Taller 1: Implementos Laboratorio Microbiología y Microscopio Óptico
Microscopio
Herramienta que permite
observar elementos que
no pueden observarse o
son invisibles a simple
vista.
Asa de Loop
Elemento que se utiliza
para obtener colonias y
sembrar en medio de
cultivo.
Micropipeta
Permite medir volúmenes
muy pequeños (mililitros).
Autoclave Equipo destinado a la
esterilización por vapor
saturado.
Tinción de Gram
Permite la diferenciación
entre bacterias gram+ y
gram-.
Frasco Schott Recipiente que puede
ser utilizado para
esterilizar medio de
cultivo líquido. Resistente
a temperaturas en torno
a 121°C.
Portaobjetos Elemento de vidrio que
permite contener la
muestra que se
observara al microscopio
.
Incubadora Equipo que genera las
condiciones de
temperatura para el
correcto crecimiento de
un microorganismo en un
medio de cultivo.
Gradilla
Soporte para transportar y contener material de vidrio.
Placa de Petri Uso para el cultivo de bacterias,
mohos, entre otros. Soliendose
cubrir el fondo con distintos
medios de cultivos (ej: Agar)
según el microorganismo que se
quiera cultivar.
Asa Drigalsky
Siembra en la superficie. Se
esteriliza a través de flameado.
Cuentacolonias
Equipo que permite contar la
formación de colonias en una
placa de agar.
Medio de cultivo Contiene los nutrientes
necesarios para permitir el
crecimiento microbiológico
Antibiótico Compuesto orgánico capaz de
inhibir el crecimiento de un
microorganismo. Actúa sobre la
pared celular.
Bolsa autolavado Recipiente para contener
amarilla desechos microbiológicos que
necesitan ser esterilizados por
vapor húmedo a 121°C.
Cubreobjetos Permite fijar la muestra al
portaobjeto, de tal manera de
distribuirla por la superficie para
facilitar su observación.
Tubo de ensayo Recipiente de vidrio alargado
para contener reactivos o bien
realizar una reacción.
ideales para realizar pruebas de
antibióticos en medio líquido.
Microscopio Óptico
• Instrumento de precisión que permite ampliar la imagen de los objetos que no son visibles para
el ojo humano.

• En este, la luz atraviesa de abajo hacia arriba el objeto a estudiar. Para ver con el microscopio
un objeto, este debe ser lo más fino posible. Si no atraviesa la luz se verá solo un grumo
deforme y opaco.

¿Cómo se usa el microscopio?

 Taller 2: MEDIOS DE CULTIVO (Mcconkey), SIEMBRA Y DILUCIÓN

Medio de cultivo Medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes en los que crece
complejo y se multiplican los microorganismos en el laboratorio, con el objeto de
aislar diferentes especies bacterianas, con el fin de identificarlas y
realizar estudios complementarios.

AGAR MACCONKEY Medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciación

de bacilos gram negativo fermentadores y no fermentadores de lactosa.

Se utiliza con frecuencia para el aislamiento de coliformes.

Siembra por estría La siembra por estría permite aislar los microorganismos que dan lugar
a colonias separadas y luego, transfiriendo una sola colonia a un medio
nuevo, se permite el desarrollo de un cultivo puro bacteriano.

Dilución Efecto de disminuir la concentración de un microorganismo de tal

manera de asegurar el correcto conteo de UFC en placa de agar.

Preparación Agar:
1. Pesar 15g/L de Agar Macconkey. Preparar 100ml.
2. Diluir en agua destilada.
3. Agitar frecuentemente hasta llegar a 80°C. Se debe disolver completamente.
4. Agregar a autoclave. Esterilizar a 121°C por 15 min.
5. Preparar equipamiento en campana de flujo laminar
6. Agregar app 20 ml de medio agar a placa de Petri, en ambiente esteril.
7. Tapar y dejar solidificar durante un tiempo prudente.
8. Rotular y luego refrigerar.

Procedimiento dilución y siembra:

1. Agregar 9 ml de medio EC (fresco y estéril) en 2 tubos de ensayo.

2. Desde el inóculo inicial, tomar 1 ml (con micropipeta) y agregar el volumen en el primer
tubo, de tal manera de obtener una dilución 1/10 . Homogenizar la muestra. Rotular
según corresponda.
3. Posteriormente, tomar 1 ml (con micropipeta) desde la muestra 1/10 y agregar el volumen
en el segundo tubo, de tal manera de obtener una dilución 1/100 . Homogenizar la
muestra. Rotular según corresponda.
4. Tomar con asa de loop un volumen de 10uL (desde dilución 1/100) y realizar
procedimiento de siembra por estrías. Utilizar placa con Agar Macconkey.
5. Realizar cierre de placa, rotular e incubar por 1 semana a 37°C.