PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO

ALFA AMILASA- CROMATEST

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TABLA DE REVISIONES
REVISIÓN FECHA DESCRIPCIÓN DE LAS Autor de las
MODIFICACIONES modificaciones
NE

ELABORADO REVISADO APROBADO Y LIBERADO

Nombre: Dr. Luis Carlos Nombre: Nombre: Dra. Danitza Rodriguez
Luque Gutiérrez. Gutierrez
Cargo: Responsable
Subcomité de Calidad Cargo: Responsable Laboratorio
Cargo:
Laboratorio Virgen de Centro de Salud Virgen de Fátima.
Fátima.
Fecha: 11/11/ 2023 Fecha: 10/11/2023 Fecha: 17/11/2023
Firma: Firma: Firma:

1- INTRODUCCION
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La α-amilasa (AMS) es una enzima que ayuda a digerir el glucógeno y el almidón. Es producido
principalmente por el páncreas exocrino y las glándulas salivales. Esta determinación se realiza
principalmente en el diagnóstico o control de enfermedades del páncreas como la pancreatitis aguda
o crónica. También puede reflejar enfermedades biliares o gastrointestinales y otros trastornos.
El diagnóstico clínico no debe realizarse basándose en un único resultado de prueba; debe integrar
datos clínicos y otros datos de laboratorio.

En este ensayo directo1,2 la α-amilasa cataliza la hidrólisis del sustrato 2-cloro-p-nitrofenil-α-D-

maltotriósido (CNP-G3) a pH 6,0 en 2-cloro-p-nitrofenol (CNP) y glucósidos libres.
La reacción se controla cinéticamente a 405 nm a partir de la velocidad de formación de color del
CNP producido, proporcional a la actividad α-amilásica en la muestra.
Reacción:
10 CNP-G3 9 CNP + 1CNP-G2 + G3 + G
2- OBJETIVO / PROPOSITO:
Establecer un procedimiento estandarizado para la determinación de la actividad de la amilasa en
muestras de suero, plasma u orina utilizando el kit Croma Test y midiendo la absorbancia a una
longitud de onda de 405 nm.
3- ALCANCE:
Este documento se aplica para el Área de Química Sanguínea en el laboratorio de análisis clínico
“Virgen de Fátima”

4- RESPONSABILIDADES:

PERSONA ENCARGADA FUNCION A CUMPLIR

Todo el personal Cumplir el procedimiento
Responsable del área Ejecutar y verificar el cumplimiento del
procedimiento.
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Responsable del Laboratorio Cumplir y hacer cumplir la ejecución de los

procedimientos.
NOTA: La calibración y el mantenimiento del espectrofotómetro son responsabilidades del personal de
laboratorio designado y se debe garantizar que el kit Croma Test utilizado esté en condiciones
adecuadas antes de su uso.
5- MATERIALES
- Material común de laboratorio
- Tubos de Ensayo
- Cubetas para espectrofotómetro.
- Centrífuga.
- Espectrofotómetro o fotómetro termostatizado a 37ºC 520-550 nm.
- Cubeta de 1 cm de paso de luz o su tubo equivalente.
- Agitador de tubos (Vortex o Mezclador Hematológico).
- Timer.
6- REFERENCIA Y DEFINICIONES:
Referencias

CODIGO
TITULO DEL DOCUMENTO
DOCUMENTO
VF-INS-QS-027 Inserto de amilasa Croma test
Manual del Espectrofotómetro Stat Fax
Manual del Espectrofotómetro RAL

Definiciones y Abreviaturas

a) Procedimiento: Instrucciones escritas autorizadas para realizar operaciones.

b) Procedimiento operativo estándar (POE): es un conjunto de instrucciones
escritas que documentan una actividad rutinaria o repetitiva seguida de una
organización.
c) Amilasa: Enzima encargada de romper en laces glucosídicos alfa 1-4 del almidón
o glucógeno.
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d) Absorbancia (A): Medida de la cantidad de luz absorbida por una muestra a una
longitud de onda específica.
7- Desarrollo:
a) Preparación Técnica:
Preincubar el reactivo de trabajo, las muestras y los controles a la temperatura de reacción de
37°C.
Ajustar a 0 el fotómetro utilizando agua destilada como referencia.
b) Pipeteo en una Cubeta:
R1. Mono reactivo
Para Suero/Plasma: 1,0 mL del reactivo Croma Test y 20 μL de muestra.
Para Orina: 1,0 mL del reactivo Croma Test y 10 μL de muestra.
c) Mezcla y Reactivo:
Mezclar suavemente por inversión.
Insertar la cubeta en el compartimiento termostatado del instrumento y poner en marcha el
cronómetro.
d) Incubación y Lecturas:
Incubar durante 1 minuto y anotar la absorbancia inicial.
Repetir las lecturas exactamente a los 1, 2 y 3 minutos.
e) Cálculos:
Calcular la diferencia entre absorbancias.
Calcular el promedio de los resultados para obtener el cambio promedio en absorbancia por
minuto (ΔA/min).
VALORES DE REFERENCIA
Adultos
Amilasa suero o plasma: Menores a 86 U/L
Orina: menor a 470 U/L
6- CONTROL DE DISTRIBUCION:

Documento Revisión Nº de copia Ubicación

controlada
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VF-POE-QS-027 Versión Original Laboratorio “Virgen de

0.0 Fátima”

8- Anexos

Amilasa Suero o plasma Orina

Reactivo en ml 1 1
Muestra en ul 20 10