TOXICOLOGIA

Historia de la toxicología:

Antigüedad:

- Shen nung  emperador chino llamado padre de la medicina china, ensayo 365 plantas
encontrando su uso medicinal y efectos tóxicos. VENENOS EXPERIMENTALES A BASE DE
PLANTAS MEDICINALES. Muere intoxicado.
- Papiro Ebers: documento antiguo conservado, se relaciona con la toxicología, información
y se proponen tratamientos para intoxicaciones.
- Gula 1400 ac: hechizos, encantos, venenos.
- Homero: odisea e iliada uso de flechas envenenadas
- Sócrates 470-399 aC  condenado a muerto  cicuta posee un alcaloide coniina que
ataca el sistema nervioso causa depresión de este y causa la muerte.
- Hipócrates: 460-377  detecto toxicidad en mineros
- Mithridates IV: gobernante, probaba venenos y antídotos para protegerse a si mismo.
- Silia Cornelius: ley anti venenos, lex Cornelia di sicaris
- Cleopatra 69-30 aC: experimento con estricnina genera falla cardiaca y muerte cerebral. Se
suicido con una cobra.
- 79 dC explosión monte Vesubio: acabo con Pompeya y Herculano y mueren las personas
por asfixia por H2S

Edad media:

- Cornezuelo de centeno: cornezuelo hongo que genera un metabolito toxico ergotamina 

genero ergotismo  fiebre de san antonio: alucinaciones, convulsiones y contracción
arterial.
- Moises maimonides: tratado venenos y antídotos
- Raymundus lullius  descubrimiento del eter como anestesico

Renacimiento

El uranio afecta los riñones falla renal y puede causar la muerte.

- Rodrigo y cesar Borgia 1400-1500: arsenico para envenenar.

- Da vinci: experimento con varios venenos, experimentaba con animales dándoles órganos
envenenados.
- Pope Clement VII: murió envenenado por un hongo armanita phalloides.
- Paracelsus 1943-1541 padre de la toxicología, todas las sustancias son veneno, lo que lo
diferencia es la dosis entre un veneno y un remedio.
- Catalina de medici: usaba enfermos y pobres para experimentar venenos
- Ramazzini: toxicología ocupacional
- Giulia tophania: proveedora de veneno, asesinada por estrangulamiento  rey Luis XIV ley
que prohíbe venta de veneno.
- Cólico de devon= cólico saturnino: envenenamiento por plomo  sidra contaminada
 - Percivall pott: vinculo entre agentes carcinógenos y el cancer escrotal en deshollinadores.
- Francois magendie: documento de morfina, quinina, estricnina y mas alcaloides.
- Mateu orfila: toxicología forense
- Thomas quincey: confesiones de un comedor de opio
- James marsh: primera prueba para detectar arsenico
- Theodore wormley: microquimica de venenos escribe ese libro
- Ley 1851 de arsenico: exigir a los productores a colorear el arsenico
- Friedrich gaedcke cocaína fines terapéuticos era legal.
- 1831 produccion de cloroformo como anestesico durante el parto, retirado por toxicidad
hepática.
- 1915 guerra química: cloro, fosfógeno, cloropicrina, gas mostaza.
- Protocolo de ginegra se prohíbe el uso de armas químicas y biológicas
- Incidente de Hawks nest: se contratan personas para que caben un túnel, tierra rica en
silice, mueren por silicosis aguda
- Gerhard schrader: desarrollo sarin, tabun soman, ciclosarin, insecticidas. Usados en la
segunda guerra mundial.
- Elixir sulfanilamida: cambio de los excipientes en vez de usar propilenglicol se usa
etilenglicol, neurotóxico.
- Hofman: LSD se sintetiza en laboratorios sandoz.
- DDT: insecticida, malaria
- 24D: herbicida
- Minamata: Japón 1950, vertimiento de desechos con metales pesados mercurio,
neurotóxico afecta especialmente a los niños.
- Centros de control de envenenamiento 1950´s
- Taliomida: control de nauseas embarazadas, sustancia teratogénica causo malformaciones
congénitas.
- Sociedad toxicología 1961
- Envenenamiento con arsenico en bangladesh, agua subterránea contaminada con
arsenico.
- Accidente de seveso Italia: planta que fabricaba plaguicidas liberación de una nube toxica
con dioxina TCDD, cubriendo 1810 hectareas, no hubo muerte.
- Tylenol tamperer: acetaminofen,
- Desastre de bhopal: escape de isocianato de metilo, muerte de 20000 personas y varias
mas se ven afectadas.
- Chernobyl: explosión produjo columna de desechos radioactivos.
- Lago de nyos: aguas saturadas de co2, en 1986 temblor que hizo que se liberara gran
cantidad co2 mueren por asfixia.

