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muestras
biológicas
Unidad didáctica 2
Gestión de muestras
biológicas (II)
AUTORES
Director
Julián Sanz Ortega
Profesor Titular de Anatomía Patológica y Facultativo Especialista de
Área del Hospital
Universitario San Carlos y de la Universidad Complutense de Madrid,
desde 1996. Desde el año 2000 es Director Científico del Biobanco
del Hospital Clínico San Carlos y del Biobanco de la RTICC de ISCIII.
Responsable de Patología Molecular y Dianas Terapéuticas. Nom-
brado Presidente Territorial de Madrid de la Sociedad Española de
Anatomía Patológica (SEAP) en el año 2012. Autor de 66 artículos
científicos: publicaciones internacionales en revistas indexadas y na-
cionales.
Premio Extraordinario de la Universidad Complutense de Madrid y
Premio de la Fundación San Nicolás de la Real Academia Nacional de
Medicina en 1994.
Coordinadores
Susana Hernández Prieto
Doctor por la Facultad de Medicina de la Universidad de Alcalá (Ma-
drid). Licenciatura en Biología, especialidad Celular y Molecular por
la Universidad de Alcalá (Madrid). Servicio de Anatomía Patológica y
Laboratorio de Dianas Terapéuticas (LDT), Hospital Universitario HM
Sanchinarro (Madrid). Coordinador y profesor del grado de Técnico
Superior en Anatomía Patológica y Citodiagnóstico, Instituto HM de
Profesiones Biosanitarias (IHMPB), grupo HM Hospitales. Participa-
ción en diversos proyectos de investigación. Autor de varios capítu-
los de libros y artículos científicos en revistas indexadas nacionales
e internacionales.
Autores
Susana Hernández Prieto
Servicio de Anatomía Patológica y Laboratorio de Dianas Terapéuti-
cas (LDT). Hospital Universitario HM Sanchinarro. Madrid
Es muy importante que cada muestra se recoja con el material adecuado y con proce-
dimientos específicos. En este capítulo analizaremos con más detalle cuáles son, en
relación a los distintos tipos de muestras. Completaremos el capítulo con una revisión
de las técnicas de soporte vital básico.
1. MATERIALES UTILIZADOS
PARA LA EXTRACCIÓN DE MUESTRAS
k Guantes desechables/estériles.
k Agujas.
k Trocares.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
NORMAS GENERALES:
Si los datos del paciente se introducen a mano (no hay etiquetas disponibles), es necesario:
Introducir una identificación (número de historia clínica, número de tarjeta sanitaria o número de DNI), para que pueda realizarse la validación
por delta check (corporación con los resultados anteriores) y la impresión de informes acumulativos.
Introducir la edad y el sexo, para que pueda realizarse la validación de las pruebas que precisan esta información. Si falta, no se podrá realizar
y los resultados aparecerán sin intervalo de referencia, en el informe.
Introducir el código del Servicio y del Facultativo, para poder enviar los informes impresos.
INFORMACIÓN DE LOS PERFILES
P. Diabetes Control: GLUCOSA, HGB GLICOSALINA A1c, COLESTEROL / TRIGLICÉRIDOS, IONES (Na, K, CI)
P. Lipídico Completo: APO A1 / B, COLESTEROL FRACCIONES HDL, LDL, TRIGLICERIDOS
P. Osteo Articular: ALI, CALCIO, FÓSFORO, F. ALCALINA, CREATINA, UREA, PROTEINASTOTALES, PROTEINOGRAMA
P. Siderimia: HIERRO, TRANSFERRINA, TIBC, SATURACIÓN TRANSFERRINA
P. Siderimia y Ferritina: HIERRO, FERRITINA
P. Colágeno Artritis: ÁCIDO ÚRICO, FACTOR REUMATOIDE, PCR, VSG
P. Hepático: HEMOGRAMA, ALBÚMINA, PROTEÍNAS, ALT, AST, BILIRRUBINA TOTAL, F. ALCALINA, GGT PROTROMBINA
P. Preoperatorio: HEMOGR, PT, APIT, A. ÚRICO, ALB / PROT, ALI / AST, BILI. T. F. ALCALINA, COLINESTERASA, Ca / P, Cl / Na/ K, CREAT /
UREA, COL / TRIG. LDH, GLUC
P. HTA: ACL CREATINA / UREA, Na / K / CI, EXCR Na / K / CI O24h
P. THA Embarazo: ACL A. ÚRICO O24h, ALBÚMMINA / PROTEÍNAS, ACL CREATINA O24h, Na / K / CI, EXCR Na / K / CI 024h, EXCR PRO-
