CARRERA(S): Medicina veterinaria y zootecnia
PRÁCTICA DE LABORATORIO
CURSO: Bioquímica I
PROFESOR(A): MARÍA LUZ LA TORRE APONTE
INFORME DE PRÁCTICA
PRÁCTICA N°: 2
TÍTULO: Espectrofotometría
INTEGRANTES:
Quezada Quinto, Mishelle Azumi – 100124783@cientifica.edu.pe
HORARIO DE PRÁCTICA 3:10pm – 5:00pm
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 12/01/24
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 16/01/24
LIMA, PERÚ
I. Introducción
Hoy en día, la espectrofotometría es una técnica de análisis óptico
popular para identificar compuestos en función de su espectro de
absorción, lo que nos proporciona detalles sobre los constituyentes de
una muestra de prueba y nos permite saber la concentración de esa
muestra en particular.
El espectrofotómetro es un equipo de laboratorio que funciona dirigiendo
la luz de una lámpara especial a través de un conector que separa y
elige la longitud de onda de la luz, y luego permite que la luz pase a
través de una muestra. La transmitancia, que depende de la
concentración de la sustancia, se puede calcular utilizando la magnitud
de la luz que sale de la muestra y comparándola con la magnitud de la
luz que incide sobre la muestra.
En la actualidad, el espectrofotómetro encuentra aplicación en diversos
campos que involucran investigación cuantitativa, como bioquímica,
física, biología, ingeniería química, clínica y cualquier otro ámbito que
involucre sustancias químicas.
Por último, pero no menos importante, este instrumento mejora el
método de espectrofotometría al calcular la relación entre la energía que
un sistema químico puede aspirar funcionalmente y la longitud de onda
que transmite la radiación. Lo que proporciona es esta teoría de la luz.
La idea de que un haz de luz es un flujo de energía llamado fotones y a
ellos se asocia la luz de una determinada longitud de onda, de los cuales
todos tienen una determinada proporción de energía. También indica la
cantidad de sustancia que hay en la muestra y la cantidad que se
descubrirá.
II. Objetivos
Describir el uso y aplicación del espectrofotómetro
Aplicar la ley de Lambert – Beer en el empleo del
espectrofotómetro
Determinar una curva de calibración, usando la solución de azul
de metileno.
III. Materiales y métodos
Materiales
01 gradilla
06 tubos de ensayo
01 piseta de agua destilada
03 pipetas graduadas 5 mL
porta cubetas
azul de metileno
01 espectrofotómetro
Método
Después de haber mesclado el azul de metileno con el agua destilada,
fue llevado hasta el espectrofotómetro para poder saber la absorbancia
de cada uno de los tubos que contiene diferentes concentraciones.
Al saber la absorbancia de cada tubo, nos falta saber la concentración
y para eso utilizamos la ley de Beer y Lamber y poder hacer la curva
de calibración.
IV. Resultados
Tubo 1: 0,5 mL de azul de metileno 1 mg/dL + 4,5mL de agua
destilada
Tubo 2: 1mL de azul de metileno 1mg/dL + 4mL de agua
destilada
Tubo 3: 2mL de azul de metileno 1mg/dL + 3mL de agua
destilada
Tubo 4: 3mL de azul de metileno 1mg/dL + 2mL de agua
destilada
Tubo 5: 4mL de azul de metileno 1mg/dL + 1mL de agua
destilada
V. Discusión
En el cuadro se puede ver la curva de calibración de azul de metileno,
entre los datos no se colocó el del tubo 5 porque la recta se desviaba.
VI. Conclusión
Al comprender las partes, usos y funciones del espectrofotómetro
será muy beneficioso en el laboratorio, ya que son necesarios
para medir concentraciones de muestras específicas en función
de la absorción para obtener mejores resultados en cada práctica.
Dado que la ley de Lambert- Beer establece que la concentración
de una solución es directamente proporcional a la cantidad de luz
absorbida por un cuerpo, pudimos calcular las concentraciones de
las soluciones usándola para encontrar la absorbancia de
muestras específicas de azul de metileno mezclado con agua
destilada.
VII. Referencias
López Martínez, L., & López de Alba, P. L. (1993). Una Introducción a la
espectrometría de derivadas. Educación Química, 4(3), 160-170.
Martínez Guijarro, M. (2020). Análisis Instrumental. Espectrometría de
Absorción Atómica (EAA).