CLASE 2 conceptos

Toxicidad: capacidad para producir daño en un organismo

Toxicidad aguda: cantidad alta tiempo corto, capacidad para producir efectos adversos en corto
plazo.
Toxicidad crónica: exposición repetida y dosis bajas, capacidad de una sustancia para producir
efectos adversos debido a exposición prolongada.

Toxicocinética: disposición y movimiento del toxico a través del organismo y los factores que
condicionan la disposición de este. ADME.

Toxicodinámica: proceso de interacción entren una sustancia con los lugares diana, órganos
blancos, y las consecuencias bioquímicas y fisiopatológicas que conducen a los efectos tóxicos.

Toxina: sustancia venenosa producida por un organismo ( microorganismo, animal o planta)

Toxinología: disciplina dedicada al estudio de la química bioquímica farmacología y toxicología de

las toxinas.

Veneno: toxina animal utilizada para autodefensa o depredación liberada por mordedura o
picadura. Toxico para acabar con la vida de otra persona.

Xenobiótico: sustancia que interactúa con un organismo y que no es uno de sus componentes
naturales.

Fármaco: sustancia químicamente pura que va a tener un efecto terapéutico.

Droga de abuso: sustancia usada con fines recreativos que causa adicción.

Intoxicación: proceso patológico que va acompañado por signos y síntomas clínicos causado por
sustancia de origen exógeno y endógeno.

Biomarcador: indicador, identificar en muestras o a nivel de sistemas biológicos y proporciona una

medida. Existen 3 exposición efecto y susceptibilidad.

Biomarcadores de exposición: proporciona información cuantitativa de la exposición e ingreso del

toxico, metabolito o producto de la interacción. Depende de la tecnología analítica con la que se
cuente. El producto de interacción por ejemplo cuando hay intoxicación por monóxido de carbono
se forma carboxihemoglobina esta se mide y es un biomarcador de exposición.

Biomarcadores de efecto: medido por un cambio químico, morfológico, fisiológico y

comportamental y otras alteraciones del organismo.

Biomarcador de susceptibilidad: da información de la sensibilidad individual para responder a la

exposición a un xenobiotico.

LOS BIOMARCADORES QUE MAS SE USAN SON LOS DE EXPOSICION O EFECTO.

Sustancia psicoactiva: droga o fármaco que es capaz de producir cambios en el pensamiento.

Fetotoxicidad: efectos tóxicos causados en feto.

Embriotoxicidad: capacidad de una sustancia para producir efectos tóxicos en la progenie.

(concepción- estado fetal). Malformaciones, disfunciones, alteraciones de crecimiento, muerte
prenatal y funciones post natales alteradas.

Genotoxicidad: capacidad de causar daño a material genético, mutagénico o carcinógeno.

Mutagenicidad: capacidad de un agente de aumentar la frecuencia de inducción de cambios
genéticos.

Mutágeno: sustancia capas de inducir cambios, en el genotipo de una célula como consecuencia
de alteraciones o de perdida de genes o de cromosomas o de parte de los mismos.

Carcinogenicidad: agente físico, químico o biológico capaz de incrementar la incidencia de

neoplasias malignas.

Teratógeno: agente administrado a la madre que puede inducir malformaciones en la decendencia.

Contaminante: componente indeseable que puede generar un riesgo al usuario consumidor.

Nivel sin efecto adverso observable- NOAEL: máxima concentración o nivel de una sustancia en el
cual no se va a observar ningún efecto toxico a nivel morfológico, fisiológico de crecimiento o
durante la vida de los organismos vivos diana.

Nivel mínimo de efecto adverso observable- LOAEL: menor concentración o cantidad de una
sustancia que según la observación causa cualquier modificación indeseable en un organismo
distinguible de un organismo idéntico.

Dosis toxica: proporción de una sustancia que produce intoxicación sin llegar a ser letal.
TOXICIDAD GENERAL (ORGANOS BLANCO)

La toxicidad puede ser  local – topica (piel ojos)

 Sistémica (órganos)

Toxicidad local: en dermis o mucosa  los efectos adversos son observables

Irritación: cambios inflamatorios reversibles después de la exposición a la sustancia

Corrosión: cambios irreversibles por daños en tejidos expuestos a la sustancia.

Absorción dérmica: hay absorción cuando existen heridas a profundidad.

 No hay efecto de primer paso

 Disminuye la variabilidad ente individuos
 Pasa a ser toxicidad sistémica

La exposición por vía ocular hace que por lagrimeo el agente toxico pase a la cornea y puede llegar
a retina. Desde el conducto naso lagrimal puede llegar a aparato digestivo y luego sangre.

ABSORCION OCULAR: inflamación conjuntival.