TEÍNAS O24h
P. Renal Ingresados: ACL CREAT O24h, BICARBONATO / CI / Na / K, EXCR, CI / Na / K O24h, Mg EXCR Mg O24h, PROT, EXCR PROT O24h,
UREA, EXCR UREA O24h
P. Osteoporosis: HEMOG, A, URIC, ALB / PROT PROTEINOGRAMA, ALT / AST, BILIT, FALC / FALC ÓSEA, FACIDA / FACIDA TR, Ca / P CREAT
/ UREA, COL / TRIG / FRACC.COL LDH, GLUC. VSG ( + Orina)
P. Osteoporosis / Orina: EXCR Ca / P O24h, EXCR CREAT O 24h, DPD, URANÁLISIS + SEDIMENTO
P. Hirsutismo: ANDROSTENDIONA, DHEA - S, ESTRADIOL, FSH, LH, PROLACTINA, TESTOTERONA, SHBG, I. TESTOTESRONA LIBRE, T4
LIBRE, TSH
M.T. Colon: CA 19.9 CEA
M.T. Derrame Seroso: CA 125, CEA
M.T. Endometrio: CEA, SCC
M.T. Mama: CA 15.3, CEA
M.T. Origen Desconocido: AFP, CA 125, CA 15.3, CA 19.9, CEA, SCC, BETA - 2 MICROGLOBULINA, NSE, BETA - HCG
M.T. Origen Descon + PSA: AFP, CA 125, CA 15.3, CA 19.9, CEA, SCC, BETA -2 MICROGLOBULINA, NSE, BETA - HCG, PSA
M.T. Ovario: AFP, CA 125, CEA, BETA - HCG
M.T. Pulmón: CA 125, CEA, SCC, NSE, CyFRA 21.1
M.T. Vejiga: CyFRA 21.1
Perfil Básico: A. ÚRICO, ALB / PROT, ALT / AST, BILI, TOTAL. F. ALCALINA, Ca / P, COLESTEROL / TRIGLICÉRIDOS, CREATINA, GLUCOSA, LDH
Perfil Lipídico Básico: COLESTEROL, FRACCIONES HDL, TRIGLICÉRIDOS
CORTISOLRITMO: CORTISOL (8:00 - 9:00 AM), CORTISOL (8:00 - 9:00 PM)
ESTUDIO LCR: ASPECTO MACROSCÓPICO, RECUENTO, (FÓRMULA), GLUCOSA, PROTEÍNAS
ESTUDIO L. Pericardiaco: ASPECTO MACROSCÓPICO, RECUENTO, (FÓRMULA), GLUCOSA, PROTEÍNAS
ESTUDIO L. Pleural: ASPECTO MACROSCÓPICO, RECUENTO, (FÓRMULA), GLUCOSA, PROTEÍNAS
ESTUDIO L. Peritoneal: ASPECTO MACROSCÓPICO, RECUENTO, (FÓRMULA), GLUCOSA, PROTEÍNAS
ESTUDIO L. Articular: ASPECTO MACROSCÓPICO, RECUENTO, (FÓRMULA), GLUCOSA, PROTEÍNAS
INFORMACIÓN SOBRE PRUEBAS QUE PRECISAN EXTRACCIÓN / RECOGIDA O TRANSPORTE ESPECIAL
(*) GASOMETRÍA / LACT / Ca + +: Extraer en jeringa o capilar heparinizando y transportar al laboratorio antes de 30 minutos a partir del
momento de la extraccíon .
Si se prevee un tiempo mayor de transporte, refrigerar con hielo las siguientes pruebas:
CALCIO IÓNICO, GASOMETRÍA arterial, GASOMETRÍA capilar, GASOMETRÍA venosa, LACTATO, CO - OXIMETRÍA arterial. CO - OXI-
METRÍA venosa.
(*) OTRAS PRUEBAS: Extraer en los tubos indicados transportar al laboratorio refrigerado con hielo.
Separar en centrifuga refrigerada.
(*)(*) Extraer las muestras en 8:00 - 9:00 horas. Si se solicita un ritmo de cortisol, la segunda muestra debe extraerse entre las 20:00 - 21:00 horas
y entregar en el laboratorio de Urgencias.
(*3) Recoger la primera orina de la mañana en un frasco que contiene ácido. Solicitar el frasco en el laboratorio (teléfono interior 3030).
(*4) Indicar en el volante la fecha de la última regla (FUR) y la duración del ciclo en días. Si no se incluyen estos datos, no saldrán los valores
de referencia porque no se pueden validar las pruebas.
(*5) T. O´Sullivan: 0 Min. (Etiqueta A), 60 Min (Etiqueta C).
C. Glucosa 75 grs.: 0 Min (Etiqueta A), 120 Min, (Etiqueta C).
C. Gestante: 0 Min. (Etiqueta A), 60 Min. (Etiqueta 4), 120 Min. (Etiqueta 6), 180 Min, (Etiqueta 7).
Las pruebas de INMUNOELE CTROFORESIS en Suero y Orina no figuran en el volante de petición, porque se harán de forma automá-
tica, ante la presencia de cualquier banda monoclonal detectada en la ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS en Suero y Orina. Para otras
situaciones ponerse en contacto con el Laboratorio.
Algunas pruebas solicitadas son ORINA, pueden hacerse en muestras aleatorias o muestras minutadas, lo que hace variar el envase de
recogida, el tubo, la etiqueta y el proceso analítico y de validación posterior. Por esta razón es importante indicar el tiempo de recogida
de la muestra (ALEATORIA 024 horas).
