PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO

Hemoglobina Glicosilada QCA

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Original
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Copia no Controlada

TABLA DE REVISIONES
REVISIÓN FECHA DESCRIPCIÓN DE LAS Autor de las
MODIFICACIONES modificaciones
NE

ELABORADO REVISADO APROBADO Y LIBERADO

Nombre: Dr. Luis Carlos Nombre: Nombre: Dra. Danitza Rodriguez
Luque Gutiérrez. Gutierrez
Cargo: Responsable
Subcomité de Calidad Cargo: Responsable Laboratorio
Cargo:
Laboratorio Virgen de Centro de Salud Virgen de Fátima.
Fátima.
Fecha: 11/11/ 2023 Fecha: 10/11/2023 Fecha: 17/11/2023
Firma: Firma: Firma:

1- INTRODUCCION
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La Bilirrubina es un metabolito producto del catabolismo del grupo Hemo de la Hemoglobina, El

aumento o disminución de este da paso a varias patologías relacionadas con el tejido hepático.
Las causas más comunes del aumento de la bilirrubina directa son las enfermedades hepatocelulares
y de los conductos biliares. El aumento de la bilirrubina indirecta puede indicar:
a) Un aumento de la producción (hemólisis)
b) Disminución en el transporte (anticuerpos y medicamentos)
c) Defecto en la captación (defecto o bloqueo de los receptores)
d) Defecto en la conjugación (enfermedad de Gilbert, entre otras.

La técnica de identificación se basa en la producción de azopigmento rojo en medio neutro, por

reacción directa de la bilirrubina conjugada con el ácido sulfanilico diazotado con nitrito.
Para la reacción de la bilirrubina no conjugada (indirecta) es necesario el agregado de un acelerador
que aumente la solubilidad del pigmento en medio acuoso
2- OBJETIVO / PROPOSITO:

Establecer una secuencia de pasos para la determinación de bilirrubina humana en muestras de

pacientes.

3- ALCANCE:
Este documento se aplica para el Área de Química Sanguínea en el laboratorio de análisis clínico
“Virgen de Fátima”

4- RESPONSABILIDADES:

PERSONA ENCARGADA FUNCION A CUMPLIR

Todo el personal Cumplir el procedimiento
Responsable del área Ejecutar y verificar el cumplimiento del
procedimiento.
Responsable del Laboratorio Cumplir y hacer cumplir la ejecución de los
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procedimientos.

5- MATERIALES
- Material común de laboratorio
- Tubos de Ensayo
- Cubetas para espectrofotómetro.
- Centrífuga.
- Espectrofotómetro o fotómetro termostatizado a 37ºC.
- Cubeta de 1 cm de paso de luz o su tubo equivalente.
- Agitador de tubos (Vortex o Mezclador Hematológico).

6- REFERENCIA Y DEFINICIONES:
Referencias

CODIGO
TITULO DEL DOCUMENTO
DOCUMENTO
VF-INS-QS-029 Inserto de Hemoglobina Glicosilada de la marca QCA.

Definiciones y Abreviaturas

Procedimiento: Instrucciones escritas autorizadas para realizar operaciones.

Procedimiento operativo estándar (POE): es un conjunto de instrucciones escritas
que documentan una actividad rutinaria o repetitiva seguida de una
organización.
HbA1: Hemoglobina Glicosilada.
HbA0: Hemoglobina Fisiológica.
7- DESARROLLO:
1) Hemólisis de la muestra (Tubo lisis)
a) Dispensar 0,5 ml de Reactivo de lisis en un tubo de ensayo.
b) Añadir 0,1 ml de sangre problema, ST o Control. Mezclar e incubar durante 5 min. a Tª ambiente
(20-25ºC).
2) Separación de la HbA1
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a) Homogeneizar correctamente la suspensión de Resina Tamponada (Agitar Como

Mamadera) y dispensar 3,0 ml en un tubo de ensayo
b) Añadir 100 ul de hemolizado del tubo de lisis a los 3 ml de resina.
c) Mezclar la suspensión de resina y hemolizado por espacio de 5 min. (agitador
hematológico en casi la velocidad maxima)
NOTA: Se recomienda tener la resina en agitación continuada para evitar su sedimentación y también
para favorecer la reacción en las condiciones apropiadas.
a) Centrifugar x 580 g (2000 rpm aprox.) durante 10 min. Separar el sobrenadante, con
cuidado de no aspirar las partículas de resina, Colocar en un tubo nuevo y medir su
absorbancia a 415nm (Abs1).
3) Hemoglobina total
a) Dispensar 20 μl de hemolizado del tubo de lisis en un tubo de ensayo nuevo.
b) Añadir 5 ml de agua desionizada y mezclar vigorosamente.
c) Medir la absorbancia a 415 nm (AbsT).

NOTA: La estabilidad de la muestra es de una hora con muestras anticoaguladas con EDTA.
Cálculos

Cociente Estándar: (AbsSt/AbsT)

Cociente muestra: (Abs1/AbsT)

%HbA1: (Cociente muestra/ Cociente Estándar) * 10

NOTA: El factor de 10 se da por la concentración de hemoglobina glicosilada en la sangre estándar.

8- CONTROL DE DISTRIBUCION:

Documento Revisión Nº de copia Ubicación

controlada

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