TOXICIDAD SISTEMICA:

Oral

Toxico Dérmica Absorción  llega a torrente sanguíneo  es acá cuando el

toxico

Se distribuye y llega a

Inhalatoria órganos

En la toxicidad sistémica hay un daño en un sitio diferente al sitio de entrada

Principales vías de entrada:

Oral 71,5%

Respiratoria 15,8

Dérmica 5,7

Desconocida 5,6
Intramuscular 0,7

Ocular 0,3

Transplacentaria 0,2

ORGANOS BLANCOS DE TOXICIDAD

1. HIGADO: trae hepatotoxicidad

Exposición aguda o crónica puede alterar funciones ocasionando perdida o deterioro de la

funcionalidad. Es evidente con la inhibición de procesos de transporte y síntesis, se puede
ocasionar destrucción de un número considerable de células, efecto crónico a bajas dosis –
presentando tejido cicatrizal no funcional.

Homeostasis  hipoglicemia, endotoxinemia

Filtración de partículas  endotoxinemia

Síntesis de proteínas  hemorragia, hígado graso

Bioactivacion  ictericia

Formación de bilis  esteatorrea, disminución de vitamina e

LESIONES Y AGENTES HEPATOTOXICOS

 Hígado graso: causantes CCl4, etanol, acido valproico. Se producen efectos como:
 Acumulación lipídica en hepatocitos
 Interferencia en el metabolismo de lípidos
 Reversible- no hay muerte de hepatocitos
 Necrosis: causantes acetaminofén, éxtasis, etOH: las células sufren hinchazón, desintegración de
núcleo, peroxidación lipídica, lesión mitocondrial, entrada masiva de Ca++
 Colestasis canalicular: clorpromazina ciclosporina. Formación de cantidad de bilis menor de lo
normal. Aumento de compuestos que se concentran en bilis. Puede ser aguda o transitoria.
 Lesión de conductos biliares: causante la amoxicilina. Trasladan bilis desde el hígado al tubo
digestivo. Aumento de fosfatasa alcalina, sales biliares. Perdida de colangiolos (vasos sanguíneos en
lobulillo hepático)  isquemia.
 Lesión sinusoides: obstruir eritrocitos, por acetaminofén. Destrucción de pared endotelial.
 Cirrosis hepática: por etanol, arsenico. Deposito de fibras de colageno tras una lesión o inflamación.
Los hepatocitos destruidos son reemplazados por cicatrices fibrosas. Irreversible.
 Tumores: a nivel de hepatocitos, conductos biliares. Causantes andrógenos.

2. RIÑON: nefrotoxicidad. Se dan cuatro alteraciones importantes, la mas común es la renal aguda. 
de disminuye la filtración glomerular. Hiperazomia  acumulación de desechos NITROGENADOS en
sangre.

Sustancias causales:

Prerrenal: diuréticos- interleucina

Vasoconstricción: anfotericina
Cristaturia: triantimida
Acción toxica tubular: vancomicina
Lesión endotelial: quinina
Glomerulopatía: oro

ORGANOS BLANCO DE TOXICIDAD

 Insuficiencia renal crónica: lesión a nivel intersticial de los túbulos. Es irreversible.
 Síndrome nefrótico: lesión de membrana basal glomerular (paso de proteínas a la orina)
frecuentemente acompañado de albuminemia.
 Nefritis: se lesiona intersticio renal, cursando generalmente con hrmaturia, oliguria, disuria.
Agentes nefrotóxicos
1. Metales pesados: tienen varios sitios blanco en riñón  generan toxicidad porque se unen a
grupos sulfhidrilo de proteínas renales volviéndolos disfuncionales.
2. Cadmio: se concentra a 50% llegando a producir lesión.
3. Hidrocarburos halogenados  cloroformo, diana: tubulo proximal, produce proteinuria,
glucosuria aumento de BUN, general el tricloruetanol HCl + fosgeno.
4. Bromobenceno: se bioactiva (el conjugado es nefrotóxico) 1000 veces mas toxico causando
proteinuria, glucosuria y enzimas celulares en orina.
5. Micotoxinas: fumonisinas (fusarrum monoliforme) maíz. Toxica para el riñon de ratas y conejos.
Aumenta diuresis, excreción de proteínas.
Medicamentos:
1. Acetaminofén: causa necrosis del tubulo proximal y aumento BUN y de creatinina plasmática;
glucosuria, proteinuria.
2. AINE: exposición aguda es reversible. Crónica irreversible. Disminuye flujo sanguíneo renal y FG
oliguria.
3. Aminoglucósidos: insuficiencia renal sin oliguria. Disminuye FG aumenta creatinina aumenta
BUN y aumenta poliuria.
4. Anfotericina: poliuria, resistente a la hormona antidiurética, acidosis renal.
5. Ciclosporinas: vasculopatía aguda
6. Cisplatino: IR aguda y crónica y poliuria
7. Contrastes radiológicos: medios yodados- vasoconstricción producen radicales libres.