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
k Hisopos.
k Compresor.
k Apósito.
k Etiquetas identificativas.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
2. MUESTRAS SANGUÍNEAS
!"#$"%&' Un análisis de sangre consiste en la extracción de una pequeña cantidad
de sangre del sistema circulatorio del paciente conservada adecuada-
Tanto los tubos como mente y llevada a analizar en un laboratorio especializado. El objetivo
los portaobjetos de una extracción sanguínea es obtener una muestra de sangre
deben identificarse de manera adecuada para realizar su análisis:
inmediatamente,
para evitar errores k Hematológico.
posteriores. Se anotará
de forma clara el k Bioquímico.
nombre del paciente
o el código específico k Microbiológico.
que se emplee para ese
paciente. En muchos k Inmunológico.
hospitales se emplea
un sistema de código de 2.1. Tipos de muestras sanguíneas
barras con el número
de historia clínica del Las muestras de sangre se procesan de distinta manera dependiendo
paciente.
de la prueba que nos pidan realizar. Debemos tener en cuenta qué canti-
dad de muestra será necesaria para realizar el estudio, en qué recipiente
debe depositarse y si la sangre precisa de un anticoagulante o no. Para
la correcta identificación de los tubos y para verificar si posee anticoagu-
lante o no, se utiliza un código de colores en sus tapones, de acuerdo
con la norma ISO 6710. En la Tabla 1 se muestra el código de colores
de los tapones de los tubos de sangre y en la Figura 3 se muestra una
fotografía de unos tubos de vacío para la recolección de muestras.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
k Vena basílica: es más pequeña que las anteriores. Esta vena está
cerca de la arteria braquial, por lo que su punción supone más riesgo Nunca se debe
asumir que una
y su área es más sensible y dolorosa para el paciente.
línea azul es una
vena que dará
La palpación se hace con el dedo índice, con suavidad y firmeza. Las sangre.
venas tienen una consistencia esponjosa y rebotarán bajo la presión
del dedo.
Con el bisel hacia arriba se punciona la piel con un suave y rápido movi-
miento. La pared superior de la vena debe ser puncionada y el bisel
debe quedar en el interior de la vena; cuando la aguja está asegurada,
se conecta el primer tubo o se aspira para que la sangre fluya. Una vez
que la sangre empieza a fluir se suelta el torniquete.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
del receptáculo entre el dedo pulgar e índice para apoyar los dedos
!"#$"%&' libres en el brazo del paciente; de esta forma se evita que se mueva.
Todos los tubos con anticoagulante hay que agitarlos suavemente invir-
tiendo los tubos cuatro veces. Si se hace muy fuerte o muchas veces
se puede producir hemólisis, y si no lo hacemos suficientemente se
producirá coagulación.
Una vez que se han llenado todos los tubos (sistema de vacío) se retira
la aguja, con un movimiento rápido y suave hacia atrás. Tras la punción,
se dejará un apósito estéril sobre la zona de la punción y se pedirá al
paciente que realice una suave presión durante unos minutos hasta que
el punto de punción no presente sangrado, manteniendo el brazo recto.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
2.3. Anticoagulantes
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
El citrato forma complejos con el calcio del plasma se suele usar como
!"#$"%&' citrato trisódico a una concentración de 30 mg/ml de sangre extraída.
Se utiliza para las pruebas de coagulación de la sangre (tiempos de
protrombina y tromboplastina) y estudios de la función plaquetaria.
En la mayoría de los
casos las técnicas de El EDTA se utiliza a una concentración de 1-2 mg/ml de sangre y es el
estudio por imagen
anticoagulante más utilizado para los recuentos celulares y los estudio
(ecografía, TC,
resonancia magnética morfológicos. Sólo forma artefactos tras demoras muy prolongadas,
nuclear) pueden de forma que se pueden hacer extensiones de sangre aceptables des-
describir numerosas pués de 2 o 3 horas y, si está refrigerada, los recuentos celulares son
patologías, pero válidos durante 24 horas. El EDTA evita la agregación plaquetaria y es
para poder realizar el anticoagulante preferido para el recuento de plaquetas.
un diagnóstico
definitivo necesitamos
obtener una muestra La heparina es un polisacárido presente en los tejidos del cuerpo en
histológica o citología bajas concentraciones para evitar la coagulación de la sangre. Inhibe
de la patología descrita la transformación de protrombina a trombina y como consecuencia la
y realizar un estudio formación de fibrina a partir del fibrinógeno. Se emplea como sal sódica,
anatomopatológico. potásica, amónica o de litio a una concentración de 20 U/ml de sangre.
La heparina no afecta al tamaño celular o al hematocrito. Es el mejor
anticoagulante para la prevención de la hemólisis y para las pruebas de
fragilidad osmótica. No es satisfactoria para recuentos leucocitarios o
plaquetarios debido a su capacidad agregante.
3. MUESTRAS NO SANGUÍNEAS
La orina es el
3.1. Muestras de orina
producto final de la
filtración renal de la La orina es el producto final de la filtración renal de la sangre, y su
sangre. análisis es uno de los procedimientos más útiles para determinar la
salud o la enfermedad en cualquier etapa de la vida.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
k Exudados conjuntivales.
k Exudados óticos.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Los exudados óticos pueden ser del oído externo y oído medio. Den-
El exudado vaginal tro de los exudados óticos externos las infecciones más frecuentes
se utiliza para
están causadas por: S. aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas
conocer la etiología
en casos de vaginitis aureginosa.
y vaginosis.
En el tracto genito-urinario femenino, los exudados más comunes son:
el exudado vaginal, el exudado endocervical, el exudado uretral.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
Es necesaria al menos una persona que ponga en marcha una RCP (ya
que el paciente puede estar incapacitado para hacerlo) y, además, debe
notificarlo al sistema integral de emergencias, utilizando para ello los
números establecidos.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Esta persona debe realizar las técnicas de RCP hasta que el paciente
recupere las funciones vitales o hasta la llegada del servicio de emer-
gencias.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
k La vía aérea debe mantenerse abierta en todo momento. Las ven-
tilaciones deben durar 2 segundos cada una, cesando las com-
presiones. Estas deben reiniciarse tras la segunda insuflación, en
cuanto el reanimador separe los labios de la boca de la víctima.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Glosario
Anamnesis: conjunto de los datos clínicos relevantes del historial de
un paciente.
