón
(Sivasupramaniamet al., 2000). Reemplazando el dominio III y
una pequeña parte del dominio II del activadocry1Ac
gen con el segmento correspondiente de cry1Fa, Se ha observado un
aumento en el espectro de insectos que se controla (Cuadro 1). Los
bioensayos tanto con el gusano cogollero del algodón como con el
gusano cogollero alimentados con hojas y cuadrados de algodón
fresco que expresan esta proteína quimérica han mostrado una
mortalidad significativamente mayor del gusano cogollero, y al
menos una actividad equivalente contra el gusano cogollero del
algodón. Los estudios de invernadero indican que estas plantas
tienen fenotipos normales y aceptables. Se han señalado varios
eventos como resultado de estas investigaciones de laboratorio.
498 Frederick J. Perlak et al.
Los ensayos de campo con estos nuevos eventos de algodón se realizarán en los
EE. UU. En 2001. La demostración exitosa de la eficacia en el gusano cogollero
del otoño y el gusano cogollero de la remolacha en estos ensayos puede
conducir al desarrollo de un producto de algodón que proporcione un excelente
control de todas las plagas de lepidópteros del algodón. : gusanos de las
yemas / gusanos del cogollo, gusanos soldados, gusanos cortadores, garfios y
perforadores.
Conclusiones
Bollgarda el algodón ha estado disponible en el mercado durante 6
años. Este producto se ha plantado ampliamente en más de un
tercio de la superficie total anual de algodón en los EE. UU. Bollgarda
el algodón proporciona un control del gusano de las yemas y del
gusano de la cápsula que es superior a los insecticidas químicos.
Permite al cultivador la opción de reducir sus costos de control de
insectos y aumentar sus rendimientos de algodón. Algunos de los
beneficios de Bollgarda el algodón es compartido por el cultivador
tanto con la comunidad que rodea las regiones productoras de
algodón como con los consumidores. La reducción del uso de
insecticidas químicos da como resultado una menor exposición al
insecticida para el agricultor, su familia, sus vecinos y la comunidad
circundante. Reducción de los costes de producción mediante el uso
de Bollgarda El algodón permite a los productores seguir siendo
competitivos en el mercado mundial y proporciona estabilidad y
sostenibilidad en la producción de algodón que beneficia tanto a la
industria del algodón como al consumidor. Monsanto, como
proveedor de tecnología, y las empresas de semillas también
comparten la rentabilidad de la producción de algodón con Bollgard.
a algodón. Este retorno de la inversión ha estimulado la inversión y la
competencia en la investigación del algodón, lo que dará como
resultado productos para mejorar la producción de algodón. Esto
eventualmente también beneficia al cultivador. Bollgarda el algodón
es un vistazo de lo que es posible al proporcionar alternativas
seguras y mejoradas para la producción agrícola mediante el uso de
nuevas tecnologías.
Agradecimientos
Los autores desean agradecer a Roy Fuchs, Karen Marshall y
Sandra Hurston por la revisión crítica del manuscrito.
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