Aparato respiratorio
1. Fibrosis: exceso de colágeno (mayor rigidez) bleomicina – paraquat (plaguicida).
2. Enfisema: pulmones excesivamente distendidos, destrucción de la superficie de intercambio de
gases (humo de cigarrillo).
3. Asma: crisis de disnea – agentes irritantes como mercurio
4. Cáncer de pulmón – cigarrillos

Aparato S nervioso
1. Neuropatías: daño a neurona, doxorrubicina, NPTP, metilmercurio.
2. Axonopatia: daño a la mielina y axon (disulfuro de carbono, organofosforados)
3. Mielopatía: separación o perdida selectiva de mielina – PLOMO
4. Neurotoxicidad: alteración en la neurotransmisión, impedir recaptación o alterar sistemas de
segundos mensajeros – COCAINA ANFETAMINA.
MANGANESO  afecta síntesis de DA. ALQUILMERCURIO  impide recaptación
RESERPINA  impide almacenamiento de DA
TOXINA  inhibición
ORGANOFOSFORADOS inhiben Ach-asa

Sangre
1. Hipoxia celular : CO carboxihemoglobina.
2. Hemorragia
3. Infecciones
4. Anemia aplasica: pancitopenia, reticulocitopenia, hipoplasia medular
5. Pancitopenia: disminución generalizada de todas las líneas celulares
6. Reticulocitopenia: disminución de las formas intermedias de eritrocitos
7. Hipoplasia medular: afecta la hematopoyesis
8. Leucemia
9. Trombocitopenia

Cardiovascular
1. Alteración del ritmo cardiaco
2. Alteración de estructura y función de membranas
3. Estrés por mecanismos redox
4. Acumulación de tóxicos en células vasculares
5. Bioactivacion de vasos

Piel
1. Contacto irritación o corrosión. Cancer (arsenico) o rayos uv

Sistema reproductivo
1. Infertilidad, aborto, anormalidades del feto, impotencia sexual, cancer infantil

Sistema endocrino
1. Disruptores endocrinos
2. Canceres
3. Trastornos de desarrollo: problemas de aprendizaje y disminución de coeficiente de inteligencia
Especialidades de la toxicología

Se divide en:

 Clinica
 Forense
 Ocupacional
 Ambiental
 Alimentos
 Analítica
 Otras áreas

Toxicología analítica: aplicación de instrumentos de química analítica para la estimación cualitativa o

cuantitativa que pueden ejercer efectos adversos sobre organismos vivos. Es transversal al listado
anteriormente mencionado. Lo mas relevante es que las muestras son biológicas (fluidos, tejidos) no
biológicas restos de comida, muestras de suelo, ambientales, líquidos extraños) dichas muestras están
compuestas de una matriz donde se encuentra el analito y esta muestra es sometida a extracción; las
metodologías analíticas deben estar estandarizadas con el animo de sustentar una decisión jurídica

La toxicología ocupacional: esta encaminada a la aplicación de principios hacia la comprensión y gestión de

riesgos en el trabajo:

- Riesgo físico: radiación, temperatura y presiones extremas

- Biológico ambiental
- Química

Vigila el espectro de exposiciones en el ambiente laboral. Identificar sustancias potencialmente dañinas. Se

pueden presentar dificultades en el ambiente laboral ( mezclas complejas).

Exposición no ocupacional  por ejemplo factor de confusión

EXPOSICION: la cantidad de toxico que alcanza el sitio blanco en un tiempo determinado

LIMITES DE EXPOSICION OCUPACIONAL: grados a los cuales puede llegar un trabajador a una exposición
química, biológica o física.

Dichos limites están establecidos por:

- OSHA: admin de gestión de salud y seguridad ocupacional

- NIOSH: instituto nacional para la seguridad y salud ocupacional
- ACGIH: conferencia americana de higienistas industriales del gobierno de EEUU

Produce cada año una lista de valores limites de umbral TLV´S e índice de exposición biológica BEI para
ciertas sustancias

TLV  ambiental: exposición sin efectos adversos tras la jornada

 BEI  valores en fluidos biológicos tras la exposición. Sangre u orina

Monitoreo de la exposición

Primero se hace evaluación de exposición, luego se hace monitoreo ambiental (inhalatorio y dérmico) y
tercero se compara con los TLV.

Monitoreo biológico: tomar las muestras de sangre, orina y comparar contra los BEI

El reconocimiento temprano de un asunto puede prevenir de problemas irreversibles a nivel toxicológico.