Abreviaturas y siglas
PCR: parada cardiorrespiratoria.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
Resumen
En este capítulo hemos visto cuáles son los materiales más utiliza-
dos para la extracción de muestras biológicas.
Hemos estudiado las diferentes áreas de venopunción, los tipos de
técnicas de extracción sanguínea y la existencia de modelos ana-
tómicos para la extracción venosa.
Igualmente, hemos aprendido la existencia de diferentes técnicas
para la recogida de muestras de orina y sus procedimientos.
A su vez, hemos conocido los tipos de muestras de origen digestivo.
También hemos detallado las características del aparato reproductor
masculino y femenino y el tipo de muestras de uno y de otro.
De la misma manera, hemos profundizado en los conocimientos sobre
las secreciones y punciones de mama.
Hemos descrito la técnica de citología intraoperatoria por impronta.
Hemos detallado las técnicas de soporte vital básico.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Ejercicios de autocomprobación
Rodea con un círculo la letra (a, b, c, d) de la alternativa que consideres correcta.
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida, según protocolo de la unidad, y distribución de muestras biológicas habituales
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
1. OBTENCIÓN DE MUESTRAS
EN ESTRUCTURAS Y VÍSCERAS
ANATÓMICAS
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
2. RECURSOS TECNOLÓGICOS
DE IMAGEN PARA LA OBTENCIÓN
!"#$"%&' DE MUESTRAS
Las radiografías Las técnicas radiológicas actuales son capaces de integrar todos los
requieren fuentes de estudios de imagen con la obtención de las muestras, consiguiendo
rayos X, las cuales así aumentar la rentabilidad de las mismas, evitar complicaciones
pueden causar daños a y reducir costes. Entre las técnicas de imagen podemos destacar:
las células de los tejidos
vivos. Por eso es esencial
k R adiografía (RX): es la prueba más conocida. Está basada en
que el personal esté
protegido y atento a las un aparato emisor de rayos X que atraviesan los órganos que se
normas de seguridad. quieren valorar. La radiografía más frecuentemente utilizada es la
Los medidores de mamografía (de las mamas).
radiaciones, llamados Una variante de la radiografía convencional es la radiografía con
detectores, son contraste, en la que al paciente se le administra una sustancia
instrumentos cruciales de contraste para conseguir imágenes más nítidas y claras.
porque las radiaciones
no pueden detectarse
por la vista, el sonido, el k Ecografía (ECO): permite obtener imágenes procedentes de ecos
tacto, el olor ni el gusto. sonoros. Entre sus principales características cabe destacar que
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
!"#$"%&'
Existe un gran número
de metodologías
para la obtención de
imágenes. Entre ellas
destacan: radiografía,
ecografía, tomografía Endoscopio
computarizada,
gammagrafía,
tomografía SPECT,
tomografía PET y
endoscopia.
Esófago
Estómago
Figura 1. Gastroscopia.
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
3.1. Biopsia
Aguja
de biopsia
Lugar de
incisión Muestra
de tejido
Área de
preocupación
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
Tipo escisional
Incisión
Margen de
seguridad
de tejido sano
Lesión cutánea
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
en un volumen total que oscila entre los 100 y 150 ml. Entre sus prin-
cipales funciones hay que destacar que actúa como un amortiguador,
protegiendo el cerebro y la columna de una lesión. Frecuentemente las
muestras de líquido cefalorraquídeo se obtienen por punción lumbar
realizada por un médico y se hace en el espacio comprendido entre la
tercera y cuarta o entre la cuarta y quinta vértebra lumbar siendo las
indicaciones para su realización:
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
3.5. Exudados
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
k Citologías.
k Improntas.
k Cultivos celulares.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
k Las muestras pueden ser cedidas a terceros para que utilicen dichas
muestras en proyectos de investigación biomédica que sean evalua-
dos positivamente por los comités externos del biobanco (comité
científico y comité ético). La posible cesión de dichas muestras debe
quedar perfectamente reflejada en el documento del consentimiento
informado que firma el donante.
k En caso de cierre del biobanco, el destino de las muestras que forman
parte de él debe quedar reflejado en el documento de consentimiento
informado.
6. PROCESO DE PRESTACIÓN
DEL SERVICIO. PROTOCOLOS
DE ACTUACIÓN DE LA UNIDAD
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Estas muestras se enviarán “en fresco”, sin utilizar ningún tipo de fija-
dor, ya que este impediría la realización del estudio. Se transportarán
de quirófano a Anatomía Patológica en el menor tiempo posible e irán
acompañadas de la hoja de petición de biopsia intraoperatoria, en la que
aparecerán los siguientes datos:
k Sospecha diagnóstica.
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
Resumen
En este capítulo hemos visto cómo toda obtención de muestra es crucial
para su posterior tratamiento. En este aspecto, destacamos los tipos de
procedimientos o pruebas que podemos realizar para su diagnóstico.
Nos hemos adentrado en los recursos tecnológicos de que disponemos
hoy día para la toma de imágenes en una muestra, junto con la enume-
ración de los procesos invasivos para disponer de un determinado tipo
de muestra (biopsias y piezas quirúrgicas).
