Noviembre 19 de 2009

SOLUCIONES REGULADORAS (AMORTIGUADORAS O BUFFERS)

Marisol Fernández cód.2062326 Lina Rocío Morantes cód.2062310
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
Experiencia No.1
UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER
Escuela de Ciencias Básicas

RESUMEN
En esta experiencia se llevó a cabo la determinación del pH de varias soluciones de
diferente composición por la adición de ácidos y bases, con el fin de analizar el poder
regulador y el efecto de la concentración, para lo cual se empleó un pHmetro.

INTRODUCCIÓN Cuanto menor sea el pH por debajo de

Son muchos procesos bioquímicos los
que dependen de la concentración de
H+, aún cuando en la descripción de la
reacción no aparezca en forma explícita
[H+]. El transporte del oxígeno en la
sangre, la catálisis de reacciones por
enzimas, y la generación de energía
metabólica durante la respiración o la
fotosíntesis son algunos de los muchos
fenómenos biológicos que dependen
de la concentración de H+. Debido a
que el nivel de H+ es enorme en las
soluciones acuosas, es conveniente
utilizar una escala logarítmica, llamada
pH para medir la concentración de H+.
El pH se define como el logaritmo
negativo de la concentración de H+.
pH = -log [H+]
Así, una solución neutra tiene un valor
de pH de 7.0, dado que –log (10-7) =
7.0. Como pH es el logaritmo negativo
de [H+], las soluciones ácidas tienen
valores menores de 7.0, y las soluciones
básicas tienen valores mayores que 7.0.
7.0, tanto mas ácida será la solución;
cuanto mayor sea el pH por arriba de
7.0, más básica será la solución. Como
la escala de pH es logarítmica, un
cambio de pH de una unidad
corresponde a un cambio diez veces
mayor o menor en la concentración de
H+.
MARCO TEORICO
Las constantes de disociación de
los ácidos se determinan por
titulación
Los ácidos y las bases que se disocian
por completo en agua, por ejemplo, el
ácido clorhídrico o el hidróxido de
sodio, se llaman ácidos fuertes y bases
fuertes. Muchos ácidos y bases, como
los aminoácidos (de los que están
formados las proteínas), y las purinas y
pirimidas (de las que están hechos los
DNA Y RNA), no se disocian por
completo en agua. Estas sustancias se
conocen como ácidos débiles y bases
débiles. Graficando una curva de la
variación del pH frente al volumen de
valorante añadido, el punto de inflexión
indica el pka ya que en ese punto el pH
es igual al pka.
Las soluciones amortiguadoras
resisten los cambios de pH
Si el pH de una solución permanece
constante cuando se añaden
cantidades pequeñas de ácido fuerte o
de base fuerte, se dice que la solución
esta amortiguada. La capacidad de una
solución para resistir los cambios de pH
se conoce como capacidad
amortiguadora. El amortiguamiento
más efectivo ocurre cuando la
concentración de un ácido débil y de
su base conjugada son iguales, en otras
palabras, cuando el pH iguala al pka. Por
lo común, se considera que los límites
de amortiguamiento efectivo en una
mezcla de ácido débil y su base
conjugada con un pH es una unidad
menor o mayor que el pka. 1
Las mezclas reguladoras corrientes
contienen dos sustancias, un ácido y
una base conjugados. Un tampón
<ácido> contiene un ácido débil y una
sal de este (base conjugada). Un
tampón básico contiene una base débil
y una sal de la base débil (ácido
conjugado). Las dos especies juntas
(ácido y base conjugados) evitan
grandes cambios de pH absorbiendo
parcialmente las adiciones de iones H+
u OH- al sistema. Si se añaden iones H+
a la disolución tamponada, reaccionan
parcialmente con la base conjugada
para dar el ácido conjugado. Así se
eliminan iones H+ del medio. Si se
añaden iones OH- a la disolución
tamponada, reaccionan parcialmente
con el ácido conjugado para dar H2O y
la base conjugada. Así se eliminan iones
OH- del medio. Las disoluciones
tamponadas sí cambian su pH por
adición de iones OH- o H+. Sin embargo,
el cambio es mucho menor que en
ausencia del tampón. La magnitud del
cambio, depende de la fuerza del
tampón y de la proporción [A-]/[HA]. La
disolución obtenida por valoración de
HA con una base es un tampón. Si se
examinara una curva de valoración, se
vería que en la región del pka, los
cambios de pH son muy pequeños a
medida que se añaden iones OH-. Así
HA + A- es un buen tampón en la región
próxima al pH 5. Sin embargo, este
ácido débil en particular y su sal es un
tampón débil a pH 7. Si quisiéramos
preparar una disolución que tamponara
a pH 7, deberíamos utilizar un ácido
débil cuyo pka fuera alrededor de 7. 2
Ecuaciones:
Para la determinación del pH de los
resultados obtenidos en la práctica se
emplearon las ecuaciones 1 y 2, y con
base a los resultados se calcularon las
diferencias porcentuales respecto a los
valores reportados en la literatura.
Ecuación 1. Determinación del pH de una
buffer.
Ecuación 2. Determinación del pH de una base
débil.
Ecuación 3. Diferencia porcentual.
DATOS