TOXICOLOGIA ALIMENTARIA: estudia naturaleza, fuentes, efectos de sustancias toxicas en los alimentos, sus
efectos nocivos se hace establecimiento de límites.

Ante todo, ningún alimento es seguro

La diferencia con otras ramas es la existencia multicomponente.

El que los alimentos sean esenciales a lo largo de la vida impide una selectividad o criterios de exclusión
dada su composición variable. Clasificación de acuerdo a la fuente: tóxicos naturales (metabolitos animales,
plantas) ej:felrodotoxina pez globo.

Contaminantes biológicos (bacterias, hongos)

Contaminantes químicos (metales, plaguicidas) inorgánicos metales (Hg, As) orgánicos (antibióticos,
inyectados en centros de producción.

Aditivos alimentarios usados internacionalmente, estos si son manejados por FDA. Limites permisibles.

Tóxicos derivados durante el procesamiento y almacenamiento de los alimentos resultados de oxidación.

Cancerígenos de origen alimentario (aflatoxina, As)

Alimentos transgénicos: resistentes a plagas estos deben conservar las mismas características que el
alimento natural nutricionalmente y ser seguro.

Disruptores hormonales: son sustancias que generan alteraciones hormonales a nivel sexual generalmente.

Alimentos alergénicos: existen alimentos que generan respuestas inflamatorias (mariscos, huevo, etc) propio
de cada individuo.

SEGURIDAD ALIMENTARIA

Busca que se tenga un alimento seguro para todos los individuos:

- FAO
- OMS
- Codex alimentarios

Promoviendo el consumo de alimentos sanos, deben cumplir con estándares de calidad para
importaciones y cumplirlos para poder exportar.

TOXICOLOGIA FORENSE

Asociación entre propiedades bioquímicas, medicas y las implicaciones legales asociadas con unos
de abuso o administración medica.
TOXICOLOGIA AMBIENTAL

Estudia efectos adversos causadas a los organismos por la exposición a los tóxicos en el entorno.

Aire, tierra, agua, entorno que rodea a cada ser vivo.

Sustancia: medio biotico, biosfera (atmosfera, hidrosfera, liosfera)

La biodisponibilidad en los compartimentos ambientales proyecta la toxicidad.

Valoración del impacto ambiental

Se usan biomarcadores

- De exposición: presencia de un xenobiótico

- De efecto: cuantifica las alteraciones de la exposicion

CONTAMINACION DEL AIRE

Investigación de efectos en salud por contaminación ambiental

Toxicidad en animales  datos epidemiológicos.

En el 98% es antropogénica, 52% CO, óxidos de azufre 4%, volátiles 14%, particulado 4 %.

CONTAMINADOS EXTERIORES VS CONTAMINADOS INTERIORES

Los interiores están mas contaminados porque no tienen fuentes para menguar o atenuar fuentes
de contaminación

Puede mostrar concentraciones mas altas que el exterior en algunos compuestos

TOXICOLOGIA ACUATICA

La valoración se hace mediante información para la regulación, establecer curva [] vs respuesta

organismos acuáticos autóctonos, valoración de efecto de la sustancia.

Medidas en trabajo de campo verificando: especies en peligro, indicadores de alarma temprana,

indicadores sensibles.

TOXICOLOGIA TERRESTRE

Estudia exposición de compuestos tóxicos y efectos en ecosistemas terrestres. Intenta elucidar

efectos:

 Pruebas de toxicidad aguda y crónica

 Pruebas de campo
 Estudios en recinto
 Biomagnificación

TOXICOLOGIA CLINICAAA

Estudia las patologías causadas por sustancias. Incluye prevención, diagnostico y tratamiento.
Comprende desde las agudas hasta las crónicas. Sobredosis: accidentales. Crónicas ambientales.
Siempre debe contar con: lab de urgencias, estudiando cuadros específicos para cada sustancia y
los tratamientos.

- Determina la presencia de tóxicos en una matriz bien sea de sangre o fluidos

- Pruebas de screening rápido
- Alta sensibilidad
- Entrega de resultados oportunos

ESTUDIOS DE TOXICIDAD

Toda sustancia antes de salir a comercialización debe haber pasado por evaluación toxicológica
(plaguicidas-medicamentos). Los estudios se hacen in vitro e in vivo.

Animales de experimentación: se somete animales de laboratorio a diferentes niveles de

exposición de una sustancia química a evaluar, son experimentos controlados porque en su diseño
hay un grupo control al cual no se le administra la sustancia, pero es un comparador.

