Fisiología

Práctica
Semana 3: TRANSPORTE A TRAVÉS DE LA MEMBRANA PARTE 2
Resultado de aprendizaje de la sesión
• El estudiante comprenderá la importancia del
movimiento del agua de acuerdo a la concentración de
solutos. Además, se entenderá el concepto e
importancia de fragilidad eritrocitaria, resistencia
mínima y máxima, , lo cual se podrá extrapolar a lo que
ocurre fisiológicamente en nuestras células y en
distintas patologías.
 REFLEXIÓN DESDE LA EXPERIENCIA

•Comprende el significado y el valor de la fragilidad osmótica

eritrocitaria, el cual tiene importancia clínica especialmente en
anemias hemóliticas.
Ficha de actividad:
cuarta semana
Explicación teórica de la metodología y posibles
resultados de una práctica experimental: 2 ½ hora.
Desarrollo de informe: 1 ½ hora
Valores normales de la fragilidad
osmótica:
Hemólisis inicial: 0.45%
Hemólisis total: 0.3%
 ¿EN DÓNDE SE OBSERVA MAYOR FRAGILIDAD ÓSMÓTICA?

B
Osmotic fragility test results from an affected and control cat. An Osmotic fragility tube test result with the MOF
(the mean osmotic fragility; NaCl concentration at which 50% of RBC lyzed) is depicted with an arrow (a).
Right shifted curve of an affected cat with increased OF (osmotic fragility) and a normal curve from the
corresponding control cat (b). The curve of the control cat has a sigmoid shape, while the affected cat’s curve
is flattened and hemolysis is occurring in higher NaCl concentrations. Dashed lines indicate in both curves the
MOFs at 50% hemolysis.
Increased erythrocytic osmotic fragility in anemic domestic shorthair and purebred cats C. Tritschler, K. Mizukami, K. Raj, and U. Giger. J Feline Med Surg.
2016 June ; 18(6): 462–470.
Erythrocytic osmotic fragility curve: domestic shorthair cat with chronic regenerative anemia ( square ;
50% hemolysis at 0.70%) and a simultaneously tested healthy control cat ( triangle; 50% hemolysis at
0.55%).

Bilirubin Encephalopathy in a Domestic Shorthair Cat With Increased Osmotic Fragility and Cholangiohepatitis E. T. Contreras , U. Giger , J. L.
Malmberg , J. M. Quimby , and P. A. Schaffer. Veterinary Pathology, published on September 9, 2015
 Materiales

Materiales de laboratorio Materiales por

alumno
30ml Sangre canino con Mandil
anticoagulante
24 Tubos de ensayo Guantes
14 Pipetas descartables
2 Envases de capilares para
hematocrito
2 Mecheros de alcohol
1 caja de fósforos
5ml Solución NaCl 0.0 Osm
5ml Solución NaCl 0.04 Osm
5ml Solución NaCl 0.09 Osm
5ml Solución NaCl 0.12 Osm
5ml Solución NaCl 0.15Osm
5ml Solución NaCl 0.20 Osm
5ml Solución NaCl 0.29 Osm
5ml Solución NaCl 0.37 Osm
5ml Solución NaCl 0.42 Osm
5ml Solución NaCl 0.50 Osm
5ml Solución NaCl 0.58 Osm
2 Gradillas
4 pares de guantes
2 Reglas para hematocrito
1 Centrifuga capilares
PRÁCTICA
METODOLOGÍA:

1. MEZCLAR 1ML DE SANGRE DE PERRO CON 1ML DE DISTINTAS SOLUCIONES

2. HOMOGENIZAR EN UN TUBO DE ENSAYO
3. COLOCAR EN UN CAPILAR PARA EL HEMATOCRITO
4. SELLARLO CON EL MECHERO
5. CENTRIFUGAR POR 10 MIN A 12000 RPM.
6. MEDIR HEMATOCRITO
7. DISCUTIR RESULTADOS
 Resultados

Hematocrito(%) Osmolaridad (Osm/L) Coloración del plasma Hematocrito(%) Osmolaridad (Osm/L) Coloración del plasma
0 0 Rojo intenso 0 0 Rojo intenso

1 0.04 Rojo intenso 0 0.04 Rojo intenso

3 0.09 Rojo intenso 0 0.09 Rojo intenso

1 0.12 Rojizo leve
30 0.12 Rojizo leve
4 0.15 Rojizo leve
38 0.15 Rojizo leve
33 0.2 Rosado tenue
46 0.2 Rosado tenue
41 0.29 Rosado muy tenue
43 0.29 Rosado muy tenue
41 0.37 Rosado muy tenue
41 0.37 Rosado muy tenue
40 0.42 Rosado muy tenue
40 0.42 Rosado muy tenue 38 0.5 Rosado muy tenue
39 0.5 Rosado muy tenue 37 0.58 Rosado muy tenue
37 0.58 Rosado muy tenue
Especie Canino Especie Canino
Hematocrito 43% Hematocrito 41%

• EL ESTUDIANTE DEBERÁ DE PRESENTAR UN INFORME DONDE HAYAN DESARROLLADO LAS

DISCUSIONES, CONCLUSIONES, RECOMENDACIONES Y REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA.
• TENDRÁN UN TIEMPO DETERMINADO PARA LA ENTREGA DEL INFORME.
• DEBERÁN ENVIARLO AL CORREO ELECTRÓNICO DE LOS DOCENTES.
 Actividades

1. Concentración de las soluciones de NaCl

2. Porcentaje de hemólisis

3. Fragilidad osmótica promedio

4. Indicar hemólisis parcial y total

4. Resistencia globular mínima

5. Resistencia globular máxima

6. Gráfica de la curva de fragilidad osmótica

7. Discusión de los resultados

8. Conclusiones

Actividad global
1. Gráfica de la curva de fragilidad osmótica
2. Comparación y discusión de los resultados
3. Conclusiones
 APLIQUEMOS LO APRENDIDO

•¿Qué es la fragilidad eritrocitaria y cómo se relaciona a la resistencia

mínima y máxima?
• En un paciente con anemia hemolítica, ¿Cómo se encontrará la
fragilidad osmótica? ¿Por qué?
 INTEGREMOS LO APRENDIDO
La resistencia eritrocitaria es la capacidad que tiene el glóbulo rojo a
soportar una cierta cantidad de volumen de agua, al ser mas frágil su
membrana este no podrá resistir y ocasionará la hemólisis.
La resistencia globular mínima es cuando se llega se produce un
mínimo del 10% de hemólisis mientras que la resistencia globular
máxima es cuando alcanza un 90% a más.
 Referencias

- Huisjes, R., Bogdanova, A., van Solinge, W. W., Schiffelers, R. M., Kaestner, L., & van Wijk, R . Squeezing for Life – Properties
of Red Blood Cell Deformability (2018). Frontiers in Physiology, 9 Disponible en:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5992676/
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MUCHAS GRACIAS