pH + 10 pH + 10
Tubo No. Soluciones pH pH + 10 gotas pH+ 10 gotas
gotas HCl NaOH gotas HCl NaOH
0.01 N 0.01 N 0.1 N 0.1 N

1
(4tubos) 5 ml de agua 7,27 5,94 9,35 2,32 11,06

2
(4 tubos) 5 ml KCl 0.5 M 5,99 3,06 8,71 2,14 11,30

2 mL KH2PO4
3 0.01M +
(4 tubos) 3 mL Na2HPO4 7,07 6,83 7,10 2,97 9,28
0.01M

2 mL KH2PO4
4 0.1M +
(4 tubos) 3 mL Na2HPO4 7,36 7,33 7,34 7,26 7,39
0.1M

Tabla 1. Datos obtenidos experimentalmente.

CÁLCULOS

Para determinar el pH teórico de las

soluciones iniciales se procedió de la
siguiente manera:

Solución 1: Ya que el único componente

de la soluciones es agua, se tomo su
pH, es decir, pH=7.

Solución 2: El KCl es una sal

proveniente de un ácido fuerte y una
base fuerte, luego es una solución que
se encuentra neutralizada y no hay
efectos sobre el pH, es decir, pH=7.
Solución 3: Esta solución es un sistema
amortiguado, ya que se encuentra el
ácido con su correspondiente sal:
Solución 4: Esta solución también es un
sistema amortiguado, pero más
concentrado que la solución 3, luego el
pH se calcula de igual manera al caso
anterior. El pH da igual al anterior ya
que se varían en la misma proporción Se realizó el mismo procedimiento para
las concentraciones y los volúmenes determinar el pH de 5 mL de H20 con
son los mismos. HCl 0,1 N y NaOH 0,1 N.

Determinación de pH de las
disoluciones realizadas:  KCL 0,5 M
 H2O
Ya que inicialmente la solución de KCl
pH 5mL de H2O + 200 μL de HCl 0,01 tiene un pH neutro, igual que el agua,
N: su pH se verá afectado de igual manera,
luego para las disoluciones de KCl con
HCl y NaOH, se esperan obtener los
mismos valores de pH registrados para
las disoluciones realizadas con agua.

 KH2PO4 0.01M + Na2HPO4 0.01M

pH 5mL de disolución (KH2PO4

0.01M + Na2HPO4 0.01M) + HCl
0,01.

pH 5mL de H2O + 200 μL de NaOH

0,01 N:
 pH 5mL de disolución (KH2PO4
0.01M + Na2HPO4 0.01M) + NaOH
0,01.

