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Versión 1.1
GUÍA DE LABORATORIOS, TALLERES O TAREAS Última actualización 11-
05-2017
PRÁCTICAS
PERA
CANTIDAD REACTIVO DESCRIPCION
El reactivo de Benedict contiene ion cúprico (cobre) completado
con citrato en solución alcalina. La prueba de Benedict identifica
azúcares reductores en función de su capacidad para reducir los
1 iones cúpricos (Cu 2+) a óxido cuproso (Cu +) a pH básico (alto). El
óxido cuproso es de verde a naranja rojizo. En términos generales,
la reducción es un tipo de reacción química que se empareja con la
REACTIVO DE BENEDICT oxidación.
CANTIDAD SUSTANCIAS DESCRIPCION
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BEBIDA ENERGENZANTE
NECTAR
leche entera por su sabor, cremosidad y consistencia, Leche Entera
100% leche. Es una bebida de gran valor nutricional: contiene todos
los carbohidratos, proteínas, minerales y vitaminas de la leche. Es
1 un alimento delicioso y versátil que es esencial para consumo
humano.
LECHE
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PRÁCTICAS
C.DESAROLLO DE LA PRACTICA
C1. OBJETIVOS
1.Establecer el método de ensayo para detectar la presencia de azúcares reductores en función de su capacidad para
reducir los iones cúpricos (Cu 2+) a óxido cuproso (Cu +)
2. Detectar los azúcares reductores, normalmente si son monosacáridos o disacáridos.
3. Preparar disoluciones al 5% y 10 % con azúcar comercial
4. Comparar y diferenciar los resultados obtenidos tanto en las soluciones azucaradas como en la del agua.
5. Interpretación del resultado por medio de la coloración método semicuantitativo.
1. PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA
Procedimiento:
1. Tener listo los materiales a usar en la práctica.
2. Preparar las disoluciones al 5 % y 10 % con el azúcar comercial.
3. Identificar los tubos de ensayo en base a las sustancias que vamos a utilizar (bebidas azucaradas y no
azucaradas) y colocarlos en una gradilla.
4. Con la ayuda de una pipeta extraemos 3ml de las sustancias que son: el agua, el néctar, la limonada, bebida
energética o hidratante, bebida con azúcar sintética, y la soda, dilución del 5% Y 10 % de azúcar comercial,
después colocarlos en los tubos de ensayo.
5. Agregar 1ml de reactivo de Benedit y agitar suavemente los tubos de ensayo.
6. Verificar si cambia de color antes de ponerlos a baño María.
7. En un vaso de precipitación poner las muestras rotuladas a calentar a baño María por 10 minutos y verificar el
cambio de color a temperaturas 65 ͦC.
8. Dejar enfriar las muestras por 15 min.
9. Observar el cambio que se produce al aplicar calor y al dejar que las muestras se enfríen y concluir el resultado
de la práctica.
Muchos monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, y algunos disacáridos, son azúcares reductores porque poseen un
aldehído libre (no enlazado a los otros grupos en la molécula). La Prueba de Benedit se usa para detectar la presencia de
azúcares reductores, porque el reactivo de Benedict contiene cobre que se reduce en presencia de azúcares reductores.
Durante esta reacción el azúcar se oxida.
La reacción antes mencionada se conoce como una reacción oxidación-reducción (REDOX) porque la oxidación del azúcar
sucede simultáneamente con la reacción de reducción del cobre 2.
