MÉTODOS Y METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN II

PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

ESTUDIANTES:

SARAY BORJA OTÁLORA

MELANYS FIGUEROA LÓPEZ

MAURICIO YEPES BOVEA

DOCENTE

OLIVERO VEGA ENOHEMIT

UNIVERSIDAD SIMÓN BOLÍVAR

SEDE BARRANQUILLA- ATLÁNTICO

PROGRAMA DE MICROBIOLOGÍA & COMERCIO Y NEGOCIOS

INTERNACIONALES

2020-1
 TÍTULO

Proteinas sintetizadas por el Bacillus thuringiensis como alternativa biológica a los

insecticidas químicos convencionales.

PREGUNTA PROBLEMA

¿Qué factores intervienen en la eficacia del Bacillus thurigiensis como control biológico en
los cultivos del Atlántico?

Planteamiento del problema

Bacillus thuringiensis es un bacilo Gram positivo que durante su fase de esporulación

produce una inclusión parasporal, conformada por proteínas Cry con actividad biológica

contra insectos-plaga. Gracias a estas proteínas Bacillus thuringiensis presenta toxicidad

contra larvas de insectos-plaga de los órdenes Lepidóptera, Coleóptera y Díptera, entre

otros. Además es amigable con el medioambiente, razones por la cuales se ha hecho común

el uso y desarrollo de productos comerciales y plantas transgénicas a base de toxinas Cry en

el sector agrícola. Portela, Chaparro, López (2013)

Desde 1920 se han utilizado las esporas y los cristales de proteína insecticidas producidos

por B. thuringiensis como biopesticida en el control de plagas. Actualmente se utilizan

como insecticidas específicos bajos nombres comerciales como Bioster, Dipel y Thuricide.

Estos plaguicidas son considerados respetuosos con el medio ambiente por su

especificación, ya que su efecto sobre los humanos, sobre la vida silvestre, sobre los

polinizadores y sobre muchos otros insectos beneficiosos es mínimo o casi nulo.

La compañía belga Plant Genetic Sistems fue la primera (en 1985) en desarrollar plantas

genéticamente modificadas con tolerancia a los insectos mediante la expresión de los genes

Cry de B. thuringiensis.A menudo, los insecticidas basados en B. thuringiensis que se

aplican como spray líquido en plantas de cultivo deben ser ingeridos para tener efecto.

Cuando los insectos ingieren los cristales proteicos, el pH alcalino de su tracto digestivo

activa la toxina Cry, la cual se inserta en el epitelio del intestino del insecto, provocando

poros en el epitelio. El poro causa una lisis celular (rotura de la membrana celular) y la

posterior muerte del insecto. Dean D.H. (1984)."Biochemical Genetics of the Bacterial

Insect-Control Agent Bacillus thuringiensis:Basic Principles and Prospects for Genetic

Engineering". Biotechnology and Genetic Engineering Reviews-vol.2,341-363.

En este contexto, las proteinas producidas por el B. thuringiensis son altamente efectivas y

para nada peligrosas con los seres humanos.

 Justificación

Teniendo en cuenta el incremento de patologías por el uso indiscriminado de plaguicidas

y pesticidas en los diferentes cultivos agrícolas en el país y en el Atlántico, es por ello por

lo que surge la necesidad de buscar e implementar nuevas alternativas y estrategias para

contrarrestar las plagas en las plantas, y la mitigación de el empleamiento excesivo de

estos, debido que tienen menor costo y tiempo en ver resultados. Los controles

microbiológicos son considerados como una prometedora alternativa ante la problemática

planteada, siendo esta beneficiosa tanto en el precio como para la planta.

Por su parte, en Colombia se presenta una baja tasa en el uso de controles

microbiológicos, y en el Atlántico se encuentra aún más bajo o nulo, por ende, resulta

esencial implementar el uso de estos en la zona con el fin de mitigar enfermedades

relacionadas con pesticidas y plasticidad en los productos de origen agrícola. Bacillus

thuringiensis es una bacteria gram positiva, la cual es empleada como control biológico

ante el ataque de Lepidoptera, Coleopetera, Hemiptera, Nematoda y Diptera hacía las

plantas, puesto que este organismo procariota es capaz de producir una elevada cantidad de

toxinas nocivas antes plagas, tales como: Cry, (crystal) Cyt (cytolytic) Vip (del inglés

vegetative insecticidal proteins) . Esta bacteria se encuentra en los suelos, tiene un bajo

impacto ambiental y una alta especificidad como insecticida, allí radica su éxito y eficacia.

Asimismo, implementar Bacillus thuringiensis como producto insecticida comercial,

ayudaría a que los campesinos dejaran a un lado los plaguicidas y pesticidas tradicionales,
con el fin de ayudar a la planta, en lugar de perjudicarla y evitando así, diferentes

afecciones que podrían ser letales y permanentes en los seres humanos, tanto como en

adultos, infantes e incluso en gestantes.

Objetivo General

Determinar los factores que intervienen en la eficacia de Bacillus Thurigeiensis como

control biológico en los cultivos biológicos.