Se utilizan metodologías estandarizadas propuestas por comités de expertos internacionales (OMS,

organización para la cooperación económica y desarrollo). La aplicabilidad de estos estudios puede
ser:

- A fármacos
- Aditivos
- Excipientes
- Todos los componentes comercializables
-

INVESTIGACION CLINICA

Desde la toxicología ambiental se habla de bioindicadores-bioacumuladores  evaluar organismos

sensibles de condiciones ambientales  aire tierra agua

El perfil por tipo de toxicidad : esta basado en

Toxicidad: oral, dérmica, inhalatoria, via de exposición.

Toxicidad aguda, subaguda (dosis repetidas), subcronica y crónica (por frecuencia y duración).

Los dos anteriores se combinan entre sí, para cada uno de esos estudios existen unos protocolos.
Estudios de toxicidad aguda estudios en dosis repetidas de los lineamientos mínimos deben
cumplirse o si no el estudio pierde validez.

Dichos estudios permiten estudiar la toxicidad general mirando a nivel sistémico, sin embargo, no
permite evaluarlo todo.

Otros estudios vinculados a reproducción: nuliparas no se haya reproducido

No teratogenia

No estado de gestación

Otros  estudios de carcinoge

Fundamento: someter un ser vivo a una sustancia toxica para obtener información útil sobre dicha
sustancia para lograr construir un perfil de seguridad con el animo de proteger humanos frente a
dicha sustancia.

Existen 2 principios en los estudios de toxicidad:

1. Que los efectos tóxicos se pueden extrapolar a humanos: basado en el peso corporal.
Humanos 10 veces mas sensible que animales en un factor 10.
2. La exposición de animales de experimentación a altas dosis de tóxicos es un método valido
para ver riesgos, desde: curvas de dosis-respuesta, dosis alta para detectar efecto

Aspectos éticos

Los animales son seres sensibles y es imperativo su cuidado evitando o minimizando molestias,
angustia y dolor.

Principios de las R: reducción, reemplazo y refinamiento.

- Reemplazo: si el estudio hecho en una especie tiene que ser reemplazada por especies
mas abajo a la escala filogenética. Ej: ratón por gusano. También se puede sustituir a la
especie por un estudio in vitro, finalmente a nivel computacional predictivo se puede
hacer con estudios IN SILICO. Con solo el estudio in vitro no suple las respuestas del
estudio IN VIVO.
- Reducción: pasar de utilizar grandes cantidades de animales a un numero estadísticamente
validable.
- Refinamiento: todas las técnicas, instrumentos y procedimientos que minimizan el dolor
en el animal, la esencia en el instrumento es la sofisticación y la comodidad.

Otros parámetros a tener en cuenta basados en la peligrosidad

- Índices de toxicidad
- Límites máximos de exposición
- Dosis mínimas

Limites ¿? De exposición: dosis mg/Kg/día que puede ingresar al organismo diariamente por toda
la vida sin ser perjudicial.
Concentraciones máximas permisibles: concentración máxima de un toxico mg/Kg que se permite
en un medio determinado.

Índices de T: se van a obtener cuando se hacen estudios de toxicidad in vivo, es cuantitativo, se

obtiene de la experimentación con animales:

o NOAEL
o LOAEL
o DL50

TOXICIDAD AGUDA

Efectos adversos en un breve lapso, tras la administración de una dosis única (muy elevada de una
sustancia)

Ej. Se administran 200 mg/Kg sin efecto: NOAEL=200 LOAEL=0

OBJETIVOS DE ESTUDIO DE TOXICIDAD AGUDA

Da un indicativo de DL50 poco o nulo de NOAEL y LOAEL

DL50: cantidad estimada calculada para matar al 50% de la población en estudio se debe reportar
el numero de la especie y la vía de administración ya que la DL50 varia.

GHS  clasifica las sustancias en toxicológicamente teoría (1, 2, 3, 4, 5)

Categoría I 1: 0-5 I 2: 5-50 I 3:50-300 I 4:300-2000 I 5: 2000-5000

Tiene que ser demasiado toxica para poder identificar el órgano blanco afectado. Manifestaciones.

Establecer reversibilidad del efecto

Proporcionar guía de dosificación para otros estudios

PROTOCOLOS DE TOXICIDAD AGUDA

Protocolo de toxicidad oral- protocolo de toxicidad aguda dérmica- protocolo de toxicidad aguda
por inhalación- prueba de irritación

Pruebas de sensibilización en piel.

