UNIVERSIDAD CATOLICA DE SANTA MARIA

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS, BIOQUIMICAS Y

BIOTECNOLOGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

MICROBIOLOGIA
GRUPO-08

DOCENTE:
SHANERI MARCILLA TRUYENQUE

INTEGRANTES:

Llerena Márquez Danitza

Molina Ballon Harry
Quicaño Yana Oscar Eduardo
Quispe Lenes Jassury Alisce
Velasquez Yapo Angely Marycielo

AREQUIPA – PERÚ

2023
 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE BACTERIAS GRAM NEGATIVAS DE
IMPORTANCIA EN INFECCIONES URINARIAS
INTRODUCCIÓN:

Las bacterias son clasificadas ya sea por su apariencia en el microscopio o por sus
características, las gram negativas pueden ser clasificadas por el color que logran
tener después de ser expuesta a un proceso químico llamado tinción de gram.
Después de este proceso las bacterias gram negativas son teñidas de color rojo
mientras que las gram positivas son teñidas de color azul. Cada bacteria es teñida
de diferente manera ya que sus paredes celulares son distintas, estás llegan a causar
diferentes tipos de infecciones.
Las bacterias gram negativas están contenidas en una cápsula protectora. Esta
cápsula ayuda a que los glóbulos blancos no ingieran las bacterias y así puedan
combatir las infecciones, gracias a esta cápsula las bacterias gramnegativas tienen
una membrana externa que la cuida de ciertos antibióticos, como la penicilina. Al
ser dañada, esta membrana libera sustancias toxicas conocidas como endotoxinas
que ayudad a la intensificación de los síntomas de las infecciones por estas
bacterias gram negativas
Algunas de las infecciones son: Infecciones por Escherichia coli (E. coli),
Infecciones por Haemophilus influenzae, Infecciones por Klebsiella, Enfermedad
del legionario, Tosferina (pertusis), Peste, Infecciones por Pseudomonas,
Salmonella, Shigelosis, Tularemia, Fiebre tifoidea, Brucelosis, Infecciones por
Campylobacter, Enfermedad por arañazo de gato, Cólera.}
La Bacterias gramnegativas son resistentes a los antibióticos esto se puede deber a
factores como: resistencia de forma natural a ciertos antibióticos, Adquieren genes
de bacterias que se convirtieron en resistentes o que sus genes mutan.

MARCO TEÓRICO:
La orina es un líquido filtrado por las membranas glomerulares al pasar esta por los
conductos excretores si existe algún proceso infeccioso, puede contener
microorganismos. Así como también se pueden encontrar en personas sanas
microorganismos saprofitos
como: Lactobacilus, Bacillus, Corynebacterium, Staphylococcus, Candida y
algunas enterobacterias.
Para que ocurra una infección urinaria por bacteria gram es necesaria la interacción
entre un microorganismo y el huésped. Por parte del huésped existen diferentes
mecanismos de defenza que van a condicionar el espacio para la infección como el
flujo normal de orina, la actividad antimicrobiana del líquido prostático, el pH
urinario, el componente inmunológico de la mucosa vesical y la peristalsis uretral.
También existen algunos factores que favorecen la infección como son la edad el
sexo, las relaciones sexuales y una falta de higiene. Las principales vías por las que
los microorganismos llegan al aparato urinario son: ascendente o canicular, a partir
de la uretra, y hematógena, a consecuencia de procesos sépticos.
 Estas infecciones es más probable que se presente en mujeres que en hombres ya
que principalmente es debido a factores hormonales, constitución anatómica y
embarazos.
El tracto urinario no posee flora microbiana autóctona y el 90% de las infecciones
se deben a bacilos gramnegativos de la familia Enterobacteriaceae, y se originan
por vía ascendente a partir de la uretra colonizada por la flora fecal del tubo
digestivo.