Para concluir este capítulo, hemos hablado del servicio que prestan los
biobancos, de su importancia, así como los procesos de la prestación
del servicio en el caso de las biopsias.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Glosario
Anatomopatológico: referente a cualquier alteración anatómica de un
órgano, a nivel tanto macroscópico como microscópico.
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
Ejercicios de autocomprobación
Rodea con un círculo la letra (a, b, c, d) de la alternativa que consideres correcta.
3. Los biobancos:
a) Se rigen por la Ley de Investigación Biomédica 14/2007, de 3 de julio y el Real De-
creto 1716/2011, de 18 de noviembre.
b) Son establecimientos sin ánimo de lucro.
c) Almacenan muestras con fines diagnósticos o de investigación.
d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
10. La introducción en el interior del cuerpo de un tubo largo y flexible con luz y una
pequeña cámara en el extremo se llama:
a) Ecografía.
b) Radiografía.
c) Gammagrafía.
d) Endoscopia.
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Realización de la recogida y distribución de muestras obtenidas mediante procedimientos invasivos o quirúrgicos
15. La tomografía computarizada (TC) o escáner utiliza la misma base que la:
a) Gammagrafía.
b) Radiografía.
c) Ecografía.
d) Tomografía SPECT y la tomografía PET.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Los envases y el envío deben realizarse en condiciones óptimas que eviten riesgos,
tanto para las muestras como para el personal que las maneja. Además, para el trans-
porte es necesario el registro, codificación y etiquetado de forma que no pueda
haber posibilidad de error.
1. CRITERIOS Y MÉTODOS DE
CONSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS:
FACTORES QUE AFECTAN A LA
CONSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS
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Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
!"#$"%&'
La ley española
de investigación
biomédica define como
muestra biológica
“cualquier material
biológico de origen
humano susceptible
de conservación y
que pueda albergar
información sobre
la dotación genética
característica de una
persona”.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Si se opta por una fijación por congelación, método físico, según las
recomendaciones del Banco Europeo de Tejido Tumoral Congelado
(TuBaFrost), las biopsias de tejidos sólidos han de recogerse en reci-
piente cerrado y mantenerse en frío sin añadir ningún medio líquido
hasta el momento de su congelación. Ha de registrarse el tiempo que
transcurre entre la obtención de la muestra y la congelación. Un
tiempo de isquemia prolongado puede provocar degradación en algunas
de las submuestras que se pueden obtener (p. ej., ARN).
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Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
Plasma − 80 °C
Suero − 80 °C
Orina − 80 °C
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
2. SISTEMAS DE ENVASADO,
Se define como
sustancia infecciosa
TRANSPORTE Y ENVÍO
aquella que se
sabe o se cree Para el transporte de las muestras de diagnóstico, en función del medio
que contiene que va a ser utilizado, deben aplicarse diferentes reglas que se detallan
agentes patógenos a continuación. Para el transporte por vía terrestre, tienen que aplicar-
(microorganismos se los requisitos exigidos por el acuerdo ADR (2009). Para el transporte
o priones) que
pueden causar en tren debe aplicarse el Reglamento de Transporte Internacional por
enfermedades Ferrocarril de Mercancías Peligrosas (RID). Para el transporte en avión
en humanos o hay que seguir las instrucciones técnicas para la seguridad en el trans-
animales. porte aéreo de mercancías peligrosas de la Organización Internacional
de Aviación Civil (ICAO). Por último, para el transporte por mar se debe
seguir el Código Internacional de Transporte Marítimo de Mercancías
Peligrosas (IMDG).
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Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Tapadera
Tubo primario
Material absorbente
Embalaje Lista detallada
secundario del contenido
Envase exterior
Signo
orientación
paquete
Marca
especificaciones
Naciones Unidas
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Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
Recipiente primario
Tapadera
impermeable
Material
Lista detallada
absorbente
del contenido
y de subjeción
3. REGISTRO, CODIFICACIÓN
E IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA
PARA EL TRANSPORTE
Hay una gran variedad de mercancías peligrosas que se envían por todo
el mundo, por lo que es preciso utilizar un código de reconocimiento
para cada una de las muestras, en función de varios parámetros:
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
UN 3373
72
Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
Resumen
Hemos visto cómo los distintos tipos de muestras se recogen en enva-
ses y con procedimientos diferentes. Las muestras sólidas pueden
recogerse fijadas o congeladas.
El transporte y envío debe hacerse en condiciones adecuadas y es bási-
co que las muestras estén correctamente identificadas y codificadas.
Glosario
Anticoagulante: sustancia endógena o exógena (sustancia producida
por el propio organismo o externa a él, respectivamente) que inhibe
la coagulación de la sangre. De esta manera se evita la formación de
coágulos debido a la reducida actividad de las plaquetas, ya que estas
últimas contribuyen a la propiedad coagulante de la sangre.
Esputo: sustancia secretada por la boca de una sola vez en cada expec-
toración o también en la tos, que proviene de los pulmones, bronquios,
tráquea o laringe, incluyendo además la cámara posterior de la boca.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Abreviaturas y siglas
ADR: Acuerdo Europeo sobre el Transporte Internacional de Cargas
Peligrosas por Vía Terrestre.