Objetivos Específicos

• Incorporar la proteína específica de B. thurigiensis en los cultivos de acuerdo con

los factores ambientales determinantes en el departamento del Atlántico.

• Sensibilizar a campesinos y personal responsable de los cultivos sobre la aplicación

del control biológico.

• Distribuir un producto a base de B. thurigiensis para comercializar y aplicar en

terrenos con características afines.

 Estado del arte

Gracias a las últimas investigaciones realizadas a través de los años sobre Bacillus

thuringiensis se puede notar la efectividad de este como plaguicida, su gran actividad como

repelente se pudo observar en la investigación realizada por Niedmann y Meza en chile-

2006, ya que en su estudio, llamado: “Evaluación de Cepas Nativas de Bacillus

thuringiensis como una Alternativa de Manejo Integrado de la Polilla del Tomate", se

demostró que este biopesticida tuvo éxito al combatir la polilla del tomate con su alta

toxicidad contra esta, ya que representaba pérdidas del 60 al 100% en campos en donde no

eran tratados con insecticidas convencionales, ya que se evidencian que las plagas estaban

adquiriendo resistencia a plaguicidas comunes, demostrando que podrían constituir una

alternativa para el control de esta plaga.

Además de ser efectivo al momento de combatir plagas, es efectiva al momento de hacer un

gran aporte a la economía de las personas que lo utilizan ya que en el estudio realizado por

PORTELA, CHAPARRO Y LOPEZ, en la ciudad de BOGOTA, COLOMBIA llevada a

cabo en el año 2006, quedo demostrado que Bacilllus thunringiensis (BT), es amable con el

medio ambiente, y con el ser humano, ya que no afecta la integridad física de las personas,

incluso logrando que otros seres vivos tampoco se vean afectados, y observando que no

altera el suelo, y gracias a esto el uso de productos BT ha aumentado en los últimos años, y
constituye del 1 al 2% del mercado global de insecticidas dejando ganancias de 8 billones

de dólares por año.

Metodología
Los controles biológicos son uno de los agentes que cada día adquiere mayor eficacia en
resultados en cuanto a la eliminación de plagas, hongos y bacterias en una amplia
diversidad de cultivos. Por ende, el correcto empleamiento de esta nueva alternativa resulta
vital para conseguir el mayor número de buenos resultados posibles.

En primera instancia se evaluará las condiciones del del cultivo (Terreno, temperatura pH
etc.) y bajo qué amenaza se encuentra sometido, posteriormente se hará un análisis
exhaustivo para determinar el nivel de resistencia, tolerancia y sensibilidad que posee cada
planta, para finalmente almacenar la información en una base datos.

Una vez en este punto se procede a la obtención del producto de origen bacteriano que
necesite el cultivo y vaya de acuerdo con su necesidad, esto se hace a través del aislamiento
en un medio de cultivo enriquecido, luego se realiza otro sembrado en medios selectivos
hasta obtener una única cepa pura.

Luego de obtener el cultivo bacteriano puro se procede a incrementar la biomasa para

elevar la cantidad de producto ya sea: Enzimas líticas, las cuales realizan un proceso
degradativo en la pared celular de los hongos, lipopolipétidos, compuesto capaz de inhibir
el crecimiento de fitopatógenos y endotoxinas (Cry y Cyt) capaces de eliminar un amplio
rango de insectos.
Mediante este conjunto de pruebas basadas en previos estudios realizados en otras
localidades del país y del mundo se utilizó Baciillus thuringiensis con diferentes patovares:
B. thuringiensis var. aizawi

B. thuringiensis var. kurstaki

B. thuringiensis var. israelensis

Posterior a la selección del cultivo de plantas, se procedió a iniciar con un inoculo con baja
carga y consecutivamente se le incremento hasta conseguir la cantidad necesaria, la cual no
sea excesiva para evitar que los insectos adquieran resistencia a las toxinas y que estas no
resulten ser nocivas ante el consumo humano, sin embargo, el producto será comercializado
con diferentes cargas que deben ser inoculadas con respecto a la cantidad de insectos y la
resistencia de estos.

Finalmente, el producto fue inoculado en la planta, se observó y se tabuló los resultados,

teniendo en cuenta factores como calidad del fruto, cuerpo vegetativo y la producción del
cultivo a grandes escalas, costos vs ganancias; se determinó la eficacia del control biológico
ante la amenaza de plagas y fitopatógenos en los cultivos agrícolas en el Atlántico, para
posteriormente comercializar a localidades con terrenos similares a este.
MARCO TEORICO

Entre las bacterias que se han utilizado para realizar la regulación de cultivos comerciales

se han podio encontrar diferentes bacterias que han mostrado amabilidad con el suelo y el

ser humano con una gran efectividad al momento de atacar las plagas, entre ellas se pueden

encontrar:  B. popilliae, B. sphaericus, y B. moritai, pero la mas conocida por su efectividad

en la regulación de platas en cultivos y en su uso comercial es Bacillus thuringiensis, que

diferentes investigaciones han demostrado su efectividad por sus propiedades insecticidas