1.1 E. coli:
a) Características generales
E. coli es una bacteria, se caracteriza por ser bacilos gran negativo
anaerobios facultativos, que se encuentra comúnmente en los intestinos de
humanos y animales. La mayoría de las cepas de E. coli son inofensivas. Sin
embargo, algunas, como la E. coli, que produce la toxina Shiga, pueden
provocar enfermedades graves si se ingieren. Estas bacterias se transmiten
principalmente a los humanos al comer alimentos contaminados (1).
- Móvil por flagelos periticos
- Poseen fimbrias
- No forma esporas
- Capaz de fermentar la glucosa y la lactosa +/-
- Tolera la bilis
- Capaz de crecer a 44°C
- Existen cepas oportunistas y cepas patógenas
- Está involucrado en la sepsis y en el shock inducido por endotoxinas
Los principales antígenos de superficie de Escherichia coli son los
lipopolisacáridos de la pared celular (LPS; antígenos O) y los polisacáridos
capsulares (PS; antígenos K). Estos polisacáridos se sintetizan en la
membrana citoplasmática de las bacterias; los LPS se transportan a la
membrana externa, donde residen, mientras que los PS se secretan en
cápsulas (2)

b) Patologías
Infecciones habituales :
- Gastroenteritis
- Vías urinarias
- Heridas
- Infecciones intra-abdominales
- Bacteriemia
- Neumonia
- Meningitis neonatal
E. coli puede producir gastroenteritis o enteritis por seis mecanismos
distintos que conducen a seis síndromes clínicos diferentes:
- E. coli Enteropatógeno EPEC :
 - E. coli Enterotoxigénica ETEC : Contagio por alimentos o aguas
contaminadas con heces , produce una diarrea sanguinolenta, es la
causa común llamada «diarrea del viajero».
- E. coli Enteroinvasiva EIEC : Contagio por alimentos o aguas
contaminadas con heces, causa más daño debido a la invasión que
produce en el epitelio intestinal.
- E. coli Enterohemorrágica EHEC : Contagio por consumo de
carne mal cocida o contaminada con heces de bovino, diarrea acuosa
,seguida de diarrea sanguinolenta (colitis hemorrágica), ausencia de
PMN,puede producir Síndrome Hemolítico Urémico por daño renal
(coma y muerte) posterior a la colitis, diarrea acuosa.
- E. coli Enteroagregante EAEC o DAEC: Solo se encuentra en
humanos, Llamada enteroagregativa porque tiene fimbrias con las
que aglutinan las células en los cultivos de tejidos.
c) Medios de cultivos
- Agar sangre
Agar Sangre se utiliza para el aislamiento, cultivo y detección de la
reacción hemolítica rápida de microorganismos. Es adecuado para el
aislamiento y cultivo de muchos microorganismos fastidiosos. Puede
utilizarse para detectar reacciones hemolíticas (3).

Fig1 : E.coli en agar sangre

- Agar Mac-Conkey
Las sales biliares y el cristal violeta inhiben el crecimiento de
bacterias grampositivas. Los indicadores de lactosa y de pH rojo
neutro se pueden utilizar para distinguir las bacterias lactosa
positivas (colonias de color rosa oscuro con un halo de sedimento) y
las bacterias no fermentativas (colonias claras o amarillas). La
muestra de prueba se inocula en el medio de cultivo mediante
marcación cruzada. Incubar a 35°C durante 24 horas. (4).
 Fig 2: E .coli en agar Mac-Conkey
- Agar Mueller Hinton
Es un medio muy recomendado para pruebas de susceptibilidad a
medicamentos.
Agente antibacteriano obtenido de organismos aeróbicos de rápido
crecimiento mediante el método de difusión en disco.
El procedimiento de Kirby-Bauer se basa en la difusión de
sustancias.
Agentes antibacterianos en agar impregnados sobre discos de
papel.(5)

Fig 3: E. coli en agar Mueller hinton

- Agar eosina azul de metileno
Este medio proporciona una distinción muy clara entre colonias de
organismos fermentadores de lactosa y no fermentadores de lactosa.
No lo fermentan. La eosina y el azul de metileno que contiene
inhiben hasta cierto punto las bacterias grampositivas. Futuro,
La sacarosa permite que ciertos miembros del grupo coliforme
fermenten más fácilmente que la lactosa. Colonias positivas a
lactosa
Es de color azul a violeta con un brillo metálico o transparente, con
un centro oscuro y bordes incoloros, y es lactosa negativa.
Alternativamente, la sacarosa aparece incolora o ligeramente rosada
y transparente (6).
 Fig 4: E. coli en agar eosina azul de metileno
d) Pruebas bioquímicas
identificación de la E. coli

- Citrato: -
- TSI: A/A
- LIA: K/K
- UREA:-
- RM: +
- VP:-
- MAL:-
- Indol :+
- Movilidad :+
- GAS:+
- H2S: -