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Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
Ejercicios de autocomprobación
Rodea con un círculo la letra (a, b, c, d) de la alternativa que consideres correcta.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Selección de técnicas de conservación, almacenaje, transporte y envío de muestras
13. Una de las muestras más baratas y sencillas es la orina. Con ella obtenemos:
a) Estudios limitados de determinadas moléculas.
b) Estudios amplios en un espectro de moléculas.
c) No permite realizar estudios.
d) Dependiendo del estudio, se acota o amplía la información.
14. Al procesar una muestra debemos tener en cuenta determinados factores. Entre ellos:
a) Temperatura.
b) Humedad.
c) Tiempo.
d) Ninguno de los anteriores.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
En este capítulo veremos cuáles son los reactivos químicos, radiactivos y biológicos
que pueden suponer mayores peligros en un laboratorio; los protocolos de prevención
de riesgos, la gestión de residuos y el plan de emergencia.
78
Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
k Alérgenos.
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Como norma general k Grupo 4: agente patógeno que puede causar enfermedad grave en el
de seguridad en los hombre, con muchas probabilidades de que se propague a la colecti-
centros hospitalarios
vidad. No existe generalmente un tratamiento eficaz o una profilaxis.
no se almacena gran
cantidad de productos
radiactivos, sino que se A continuación trataremos de profundizar nuestros conocimientos acer-
procede a la recogida ca de los reactivos radiactivos.
semanal por parte de
la Empresa Nacional de La radiactividad es un fenómeno físico que presentan algunos cuer-
Residuos Radiactivos, pos o elementos químicos, llamados radiactivos. Estos son capaces
S.A. (ENRESA), aunque de emitir radiaciones que tienen la propiedad de impresionar placas
estos agentes suelen ser
de baja actividad y vida fotográficas, ionizar gases, producir fluorescencia o atravesar cuerpos
media corta. opacos a la luz ordinaria.
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
81
Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
k Aunque parezca obvio, no tocar con las manos ni probar los productos
químicos, ni comer, fumar o masticar chicle durante su manipulación.
Las distintas actuaciones que podemos realizar para prevenir los riesgos
de los trabajos con productos químicos, biológicos y radiactivos son
muy amplias y dependen del tipo de producto que se esté manipulando.
No obstante, intentaremos exponer de una manera clara una serie de
medidas que podemos realizar con este fin.
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
T F Identificación
del producto
ABCDE-33 (nombre químico
de la sustancia o
Identificación Contiene...
nombre comercial
de peligros
del preparado)
Figura 2. Etiqueta de un producto químico, donde se expone: el nombre del producto, pictogramas o símbolos
de identificación de peligros, frases R (descripción del riesgo), frases S (medidas preventivas).
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Todas las
instalaciones
radiactivas
hospitalarias
han de someterse
a controles
periódicos que
aseguren su buen
funcionamiento,
para así evitar
las situaciones
de emergencia.
Figura 5. Cartel de normas básicas de seguridad de un equipo que usa luz ultravioleta.
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Los principales riesgos de las centrífugas son: la rotura del rotor, daño
cuando se contacta con la parte giratoria, explosión por una atmósfera
inflamable, formación de bioaerosoles. Estos riesgos se pueden evitar:
Los equipos que utilizan rayos láser tienen como principal riesgo las
lesiones de los ojos (sobre la córnea, el cristalino o la retina) y las que-
maduras cutáneas. Aunque otros riesgos que hay que tener en cuenta
son la contaminación atmosférica producida por el material vaporizado
por el láser y la utilización de corriente de alta tensión.
Los principales riesgos que presentan los equipos que utilizan radia-
ciones ionizantes son el riesgo de exposición a radiaciones ionizantes
en los laboratorios si se utilizan fuentes radiactivas (RIA) y generadores
de radiaciones ionizantes (espectrometría de difracción y fluorescen-
cia de rayos X), estando perfectamente reglamentada su utilización
y protección frente a las mismas (D 2869/1972 y RD 53/1992). Todo
laboratorio que utiliza o manipula generadores de radiaciones ionizan-
tes o fuentes radiactivas constituye una instalación radiactiva, a no ser
que las fuentes estén encapsuladas y los equipos homologados, como
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
4. GESTIÓN DE RESIDUOS.
NORMATIVA VIGENTE
90
Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
91
Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
92
Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
k No se debe comer, beber ni fumar, así como tampoco aplicarse cos-
méticos en las áreas de trabajo. Asimismo, queda prohibido guardar
alimentos o bebidas en las citadas áreas.
93
Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
k Actuar responsablemente.
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Combustible Comburente
Reacción
en
cadena
Calor
Los principales riesgos para las personas generados por los incen-
dios son:
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
97
Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
ANTE UN ACCIDENTE
Protege
Antes de actuar, hemos de tener la seguridad de que tanto
el accidentado como nosotros mismos estamos fuera de todo peligro.
Avisa
Avisar a los servicios sanitarios (médico, ambulancia, etc.)
de la existencia del accidente, para después empezar a socorrer.
Socorre
Actuar sobre el accidentado, reconociendo primero sus signos vitales
por el siguiente orden: conciencia, respiración y pulso.
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
8. DOCUMENTACIÓN: RECOGIDA,
ELABORACIÓN Y ARCHIVO
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Resumen
En este capítulo hemos revisado los riesgos químicos, radiactivos y
biológicos. Es importante clasificar los productos, conocer los riesgos
para los equipos y las medidas de protección del personal y la gestión
de residuos.
También es necesario conocer los procedimientos de actuación en
caso de accidentes y el plan de emergencias es obligatorio.