Cuando se añade el reactivo de Benedit al azúcar reductor, y se aplica calor, el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo
intenso, mientras mayor sea la abundancia de los azúcares reductores. Un cambio a color verde indica la presencia de
menos azúcares reductores, mientras que los azúcares que no reducen, como la sacarosa, no producen cambios en color
y la solución se mantiene azul. (BIO-OER, 2023)
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fig. 1
fig.2 fig. 3
Tabla.1
Coloración antes Coloración Prueba semicuantitativa
Muestra de aplicar calor después de de azúcares reductores Hidrato de carbono
aplicar calor según la coloración detectado
1-Agua Azul Azul 0% negativa No contiene
2-Bebida energizante Azul Azul 0% negativa Sacarosa
3-limomada Azul Ladrillo intenso 3.5% positiva Fructosa
4-Bebida sintética Verde oscuro Verde oscuro 1.0 % positiva Edulcorante-Aspartame
5-Bebida azucarada Verde claro Ladrillo intenso 3.5 % positiva Fructosa
6-Nectar Verde claro Ladrillo 3 % positiva Glucosa-fructosa
7-Leche Azul Ladrillo 3% positiva Lactosa (Glucosa-
Galactosa)
10-Dilucion al 5% de Azul Azul 0% negativa Sacarosa
azúcar
11-Dilucion al 10% de Azul Azul 0% negativa Sacarosa
azúcar
Posterior a la metodología establecida para la identificación de azúcares reductores, se obtuvieron los resultados que se
exponen en la tabla 1. Para la evaluación en la identificación de azúcares reductores se utilizaron criterios Para categorizar
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la pigmentación en cada muestra, en base a la coloración semicuantitativos Fig.3 para determinar el % de azúcares
presentes en la muestra.
Los azúcares reductores tienen estructuras que se forman mediante los enlaces glucosídicos, por ejemplo, lactosa y
maltosa, en caso de presentar carbono anomérico libre, se les conoce como azúcares reductores, estas estructuras, por
su naturaleza, pueden oxidar especies Cu+2 a Cu+, formando un precipitado de tono ladrillo intenso o naranja.
La pigmentación inicial para las muestras de la bebida energizante, dilución de azúcar comercial al 5% y al 10 %, sus
resultados dieron negativos con un color azul en medio frío y aplicando calor, en su presentación en el etiquetado
nutricional fueron valores de 0 para azúcares, debido a que presentan como parte de sus ingredientes a la sacarosa que
es un disacárido que lo convierte en azúcares no reductores, y que es permitido por el códex alimentario como parte de
sus ingredientes.
La pigmentación para el agua fue de color azul en medios frío y aplicando calor, dando como resultado la prueba negativa,
que hace referencia a que el agua no contiene ningún azúcar reductor, ni es permitido en bebidas de aguas potables que
lo contengan.
La pigmentación para la muestra de limonada, bebida azucarada , néctar y la leche dieron positivos para azúcares
reductores, con colación en medio frío para la limonada y para la leche azul, para la bebida azucarada y néctar un
coloración verde clara que al aplicar calor en baño María por 10 minutos se tornó de color ladrillo, confirmando que como
parte de sus ingredientes para la limonada, bebida azucarada y néctar es la de glucosa y fructosa las cuales son
monosacáridos siendo azúcares reductores, y la leche que contiene lactosa que a pesar de ser un disacárido este es un
disacárido reductor por contener en su composición moléculas de glucosa y galactosa. (247-2005, 2003)
Y como resultado para la bebida sintética, dio una coloración verde oscura en medio frío y aplicando calor por medio de
baño María por 10 minutos, observando que permaneció el color verde oscuro, la razón por la que se mantuvo fue porque
contiene azúcares reductores, aunque en menor cantidad, contradiciendo que su composición no es totalmente libre de
azúcares reductores como lo menciona en su etiqueta que hace referencia que solo le aplican el edulcorante que es el
aspartame, en este caso.
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Recordar siempre la importancia de este tipo de análisis, para así comprobar la veracidad de la etiqueta en cada
producto, que es destinado al consumidor, mediante un resultado positivo o negativo según se necesitaría.
ANEXO
Fotos de los pasos del procedimiento de la prueba de Azucares Reductores
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2. Con la ayuda de una pipeta agregar 5 ml de las muestras a utilizar en los tubos de ensayo.
3. Adicionar 1 ml del reactivo de Benedit en cada muestra de bebidas y agitar suavemente los tubos de ensayo
4.Colocarlos a baño María por 10 min hasta ver cambio en la coloración, midiendo que la
temperatura no sobrepase los 65°C.
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