1.2 Pseudomona
a) Características generales
 pseudomonas aeruginosa pertenece a la familia Pseudomonaceae. Bacilos Gram
negativos rectos o ligeramente curvados que miden de 2 a 4 x 0,5 a 1 μm y
tienen flagelos polares, lo que los hace móviles. En términos de metabolismo,
son aeróbicos (pero pueden crecer en condiciones anaeróbicas con la ayuda de
nitratos), catalasa positiva y oxidasa positiva.
Se caracteriza por la producción de diversos pigmentos como la piocianina
(azul verdoso), la pioverdina (pigmento fluorescente amarillo verdoso) y la
piorubina (rojo)(7).
La temperatura óptima de crecimiento es 36 ℃ y el crecimiento es posible a 41
℃, pero el crecimiento es imposible por debajo de 4 ℃. Pseudomonas crece en
ambientes simples. En caldo crece profusamente formando anillos y depósitos
de color azul verdoso.
En agar simple, forman colonias fusionadas y transparentes con márgenes
continuos, a veces ondulados, junto con un medio opaco. Un pigmento
(piocianina) se difunde en el medio, dándole un tono verde.
Este pigmento tiene propiedades bactericidas contra otras bacterias
grampositivas y gramnegativas.
b) Patologías
Es un patógeno oportunista humano, más comúnmente afecta a los
inmunosuprimidos, tales como aquellos con fibrosis quística o sida.Estas
infecciones pueden afectar a muchas partes del cuerpo, pero típicamente afectan
las vías respiratorias, causando 50 % de las pulmonías bacterianas
nosocomiales.
Debido a su actividad hemolítica, las especies que no son patógenas pueden
ocasionalmente causar problemas clínicos, en particular en la infección de
transfusiones de sangre.
Las Pseudomonas, por ser bacterias hidrófilas, han estado involucradas en otitis
externa en particular asociada al agua, como es el caso del oído de nadador
crónico o aquellas provocadas por la inserción de objetos penetrantes en el oído.
La Pseudomonas aeruginosa también causan infecciones en pacientes con
quemaduras o heridas.
- Infección de uña
- Lesiones oculares
- Infecciones de herida
- Otitis extrema
- Ectima gangrenosa
c) Medios de cultivos
- Agar sangre
Agar Sangre se utiliza para el aislamiento, cultivo y detección de la
reacción hemolítica rápida de microorganismos. Es adecuado para el
aislamiento y cultivo de muchos microorganismos fastidiosos. Puede
utilizarse para detectar reacciones hemolíticas (3).
 Fig 5: Pseudomona en agar sangre
- Agar Mac-Conkey
Las sales biliares y el cristal violeta inhiben el crecimiento de
bacterias grampositivas. Los indicadores de lactosa y de pH rojo
neutro se pueden utilizar para distinguir las bacterias lactosa
positivas (colonias de color rosa oscuro con un halo de sedimento) y
las bacterias no fermentativas (colonias claras o amarillas). La
muestra de prueba se inocula en el medio de cultivo mediante
marcación cruzada. Incubar a 35°C durante 24 horas. (4).

Fig 6: pseudomona en agar mac -Conkey

- Agar cetrimide
El agar cetrimida es útil para el examen microbiológico de muestras
sospechosas de ser Pseudomonas aeruginosa. Es importante señalar que,
aunque estas bacterias forman parte de la microflora normal del medio
ambiente, son muy importantes porque muchas veces actúan como
patógenos oportunistas. Por tanto, uno de los problemas más comunes
provocados por este patógeno es la infección nosocomial, es decir, la
 infección que se produce en un ambiente hospitalario y ataca a pacientes
inmunocomprometidos (8)

Fig 7: pseudomona en agar cetrimide

- Agar caseína
Este medio se utiliza para medir el número total de microorganismos
mesófilos aeróbicos. peptona en el medio. La caseína y el extracto de
carne aportan al organismo aminoácidos, nitrógeno y otras sustancias.
Crecimiento microbiano. La glucosa proporciona una fuente de
carbohidratos.