102
Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
Glosario
Agente químico: todo elemento o compuesto químico, por sí solo
o mezclado, tal como se presenta en estado natural o es producido,
utilizado o vertido, incluido el vertido como residuo, en una actividad
laboral, se haya elaborado o no de modo intencional y se haya comer-
cializado o no.
103
Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
Ejercicios de autocomprobación
Rodea con un círculo la letra (a, b, c, d) de la alternativa que consideres correcta.
2. Según sus efectos específicos sobre la salud humana, un reactivo puede clasifi-
carse en:
a) Inocuos, explosivos, comburentes, extremadamente inflamables, fácilmente infla-
mables e inflamables.
b) Inocuos, muy tóxicos, tóxicos, nocivos, corrosivos, irritantes y sensibilizantes.
c) Inocuos, carcinogénicos, mutagénicos y tóxicos para la reproducción.
d) Inocuos, peligrosos para el medioambiente.
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Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
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Gestión de muestras biológicas (II) - Unidad 2
10. Los equipos que utilizan rayos láser tienen como principal riesgo:
a) Las lesiones de los ojos, sobre la córnea, el cristalino o la retina.
b) Las quemaduras cutáneas.
c) La contaminación atmosférica producida por el material vaporizado por el láser y la
utilización de corriente de alta tensión.
d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
12. En un laboratorio debe haber un registro actualizado de todos los equipos con
los que cuenta, donde se especifique:
a) Nombre del equipo, localización, fecha de recepción, fecha de puesta en marcha,
fechas de mantenimiento.
b) No hace falta, para eso están los Técnicos de Mantenimiento.
c) Historial donde se reflejen funcionamientos anómalos y reparaciones.
d) Las respuestas a y c son correctas.
13. De manera general, en caso de detectarse una fuga en una botella, se recomienda:
a) Aproximarse a la botella y cerrarla si es posible.
b) Trasladar la botella con fuga a un espacio abierto fuera del alcance de personas e
instalaciones y señalizar la zona con la indicación de peligro correspondiente, impi-
diendo el acceso de personas, vehículos, focos de ignición, etc.
c) Controlar permanentemente la botella hasta su total vaciado, avisar al suministrador
y ventilar el área de trabajo.
d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
106
Aplicación de protocolos de seguridad y prevención de riesgos en la manipulación de productos químicos y biológicos
14. Se necesitan cuatro elementos que coincidan en tiempo y lugar para que se pro-
duzca lo que se conoce como el tetraedro del fuego:
a) Combustible, comburente, calor y reacción en cadena.
b) Calor, electricidad, combustible y humedad.
c) Combustible, agua, calor y reacción en cadena.
d) Ninguna de las respuestas anteriores es correcta.
15. Las tres actuaciones secuenciales para empezar a atender al accidentado, que se
resumen en las siglas PAS, son:
a) P de PROTEGER, A de AVISAR y S de SOCORRER.
b) P de PARADA, A de AUXILIO y S de SERENIDAD.
c) P de PROTEGER, A de AVISAR y S de SERENIDAD.
d) Ninguna de las respuestas anteriores es correcta.
107
Soluciones a los ejercicios de autocomprobación
CAPÍTULO 1.
REALIZACIÓN DE LA RECOGIDA, SEGÚN PROTOCOLO DE LA UNIDAD,
Y DISTRIBUCIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS HABITUALES
1. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
2. d) Mariposa, jeringa y sistema al vacío.
3. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
4. b) Detectar la presencia de grasa en las heces.
5. a) Detectar la presencia de leucocitos polimorfonucleares en las heces
(característicos de los procesos infecciosos bacterianos o de las
enfermedades inflamatorias intestinales).
6. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
7. c) Epidídimo.
8. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
9. a) Labios menores.
10. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
11. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
12. b) De tres maneras distintas: por secreción del pezón, por impresión o impronta
y por punción-aspiración.
13. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
14. a) Activación del sistema de emergencia, RCP básica, desfibrilación eléctrica y
RCP avanzada o apoyo vital cardiovascular avanzado.
15. b) La posición lateral de seguridad.
CAPÍTULO 2.
REALIZACIÓN DE LA RECOGIDA, SEGÚN PROTOCOLO DE LA UNIDAD,
Y DISTRIBUCIÓN DE MUESTRAS OBTENIDAS MEDIANTE
PROCEDIMIENTOS INVASIVOS O QUIRÚRGICOS
1. d) Los tres métodos.
2. a) Biopsias y piezas quirúrgicas.
3. a) Se rigen por la Ley de Investigación Biomédica 14/2007, de 3 de julio y el Real
Decreto 1716/2011, de 18 de noviembre.
4. a) Se basa en rayos X.
5. b) Llegarán de quirófano a Anatomía Patológica lo antes posible “en fresco”
(sin ningún fijador).
108
6. a) No deben ser de vidrio por la posibilidad de rotura y cortes.
7. b) Se toma una muestra parcial del área sospechosa.
8. c) Permite tomar imágenes de ecos sonoros.
9. c) Gammagrafía.
10. d) Endoscopia.
11. a) Un procedimiento sencillo, no invasivo, en el que no se emplea radiación.
12. c) Una porción de tejido obtenida de un individuo vivo para su estudio
anatomopatológico en el microscopio.
13. b) Pública o privada, sin ánimo de lucro.
14. d) Riesgo biológico.
15. b) Radiografía.
CAPÍTULO 3.