1. Protocolo de toxicidad aguda VIA ORAL (paso inicial)

*Sustancia para evaluar: propiedades fisicoquímicas, incorporadas en vehiculó adecuado.
*Selección de especies: especie roedora y no roedora.
*Animales sanos

Variación del peso aproximado +-20%

PARA EL PROTOCOLO CONVENCIONAL:

- Numero de animales mínimo: animales por nivel de tonificación, mismo sexo

- Habitat y alimentación: TC, humedad relativa, luz, agua
- Niveles de dosificación: mínimo 3 especies apropiadas, curva dosis-respuesta, Permita
determinar DL50
- DL50
- Dosis límite: es un ensayo que cuando una sustancia ancestral no hay evidencia de DL letal
se hace grupo control y grupo de dosis alta

GRUPO CONTROL GRUPO 1 GRUPO 2 GRUPO 3

5 machos + 5 machos

5 hembras + 5 machos

Procedimiento:

Ayuno (no debe ser prolongado

TOXICIDAD POR VIA INHALATORIA

Evalua el material inhalable (gases, aerosoles, sustancias polares)

- Protocolos: sistemas de exposición nasal y cámara en un recinto.

Las ventajas de la exposición nasal: la única vía de ingreso es nasal. La desventaja es la

incomodidad para el animal.

La desventaja por cámara es que no se asegura totalmente la vía inhalatoria como ingreso de la
sustancia. La desventaja por cámara grupal es que no da certeza de buena exposición. Deben
hacerse 12 renovaciones de aire por hora.

Se puede controlar humedad relativa, temperatura, concentración. LA CAMARA SE DEBE

ESTANDARIZAR.

Procedimiento:

Pesar animales: estabilizar la cámara, mantener condiciones de t, h- en exposición aguda 4 horas

Análisis por examen físico – patología – tratamiento y reporte de resultados

CL50: concentración letal media

Clin 5 mg/L aerosoles, 20 mg/l vapores, 20000 ppm gases

 Guia 436 metodo de clases similar a la via oral, se evalúan los dos
sexos.
 433 concentracion fija similar a la p via oral machos.

Pruebas de irritación y corrosión

Este tipo de pruebas son muy controvertidas ya que han generado polémica por parte de
sociedades protectoras de animales. Se busca identificar la corrosión o irritación.

Estrategia de evaluación:

Existen datos concluyentes en humanos o animales??  si si no se evalua mas

 Si no, se evalúa la relación SAR  si predice irritación no evaluar

mas
 Si no predice irritación  Si no se evalúa pH  pH <2 pH>
11,5

Relacion SAR estructura y actividad biológica.

Si una sistancia tiene un pH entre 2,1-11,4 se evalúan datos de toxicidad sistémica, si es toxica es
irritante y corrosiva, si no no se ensaya mas. Si no hay info se hacen ensayos in vitro si es irritante
no se ensaya mas. Si no hay resultados no es irritante se hacen ensayos in vivo.

PRUEBA DE IRRITACION CORROSION DERMICA

3 PARCHES CONSECUTIVOS 3 MIN, 1 H, 4 H.  CONTROL AREAS ADYACENTES 

MANIFESTACIONES ERITOMATOSAS Y EDETOMATOSAS 1,24,48, 72 H  NO CORROSIVO, NO
IRRITANTE, IRRITANTE, CONFIRMATORIO.

PRUEBA DE IRRITACION/C OCULAR

In vivo

Analgésico y anestesico sustancias a evaluar  control ojo  lesión en conjuntiva , cornea e iris
 no corrosivo, no irritante, irritante confirmatorio

PRUEBA DE SENSIBILIZACION EN LA PIEL

Se da por una reacción inmune. Ensayos hechos en cuys. Basados en 429 OCDE ensayo de nódulo
linfático  ratones  4 animales por grupo control negativo (-) sensibilidad.

Se mide la proliferación de linfocitos si hay sensibilización. Se usa timidina marcada

radioactivamente.

 442 A  usa ATP bioluminiscente

 442 B  usa análogo de timidina determinado por ELISA

ELISA  análisis de anticuerpos radiomarcados.

Toxicidad a largo plazo (subcronica y crónica)

A largo plazo evalua tras repetidas dosis los tiempos son 28 dias.

Subcronica  90 dias de exposición (3 semanas)

Crónica  mínimo 6 meses de exposición ( reportes de 1, 2 años inclusive)

Caracterizada por toxicidad acumulativa de efectos adversos tras acción prolongada acumulando
concentración de sustancia evaluada. Sus metabolitos en tejidos susceptibles.