Fig 8: Pseudomona en agar caseína

d) Pruebas bioquímicas
Identificación de pseudomona
- Indol -
- Rojo de metilo ornitina +
- Citrato +
- Urea –
- Of abierto +
- Of cerrado –
- Bilis +
- Esculina +
- Movilidad +
 - Ácido sulfhídrico –
- Agar feniletanol –
- pio verdina –
- Fluorecencia +

1.3.- PROTEUS: Las bacterias del género Proteus son un grupo de bacterias
gramnegativas facultativas anaeróbicas. Son conocidas por ser parte de la flora
bacteriana normal del tracto gastrointestinal y el tracto urinario inferior humano.
Sin embargo, en ciertas condiciones, pueden causar infecciones del tracto urinario

a) CARACTERISTICAS GENERALES:
Algunas características generales de las bacterias Proteus son:
1. Morfología: Son bacilos gramnegativos que se presentan principalmente
como células móviles en forma de bastón.
2. Movilidad: Son altamente móviles debido a la presencia de flagelos
peritríquicos que les permiten moverse en varios medios.
3. Fermentación: Son organismos oxidasa negativos y poseen un metabolismo
fermentativo que los hace capaces de producir ácido a partir de la glucosa.
b) PATOLOGÍAS:
En cuanto a las patologías asociadas a las bacterias Proteus, la más común es la
infección urinaria. Estas bacterias tienen la capacidad de colonizar el tracto urinario
y pueden causar infecciones como la cistitis (inflamación de la vejiga), la uretritis
(inflamación de la uretra) y la pielonefritis (infección renal).

c) MEDIOS DE CULTIVO: En términos de medios de cultivo, las bacterias Proteus

pueden crecer en medios de cultivo comunes utilizados para el aislamiento y la
identificación de bacterias gramnegativas. Estos medios incluyen agar sangre, agar
MacConkey y agar CLED (cistina lactosa electrolitos deficientes).

La bacteria del género Proteus es una causa común de infecciones del tracto
urinario. Para su cultivo y diagnóstico, se utilizan varios medios de cultivo
selectivos que brindan condiciones óptimas para el crecimiento de estos
microorganismos. A continuación, se presentan algunos medios de cultivo
comunes utilizados para este propósito:
1. Agar CLED (Cistina Lactose Electrolyte Deficient): Este medio es selectivo
para el crecimiento de Proteus spp. y otras bacterias urinarias. CLED agar
contiene cisteína para la detección de la producción de sulfuro de hidrógeno
por parte de Proteus spp. y lactosa para la detección de la fermentación de
lactosa.

2. Agar MacConkey: Este medio es utilizado para el aislamiento y diferenciación

de Enterobacteriaceae, incluyendo Proteus spp. El agar MacConkey contiene cristal
violeta y sales biliares que inhiben el crecimiento de bacterias Gram positivas y
selectivamente permiten el crecimiento de bacterias Gram negativas, como Proteus
spp. Las colonias de Proteus spp. en el agar MacConkey suelen ser de color rosa o
rojo debido a su capacidad para fermentar la lactosa.

3. Agar de citrato de Simmons: Este medio se utiliza para la diferenciación de

bacterias que pueden utilizar el citrato como única fuente de carbono. Algunas
cepas de Proteus spp. pueden crecer en este medio, lo que resulta en un cambio de
color de verde a azul debido a la alcalinización del medio causada por la utilización
del citrato.

4. Agar de sulfato de indol de Kovacs: Este medio se utiliza para la detección de la

producción de indol por parte de Proteus spp. y otras bacterias. La producción de
indol se detecta mediante la adición de un reactivo de Kovacs al medio, lo que
produce un color rojo característico en presencia de indol.

d) PRUEBAS BIOQUÍMICAS: Las pruebas bioquímicas utilizadas para la

identificación de las bacterias Proteus incluyen:
1. Fermentación de la glucosa: Las bacterias Proteus son capaces de fermentar la
glucosa. Se puede realizar una prueba utilizando tubos de fermentación de glucosa
para verificar este metabolismo.
2. Producción de ureasa: Las bacterias Proteus son conocidas por ser altamente
ureasas positivas. La prueba de ureasa puede realizarse agregando el cultivo
bacteriano a un medio conteniendo urea y observar el cambio de color debido a la
liberación de amoníaco.
Cabe destacar que estas son solo algunas pruebas comunes utilizadas para la
identificación de las bacterias Proteus. La identificación precisa requeriría pruebas
bioquímicas adicionales y técnicas de biología molecular.