SELECCIÓN DE TÉCNICAS DE CONSERVACIÓN,
ALMACENAJE, TRANSPORTE Y ENVÍO DE MUESTRAS
1. b) TuBaFrost recomienda que el tiempo entre la escisión y la congelación no
debe superar los 30 minutos.
2. c) − 80 °C y − 196 °C.
3. d) Dos categorías: A y B.
4. a) El embalaje de una sustancia biológica categoría A es el UN 2814.
5. a) Tipo de peligro, número UN y nombre completo.
6. b) Citrato de dextrosa.
7. c) Organización de Aviación Civil Internacional.
8. d) A la fase líquida que queda sobre los sedimentos.
9. a) Proteínas.
10. a) Ampollas de plástico termoselladas o frascos de vidrio con tapón de caucho
y precinto metálico.
11. a) En un recipiente cerrado y mantenerse en frío sin añadir ningún medio
líquido hasta el momento de su congelación.
12. d) Las respuestas a y b son correctas.
13. b) Estudios amplios en un espectro de moléculas.
14. c) Tiempo.
15. b) Isopentano.
109
CAPÍTULO 4.
APLICACIÓN DE PROTOCOLOS DE SEGURIDAD Y PREVENCIÓN
DE RIESGOS EN LA MANIPULACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS
Y BIOLÓGICOS
1. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
2. c) Inocuos, carcinogénicos, mutagénicos y tóxicos para la reproducción.
3. a) Productos para inmunización activa, productos para inmunización pasiva,
agentes utilizados con fines diagnósticos, sangre humana y derivados
sanguíneos y alérgenos.
4. c) Cuatro grupos.
5. b) No se almacena gran cantidad de productos radiactivos; como norma general
de seguridad en los centros hospitalarios no se almacena gran cantidad de
productos radiactivos, sino que se procede a la recogida semanal por parte
de la empresa Nacional de Residuos Radiactivos, S.A. (ENRESA), aunque
estos agentes suelen ser de baja actividad y vida media corta.
6. d) A la descripción del riesgo.
7. b) A las medidas preventivas que hay que adoptar.
8. b) Han de someterse a controles periódicos que aseguren su buen
funcionamiento para así evitar las situaciones de emergencia.
9. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
10. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
11. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
12. d) Las respuestas a y c son correctas.
13. d) Todas las respuestas anteriores son correctas.
14. d) Ninguna de las respuestas anteriores es correcta.
15. a) P de PROTEGER, A de AVISAR y S de SOCORRER.
110
Índice
REALIZACIÓN DE LA RECOGIDA, SEGÚN PROTOCOLO DE LA UNIDAD,
Y DISTRIBUCIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS HABITUALES
1. MATERIALES UTILIZADOS
PARA LA EXTRACCIÓN DE MUESTRAS................................................................................................. 6
2. MUESTRAS SANGUÍNEAS ...................................................................................................................................... 10
2.1. Tipos de muestras sanguíneas .................................................................................................................. 10
2.2. Técnicas de extracción sanguínea.
Extracción venosa en modelo anatómico..................................................................................12
2.3. Anticoagulantes................................................................................................................................................................ 15
3. MUESTRAS NO SANGUÍNEAS ......................................................................................................................... 16
3.1. Muestras de orina ......................................................................................................................................................... 16
3.2. Muestras de origen digestivo...................................................................................................................... 18
3.3. Muestras del aparato reproductor masculino y femenino.
Citología ginecológica..............................................................................................................................................19
3.3.1. Aparato reproductor masculino ........................................................................................... 19
3.3.2. Aparato reproductor femenino ............................................................................................. 20
3.4. Mama: secreciones y punciones............................................................................................................ 22
3.5. Citología intraoperatoria por impronta ............................................................................................ 22
3.6. Exudados para análisis microbiológico-parasitológico ............................................ 22
3.7. Muestras cutáneas para el estudio de micosis ................................................................ 25
4. TÉCNICAS DE SOPORTE VITAL BÁSICO ........................................................................................... 27
4.1. Activación del sistema de emergencia.......................................................................................... 27
4.2. RCP básica ............................................................................................................................................................................... 28
Glosario.................................................................................................................................................................................................................. 34
Resumen............................................................................................................................................................................................................. 35
Ejercicios de autocomprobación ...................................................................................................................................... 36
111
6. PROCESO DE PRESTACIÓN DEL SERVICIO.
PROTOCOLOS DE ACTUACIÓN DE LA UNIDAD .................................................................. 54
6.1. Recogida y envío de biopsias ...................................................................................................................... 54
6.2. Recipientes para el envío de biopsia ................................................................................................ 55
6.3. Transporte de biopsias fijadas en formol tamponado .............................................. 55
6.4. Transporte de biopsias intraoperatorias........................................................................................ 56
Resumen............................................................................................................................................................................................................. 57
Glosario.................................................................................................................................................................................................................. 58
Ejercicios de autocomprobación ...................................................................................................................................... 59
112
7. ORGANIZACIÓN DEL TRABAJO PREVENTIVO.
RUTINAS BÁSICAS ................................................................................................................................................................ 98
8. DOCUMENTACIÓN: RECOGIDA, ELABORACIÓN Y ARCHIVO.................. 100
Resumen......................................................................................................................................................................................................... 102
Glosario.............................................................................................................................................................................................................. 103
Ejercicios de autocomprobación .................................................................................................................................. 104
Soluciones a los ejercicios de autocomprobación ............................................................................. 108
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