Principio de la prueba:

Administración diaria  observación mortalidad/ efectos tóxicos

 Pruebas de mortalidad en lab pruebas de

 Pruebas de sacrificio en lab laboratorio

Necropsia

OBJETIVOS:
  Obtener NOAEL nivel de efecto adverso no observable. Para el calculo del margen de
seguridad
 Identificar y caracterizar órganos blanco afectados
 Loael

PROTOCOLOS DE TOXICIDAD A LARGO PLAZO

Conocer sustancia  seleccione especie ( roedor – no roedor)

Niveles de dosis 3: (alto, medio, bajo)  satélite

Para evaluar reversibilidad se incluye grupo satélite al que se le administra la máxima dosis al final
del estudio los animales pertenecientes al alto, medio, bajo son sacrificados y los satélite se dejan
reposar un tiempo mas, se envían a patología, luego se sacrifica 1000 mg/Kg

Sub aguda subcronica crónica

Días 14 d 90 dias 12 meses

21 d

28 d

# de animales 5 10 20

Pruebas de al final al final intermedio y final

Lab

 Vías de administración:
 Oral: canulación, agua, comida  roedores y no roedores
 Dérmica: tiempo de exposición 6 h diarias. Cuys y conejos
 Inhalación: 7 días a la semana por 22 horas diarias

OTROS ESTUDIOS DE TOXICIDAD

 Protocolos de reproducción en 2 generaciones

 Se administra a machos y hembras en crecimiento y 2 ciclos de formación de gametos
 En periodo de apareamiento
 Hembras en periodo de lactancia

PROTOCOLO DE TOXICIDAD DE DE…. PRENATAL

- Implantación
- Evaluación de organogénesis y exposición

Machos
 Preapareamiento apareamiento gestación lactancia

Hembras

Evidencia insuficiente para mostrar que no hay efectos

Carcinogénesis

- A corto plazo mutagénesis

- A largo plazo carcinogénesis

A corto plazo: en bacterias, en hongos, en plantas.

Test de mutagenecidad:

Ensayo de translocación hereditaria del ratón perdida del cromosoma x

Test de carcinogénesis:

Estudios similares a los de toxicidad crónica para detección de neoplasias.

MUESTRA: 100 roedores (50/50) 18/24 ratones 24/30 ratas

TOXICOLOGIA PREDICTIVA:

Ciencia vs regulación. Recuento técnicas

EVALUACION DEL RIESGO TOXICOLOGICO

Las sustancias químicas están en capacidad de causar un efecto adverso o peligro, la evaluación del
riesgo da la posibilidad de conocer el riesgo.

Uso de formol, borax (poison squad)

FDA 1928
Riego = peligro intrinseco a la sustancia x exposición

Pasos de la evaluación de riesgo toxicológico

1) Identificar el peligro
2) Valorar dosis respuesta
3) Evaluar la exposición
4) Caracterizar el riesgo  Tomado del libro rojo
 PROTOCOLO DE TOXICIDAD

Toxicidad en el desarrollo prenatal

Toxicidad reproductiva en una generación
Toxicidad reproductiva en dos generaciones  hasta en 4 generación
Carcinogénesis

Otros:

 Neurotoxicidad
 Disrupción endocrina
 Ecotoxicología:
- Aves
- Peces
- Invertebrados

Exposición inicial  antígenos de bajo peso molecular  linfocitos t

Exposición posterior  manifestación clínica

Hipersensibilidad tipo IV (alergia)

Exposición inicial  químico + proteína

Célula presentadora

Linfocito T

Exposición posterior  linf T – memoria  linfoquinas  hipersensibilidad

Adverse outcome phatway

Haptenizacion evento 1  produccion de queratinocitos  activación de células dendríticas 

producción de linfocitos  sensibilización

Prueba buehler 30 cuys

Prueba LLNA  usado en ratones es propiamente en ganglios basales, mide respuesta a alergias
por parte de linfocitos t

Construcción de péptidos ricos en lys y cys

Se incuban y si hay heptanizacion

 En cromatógrafo de alta eficiencia el pico cromatográfico del

incubado será bajo

Keratino-sens

H-clat

Razonamientos de estudios:

1- La mayoría de procesos tóxicos pueden ser reproducidos en animales

2- Emplear dosis altas en animales ayuda a descubrir posibles peligro para el hombre
3- Pueden ser extrapolados los efectos a humanos

Cuestionamientos éticos  estudios in vitro  posibilidades de reproducir in vitro efectos

manifestados in vivo

Indicadores de incertidumbre

Factores de incertidumbre

NOAEL/UF1*UF2= ADI INGESTA DIARIA ADMINISTRADA

UF1  VARIACION INTERESPECIE

UF2  VARIACION INTRA ESPECIE

ADI= NOAEL/ 100

TEST DRAIZE COSMETICOS ESTUDIOS AGUDOS DL50

EVALUACION DE RIESGO TOXICOLOGICO

Se hace para mirar que tan riesgosa es una sustancia para los seres humanos.

GENERALIDADES:

Probabilidad de ocurrencia de daño / exposición a un peligro = riesgo

Peligro es la capacidad de agentes para causar ese daño.

Riesgo: toxicidad de una sustancia * exposición a esa sustancia