1.4.- KLEBSIELLA: Klebsiella es una bacteria Gram negativa que puede causar
infecciones urinarias en los seres humanos. Tiene la capacidad de colonizar y
multiplicarse en el tracto urinario, lo que puede provocar diversos síntomas y
complicaciones.

a) CARACTERISTICAS GENERALES: En cuanto a las características generales

de Klebsiella, es una bacteria anaerobia facultativa, lo que significa que puede
crecer tanto en presencia como en ausencia de oxígeno. Además, es móvil gracias
a sus flagelos y produce una cápsula protectora alrededor de la célula, lo que le
confiere resistencia a los antibióticos y a los mecanismos de defensa del hospedero.

b) PATOLOGÍAS: En términos de patologías, la Klebsiella puede causar

infecciones del tracto urinario, como cistitis y pielonefritis. También puede
asociarse con otras infecciones, como neumonía, infecciones de la sangre
(bacteriemia) y abscesos en diferentes órganos.

c) MEDIOS DE CULTIVO Para cultivar Klebsiella en medios de cultivo, se

pueden utilizar agar sangre y agar MacConkey. El agar sangre permite el
crecimiento de la bacteria y ayuda a determinar la hemólisis de los glóbulos rojos.
El agar MacConkey, por su parte, es selectivo para bacterias Gram negativas y
permite diferenciar entre especies lactosa-fermentadoras y no fermentadoras. Las
Infecciones urinarias causadas por la bacteria Klebsiella pueden diagnosticarse
utilizando diferentes medios de cultivo. Aquí hay algunos medios de cultivo
comunes utilizados para el aislamiento de la Klebsiella en muestras de infecciones
urinarias:

1. Agar CLED (Cystine-Lactose-Electrolyte-Deficient): Este medio de cultivo es

selectivo para las bacterias del tracto urinario y permite el crecimiento de Klebsiella
spp. Además, tiene la capacidad de diferenciar entre cepas fermentadoras y no
fermentadoras de lactosa, lo que puede ser útil para la identificación inicial.

2. Agar MacConkey: Este medio también es selectivo para el crecimiento de

bacterias entéricas, incluyendo Klebsiella spp. El agar MacConkey contiene sales
biliares y cristal de violeta, lo que inhibe el crecimiento de organismos gram
positivos y permite el crecimiento de las bacterias gram negativas.

3. Agar Eosina Azul de Metileno (EMB): Este medio de cultivo también es

selectivo para las bacterias entéricas y puede usarse para el aislamiento y
diferenciación de Klebsiella spp. El agar EMB contiene eosina y azul de metileno,
lo que permite la diferenciación de bacterias lactosa fermentadoras como Klebsiella
spp.

Es importante tener en cuenta que estos son solo algunos de los medios de cultivo
utilizados para el aislamiento de Klebsiella en infecciones urinarias. El laboratorio
clínico determinará qué medio de cultivo utilizar según su protocolo y experiencia.
Además, la identificación precisa de la especie de Klebsiella puede requerir pruebas
adicionales, como pruebas bioquímicas o técnicas moleculares.

d) PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
En cuanto a las pruebas bioquímicas, algunas de las pruebas utilizadas para
identificar Klebsiella incluyen:

o Fermentación de lactosa: Klebsiella es positiva para esta prueba, lo

que significa que es capaz de fermentar la lactosa.
o Producción de indol: Klebsiella es negativa para esta prueba, lo
que ayuda a distinguirla de otras especies bacterianas.
o Producción de ureasa: Klebsiella es positiva para esta prueba, lo
que significa que puede descomponer la urea en amoníaco y
dióxido de carbono.
o Producción de gas a partir de glucosa: Klebsiella es positiva para
esta prueba, lo que se observa como la formación de burbujas de
gas en un medio con glucosa.
Estas pruebas bioquímicas son parte del proceso de identificación de Klebsiella y
pueden variar según los laboratorios y los sistemas de representación utilizados.