Por tanto, se determinó el pH como el

de una base débil.

 KH2PO4 0.1M + Na2HPO4 0.1M

De igual forma se realizaron los cálculos

para la disolución de KH2PO4 0.1M +
Na2HPO4 0.1M.

Los resultados de pH obtenidos para

todas las disoluciones realizadas se
encuentran en la Tabla 2 (Anexo 1)
valores de pH, teóricos y
experimentales, para diferentes
disoluciones.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Se realizó el mismo procedimiento

El pH de las soluciones de agua y KCl,
para la disolución realizada con HCl
que inicialmente se encontraban
0,1N.
neutras, disminuyó al agregarle ácido.
Esto se debe a que aumentó la
Para la disolución realizada con
concentración de protones, luego la
NaOH 0,1 se siguió el mismo
solución se hizo más ácida. Esta
procedimiento pero ya que el H2PO4
variación depende de la concentración
se consumió completamente al
de las especies que se le estén
reaccionar con el NaOH, se tiene
agregando, entre mayor sea la
que:
concentración del ácido, el pH se
disminuirá en mayor cantidad, puesto
que habrá mayor cantidad de protones.

Al agregarle base el pH aumentó, ya

Por lo tanto solo quedó en solución: que al incrementarse el número de
moles de OH- la solución de hizo más
básica. De igual forma, a mayor
concentración de la base, mayor será el
aumento del pH.
La capacidad de una solución
amortiguadora para mantener el pH
casi constante, aumenta con la
concentración del tampón. Esto se
observó en la práctica ya que la
solución tampón menos concentrada
presentó disminuciones de pH al
agregarle ácido y aumento de pH al
agregarle base menos concentrados.
Estas variaciones se hicieron más
notorias al agregarle el ácido y la base
más concentrados.
Por el contrario, la solución tampón
más concentrada, logró mantener el pH
prácticamente constante cuando se le
agregó el ácido y la base menos
concentrados. Sin embargo, al
agregarle el ácido y la base de mayor
concentración, se observó una
variación más significativa en el pH,
pero no tan grande como la de la
solución tampón diluida, la cual tenía
menor capacidad para amortiguar la
solución.
En una solución amortiguadora la
cantidad de especies HA y A¯ es igual,
en este caso H2PO4- y HPO42-. Cuando el
pH aumenta la cantidad de especie
H2PO4- en solución aumenta y la de
HPO42- disminuye, ya que éste último
reacciona con el H+ para dar H2PO4- .
En el caso inverso, es decir, cuando la
cantidad de especie H2PO4- disminuye y
la de HPO42- aumenta, ocurre al
disminuir el pH.
que ya no hay solución que lo
amortigüe. Esto sucedió cuando se le
agregó NaOH 0,1 N a las solución
tampón menos concentrada, puesto
que el H2PO4- reaccionó
completamente quedando solo HPO42-
y se observó un aumentó brusco de pH.
CONCLUSIONES
Las soluciones tampón mantienen
constante el pH de una solución; su
capacidad de amortiguamiento
aumenta con su concentración.
Entre mayor sea la concentración de la
solución amortiguadora, y entre más
diluidas estén las especies a agregar
(ácido-base), la capacidad del tampón
se verá favorecida, y el pH
permanecerá prácticamente constante.
BIBLIOGRAFÍA
[1] HORTON, Robert. Bioquímica. Sexta
edición. México: Editorial Prentice-Hall
Hispanoamericana S.A., 1993.
Soluciones Amortiguadoras. Pág. 2-12 a
2-17.
[2] SEGEL, Irwin H. Cálculos de
Bioquímica. Segunda edición. España:
Editorial Arcribia, 1982. Cambios de pH
en tampones. Págs. 67-71.

La amortiguación es realizada hasta el

momento en que una de las dos
especies desaparezca al haber
reaccionado, por lo que después de ese
punto el pH vira drásticamente puesto