UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
CURSO : BIOQUÍMICA
PROFESORA : SALAZAR GARCIA YOJANI BERENIZ
INFORME DE PRÁCTICAS
PRÁCTICA N°: 01
TÍTULO : ESPECTROFOTOMETRÍA
INTEGRANTES:
● Apfata Vera, Luz Amelia·
● Cotaquispe Campos, Diego Alonso
● Lara Reyes, Romina
● Soto Vilca Shayuri
● Valle López, María Alexandra
● Quispitongo Valdivia, José Anthony
HORARIO DE PRÁCTICA
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA : 23/08/2021
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME : 10/09/2021
LIMA – PERÚ
2021
I. INTRODUCCIÓN
Comenzamos un nuevo inicio de ciclo, nuevos compañeros, nuevos profesores, nuevos
cursos, y por supuesto nuevos temas, los cuales van a cumplir una función muy importante en
nuestro desarrollo como profesionales y sobre todo como personas.
Ahora iniciaremos con nuestro primer informe de todo el ciclo, el cual abarcará un
tema muy importante en el ámbito científico, este es “La Espectrofotometría”, podemos decir
[1]
que es una medida cuantitativa cual se basa en la ley de “Lambert – Beer” el cual nos
permite saber la cantidad de luz que absorbe un cuerpo, compuestos absorbentes de radiación
[2]
electromagnética, y para longitudes de onda comprendida entre 200 y 1100 nm. Este
instrumento es mayormente usado para cuantificar los microorganismos y sustancias en los
laboratorios donde se realizan investigaciones químicas. [3]
II. OBJETIVOS
● Conocer el uso y aplicación del espectrofotómetro.
● Aplicar la Ley de Lambert – Beer en el empleo del espectrofotómetro.
● Determinar una curva de calibración, usando la solución de azul de metileno.
III. RESULTADOS
Se tiene una solución X y se desea conocer la longitud de onda óptima para sus futuras
lecturas:
A. Indicar los pasos para las lecturas en el espectrofotómetro
1 PASO :
- Encender el espectrofotómetro
2 PASO:
- Ajustar la longitud de onda
3 PASO:
- Calibrar el espectrofotómetro usando como referencia agua destilada, donde la
absorbancia tiene que salir 0
- Llevar la cubeta del espectrofotómetro sosteniéndolo por la cara rugosa
4. Anotar las Absorbancias
632 A
0.004 A
b. Realizar la curva de calibración, con los siguientes datos:
- Longitud de onda se define como la distancia que hay entre dos puntos en donde las
frecuencias de onda se repiten cada determinado tiempo.
Curva de calibración de la muestra. (véase anexo A).
c. Identifica la longitud de onda óptima.
● Longitud de onda óptima: 610 nm
IV. DISCUSIÓN
De acuerdo a lo estudiado y el trabajo realizado podemos interpretar que la
absorbancia es directamente proporcional con la concentración, es decir que, a mayor
absorbancia, mayor será la concentración. En el trabajo del autor Villegas, observamos que
una vez que ha cumplido con el procedimiento, la lectura de la absorbancia en relación a la
concentración de nitratos (sustancia con la que ha trabajado), dieron como resultado que la
mayor absorbancia fue de 1,37 y la concentración de 10 (4),en nuestro trabajo realizado la
mayor absorbancia que fue 0.589 y su concentración de 4,5; de esta manera se puede
comprobar que es directamente proporcional. Los autores Matheus, Flores, Bello y Belandria,
utilizaron el método por espectrofotometría para la determinación de yoduro en muestras de
orinas, sus longitudes fueron entre 400 y 650 nm, obtuvieron que su máxima absorción fue de
0,040 a 450 nm (5), de acuerdo con el informe la Universidad Surcolombiana, la mayor
absorbancia fue de 2 y su longitud de onda de 500 (6), en nuestro trabajo utilizamos la
máxima absorbancia de 0.199 y la longitud de onda fue de 610, con ello se puede comprobar
que la absorbancia es directamente proporcional con la longitud de onda solo hasta que llegue
al punto máximo, donde luego empezará a descender.
V. CONCLUSIONES
● Se conoció el uso y aplicación del espectrofotómetro, mediante una serie de
recopilaciones de datos; conociendo la acción y reacción de las partes del aparato, de
las que destacamos las más importantes y consiguiente nos ayudarían a cumplir la
meta. De igual forma se logró aplicar la ley de Lamber-Beer, tomando en cuenta la
definición individual de cada uno y sintetizando dichos conceptos para así de esta
forma relacionarla con el espectrofotómetro. En última instancia y siguiendo una serie
de pasos, se logró determinar una curva de calibración usando la solución de azul
metileno, consiguiendo resultados favorables; estos mismos que se mostraron en la
parte experimental.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. [1]-[2]: Figueres C-ÀS-. Espectrofotómetro UV-visible :: Servicios Científico-
técnicos de la UPC [Internet]. Upc.edu. [citado el 8 de septiembre de 2021].
Disponible en: https://www.upc.edu/sct/es/equip/624/espectrofotometro-uv-
visible.html
2. [3] Espectrofotómetro [Internet]. Materialeslaboratorio.com. 2019 [citado el 8 de
septiembre de 2021]. Disponible en:
https://materialeslaboratorio.com/espectrofotometro/
3. Villegas O. DETERMINACIÓN DE NITRATOS POR ESPECTROFOTOMETRÍA
UV VISIBLE EN PRODUCTOS CÁRNICOS. Laboratorio de salud pública.
Laboratorio de bromatología. 2019. [en línea][fecha de acceso 18 de abril del 2021]
disponible en: https://bdigital.uncuyo.edu.ar/objetos_digitales/13774/tesis-brom.-
villegas-gabriel-2019.pdf
4. Matheus P., Flores M., Bello A., Belandria O. Método por Espectrofotometría de
absorción molecular visible para la determinación de yoduro en muestras de orina.
Acta Bioclínica, [S.l.], v. 5, n. 10, p. 85-102, oct. 2015. ISSN 2244-8136. [en línea]
[fecha de acceso 18 de abril del 2021] disponible en:
http://erevistas.saber.ula.ve/index.php/actabioclinica/article/view/6841
5. Informe Espectrofotometria [Internet]. calameo.com. [citado el 9 de septiembre de
2021]. Disponible en: https://es.calameo.com/read/
ANEXOS
(Anexo A).