1.5. CITROBACTER:
Características generales:
Estas son bacterias móviles con diferentes capacidades para fermentar la lactosa,
algunas pueden usar citrato, otras no, los factores de virulencia de algunas especies
son el antígeno O somático y los flagelos H y K de superficie, lo que lleva a su
reactividad cruzada con otras bacterias intestinales.
El género Citrobacter es un grupo de bacterias aeróbicas Gram negativas que se
encuentran comúnmente en el agua, el suelo, los alimentos, las plantas y como flora
saprofita en el tracto gastrointestinal de muchos animales no humanos. El género
Citrobacter, aunque bioquímica y serológicamente similar a Salmonella, rara vez
causa infecciones oportunistas.
Se trata de microorganismos ubicuos que a menudo causan infecciones graves,
especialmente en personas con sistemas inmunitarios débiles. Es uno de los
patógenos más importantes que se presentan en las unidades neonatales
hospitalarias. En humanos causan: infecciones del tracto urinario, meningitis
neonatal y abscesos cerebrales. Destruyen las microvellosidades, provocando
cambios muy característicos llamados adhesión y rechazo.
Patologías:
citrobacter freundii es un bacilo Gram negativo que a diferencia de otras especies
de Citrobacterias productoras de H2S y de las salmonelas, este microorganismo no
es capaz de descarboxilar lisina, hidrolizar ONPG y crecer en caldo de cianuro de
potasio, por lo que es infecciones del tracto urinario, heridas, infecciones
gastrointestinales; especialmente en pacientes inmunocomprometidos y
hospitalizados, es también un microorganismo que puede adquirir resistencia a
varias clases de antibióticos, gracias a la presencia de genes que le permiten
producir enzimas como la KPC, en este caso su tratamiento se complica porque las
opciones terapéuticas se restringen a tigeciclina y colistina, actúa como oportunista
y puede colonizar a personas en comunidad por lo que su diseminación debería ser
controlada.
Medios de cultivo:
E.M.B. Agar (con Eosina y Azul de Metileno)

USO:
Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo
de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales.
Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
FUNDAMENT0:
El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de
Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de
enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos.

Es nutritivo por la presencia de peptona que favorece el desarrollo microbiano y

gracias a esto se reconoce la diferenciación entre organismos capaces de utilizar la
 lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los
indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre una
amplia variedad de bacterias Gram positivas, cabe decir también que el agar es el
agente solidificante.
Gracias a que Citrobacter spp. presenta un característico brillo metálica y las cepas
que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras
que las que no lo hacen son incoloras.
Pruebas bioquímicas:
1.1.Prueba del Citrato:

Esta prueba sirve para determinar si un

organismo es capaz de utilizar citrato
como única fuente de carbono y
compuestos amoniacales como única
fuente de nitrógeno en su metabolismo,
provocando una alcalinización del
medio. Entre las enterobacterias estas
características se dan en los siguientes
géneros: Enterobacter, Klebsiella,
Serratia, Citrobacter y algunas especies
de Salmonella. Se cultiva el
microorganismo en agar citrato de
Simmons.
Este medio contiene citrato de sodio y fosfato de amonio como fuentes de carbono
y de nitrógeno respectivamente, y azul de bromotimol, como indicador de pH. Sólo
las bacterias capaces de metabolizar el citrato podrán multiplicarse en este medio
y liberarán iones amonio lo que, junto con la eliminación del citrato (ácido),
generará una fuerte alcalinización del medio que será aparente por un cambio de
color del indicador de pH, de verde a azul.

1.2.Procedimiento:
Sembrar con un asa de siembra en la superficie inclinada del medio e incubar a 37
ºC durante 24-48 horas.
1.3.Revelado:
Las bacterias capaces de usar el citrato provocarán el cambio de color del medio de
verde a azul intenso, por viraje del indicador de pH, azul de bromotimol, a la vez
que se observa crecimiento en la superficie.
2.1. Prueba de la Ureasa:
 Determina la capacidad de un organismo de
desdoblar la urea formando una molécula de dióxido
de carbono y dos moléculas de amoniaco por acción
de la enzima ureasa. Esta actividad enzimática es
característica de todas las especies de Proteus y se
usa sobre todo para diferenciar este género de otras
enterobacterias que dan negativo o positivo
retardado.
Se cultiva el microorganismo en slant en agar urea
de Christensen. Este medio se complementa después del autoclavado con 50 ml/l
de urea y esta será degradada por aquellos microorganismos capaces de producir la
enzima ureasa, produciendo amoniaco que hará variar el color del indicador de
amarillo a rojo, poniéndose así de manifiesto la actividad ureasa.
2.2. Procedimiento:
Inocular el medio de cultivo mediante estría en la superficie inclinada e incubara
37 ºC durante 24 horas.
2.3. Revelado:
Las bacterias que hidrolizan la urea hacen que el medio de cultivo tome color
fucsia, debido a la alcalinización del mismo por producción de amonio, que
manidfiesta por un viraje del indicador de pH (rojo de fenol).

2. CARACTERÍSTICAS DE INFECCIONES URINARIAS:

Las infecciones del tracto urinario son infecciones comunes que ocurren cuando las
bacterias ingresan a la uretra, generalmente a través de la piel o el recto e infectan
el tracto urinario. Pueden afectar muchas partes diferentes del tracto urinario, pero
la más común es una infección de la vejiga (cistitis). tipo.
La infección de los riñones (pielonefritis) es otro tipo de infección urinaria, esta es
menos común que la infección de vejiga, pero más grave.
Factores de riesgo:
Algunas personas tienen mayor riesgo de contraer una infección urinaria. Las
infecciones urinarias son más comunes en las mujeres porque la uretra de las
mujeres es más corta y está más cerca del recto. Esto facilita la entrada de bacterias
a las vías urinarias.
Otros factores que pueden aumentar el riesgo de contraer infecciones urinarias son:
• Una infección urinaria anterior.
• Actividad sexual.
• Cambios en las bacterias que viven dentro de la vagina (flora vaginal). Por
ejemplo, la menopausia o el uso de espermicidas pueden causar estos cambios.
• Embarazo
• Edad (los adultos mayores y los niños pequeños tienen más probabilidades de
contraer infecciones urinarias).
• Problemas estructurales en las vías urinarias, como agrandamiento de la
próstata.
 • Mala higiene, por ejemplo, en los niños que están aprendiendo a ir al baño.
Síntomas:
Los síntomas de una infección de vejiga pueden incluir:
• Dolor o ardor al orinar.
• Orinar con frecuencia.
• Sentir la necesidad de orinar a pesar de que la vejiga esté vacía.
• Sangre en la orina. Presión o retorcijones en la ingle o la parte inferior del
abdomen.
Los síntomas de una infección de los riñones pueden incluir:
• Fiebre.
• Escalofríos.
• Dolor en la parte baja de la espalda o en el costado.
• Náuseas o vómitos.
Como dato adicional se puede decir que las mujeres son más propensas a sufrir este
tipo de infecciones que los varones, ya que la uretra de las mujeres es más corta y
está más cerca del recto.

3. PRUEBAS DE DIAGNÓSTICO EN INFECCIONES URINARIAS

Análisis de orina: Se realiza un análisis químico y microscópico de la orina para
detectar la presencia de infección. Se busca la presencia de células sanguíneas,
bacterias o cristales que son indicadores de una infección urinaria.

Cultivo de orina: Esta prueba se utiliza para identificar el tipo de bacteria causante de
la infección y determinar su sensibilidad a los antibióticos. Se toma una muestra de
orina y se coloca en un medio de cultivo para permitir el crecimiento de las bacterias
presentes.

Urocultivo: Es similar al cultivo de orina, pero se requiere una muestra más específica.
Se utiliza para confirmar la presencia de bacterias en la orina y determinar qué tipo
de bacteria está causando la infección.

Pruebas de sensibilidad antibiótica: Después de identificar las bacterias a través de un

cultivo, se realiza una prueba de sensibilidad antibiótica para determinar qué
antibióticos serán más efectivos para tratar la infección.

Estas son solo algunas de las pruebas microbiológicas utilizadas en el diagnóstico de

infecciones urinarias. Es importante consultar a un médico para obtener un
diagnóstico y seguimiento adecuados.
4. TRATAMIENTO DE INFECCIONES URINARIAS

Obtención de muestras: Para realizar un análisis microbiológico, se necesita una

muestra de orina. Es importante recolectar la muestra correctamente, siguiendo las
instrucciones proporcionadas por el médico o el laboratorio.
Cultivo de orina: Una vez obtenida la muestra, se realiza un cultivo de orina para
identificar las bacterias presentes. En este proceso, se siembra una muestra de orina
en un medio de cultivo que favorece el crecimiento bacteriano.

Identificación de bacterias Gram negativas: Después de que las bacterias crecen en el

medio de cultivo, se realiza una tinción de Gram para distinguir las bacterias Gram
negativas de las Gram positivas. Esta tinción ayuda a determinar la forma y la
estructura de las bacterias presentes en la muestra.

Pruebas de sensibilidad a los antibióticos: Una vez identificadas las bacterias Gram
negativas, se realizan pruebas de sensibilidad a los antibióticos para determinar qué
medicamentos serán efectivos para tratar la infección. Estas pruebas ayudan a
seleccionar el tratamiento más adecuado.

Es importante recordar que estos son solo puntos generales sobre los análisis
microbiológicos para infecciones urinarias causadas por bacterias Gram negativas.
Para un tratamiento preciso y personalizado, debe consultar a un médico especialista
o un microbiólogo clínico.