METODOS PARA LA CUENTA DE BACTERIAS AEROBIAS EN

PLACA
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-092-SSA1-1994

Introducción
※ Cuando se requiere investigar el contenido de microorganismos viables en un
alimento, la técnica comúnmente utilizada es la cuenta en placa. comúnmente
utilizada es la cuenta en placa.
※ En realidad, esta técnica no pretende poner en evidencia todos los microorganismos
presentes. La variedad de especies y tipos diferenciables por sus necesidades
nutricionales, temperatura requerida para su crecimiento, oxígeno disponible, etc.,
hacen que el número de colonias contadas constituyan una estimación de la cifra
realmente presente y la misma refleja si el manejo sanitario del producto ha sido el
adecuado.
Objetivo
※ Esta Norma Oficial Mexicana establece el método para estimar la cantidad de
microorganismos viables presentes en un alimento, agua potable y agua purificada,
por la cuenta de colonias en un medio sólido, incubado aeróbicamente.

Fundamento
※ El fundamento de la técnica consiste en contar las colonias, que se desarrollan en el
medio de elección después de un cierto tiempo y temperatura de incubación,
presuponiendo que cada colonia proviene de un microorganismo de la muestra bajo
estudio. El método admite numerosas fuentes de variación, algunas de ellas
controlables, pero sujetas a la influencia de varios factores.
Incubar las cajas en posición invertida (la tapa hacia abajo) por el tiempo y la temperatura
que se requieran, según el tipo de alimento y microorganismo de que se trate.
Grupo Bacteriano Temperatura Tiempo de Incubación
Termofílicos aerobios 55 ± 2ºC 48 ± 2 h
Mesofílicos aerobios 35 ± 2ºC 48 ± 2 h
Psicrotróficos 20 ± 2ºC 3 - 5 días
Psicrofílicos 5 ± 2ºC 7 - 10 días

Recuento
Después de la incubación, contar las placas que se encuentren en el intervalo de 25 a 250
colonias, usando el contador de colonias y el registrador.

I.- a) Seleccionar cada caja Petri que contenga entre 25 – 250 colonias.
Dilución Dilución Colonias
1:10 10-1 350
1:100 10-2 57*
1:1000 10-3 22
1:10,000 10-4 12

Se selecciona la dilución 10-2 y se reporta el resultado final como: Recuento de

microorganismo 5,700 UFC (el número de colonias se multiplica por la dilución).

b) Cuando dos cajas caen dentro del rango de 30 a 300 colonias, se toma para reportar la
menor dilución, ya que presenta menor fuente de error por la poca manipulación humana.
Ejemplo:
Dilución Dilución Colonias
 1:10 10-1 750
1:100 10-2 350
1:1000 10-3 170*
1:10,000 10-4 67*
1:100,000 10-5 15

Se selecciona la dilución menor 10 -3 reportando como resultado final como: recuento de

Microorganismos 170,000 UFC

C).- Si todas las cajas no caen dentro de 30 colonias, se toma como resultado final el
de la menor dilución. Ejemplo:
Dilución Dilución Colonias
1:10 10-1 25
1:100 10-2 17
1:1000 10-3 6
Se reporta como resultado: Recuento de microorganismo 250 UFC.

II.- a) Cuando se tienen de 1 a 10 colonias por cm 2 , se cuentan 13 cuadros en forma de cruz

y el número total de colonias encontrados en los cuadros, se multiplican por 5 y el resultado
que se obtiene es el número de colonias encontradas en los 65 cuadros totales de la
cuadricula. Ejemplo: Si tenemos 65 colonias en los 13 cuadros: 63 X 5= (325) (dilución)

b) Si dos cajas contienen más de 300 colonias, pero se pueden contabilizar, se hace el
recuento en base a la regla anterior, luego se divide el número de colonias mayor entre el
menor y el resultado es:

Mayor de 2: Se reportará la mayor dilución.

Menor de 2: Se reportará la menor dilución.

Por último, una vez decidiendo cual dilución se reporta, se multiplica por el número de
colonias y este será el resultado final. Ejemplo:

Dilución Colonias
Es una masa incontable (más de 6500
10-1
UFC)
Es una masa incontable (más de 6500
10-2
UFC)
10-3 305
-4
10 650
Luego se divide el número de colonias mayor entre el menor 650 / 305 y el resultado es:

Mayor de 2: Se reportará la mayor dilución.

Menor de 2: Se reportará la menor dilución.
Para obtener el resultado final es mayor de 2 por lo tanto se reporta : 650 X 10,000 =
6,500,000 UFC. Ejemplo:
Dilución Colonias
10-1 Es una masa incontable (más de 6500
UFC)
10-2 Es una masa incontable (más de 6500
UFC)
10-3 305
10-4 410

Luego se divide el número de colonias mayor entre el menor 410/305 y el resultado es:

Mayor de 2: Se reportará la mayor dilución.

Menor de 2: Se reportará la menor dilución.

Para obtener el resultado final es menor de 2 por lo tanto se reporta: 305 X 1000 = 305,000
UFC

c) Cuando existen entre 10 - 100 colonias por cm 2 se contabilizan cuatro cuadros al azar y
se calcula el número de colonias promedio por cm2 y se multiplica por 65 para obtener el
número de colonias estimadas en los 65 cuadros de la cuadricula. Ejemplo:

70 +50+30+15 = 165/4 = 41 colonias /cm 2 (promedio) = 41 X 65 = 2665 colonias X la

dilución (10-4) = 26, 650,000 UFC.

Si hay dos cajas en las que puedan contabilizar entre 10 – 100 colonias, se sigue el mismo
procedimiento anterior de dividir el número de colonias mayor entre el menor y si el resultado
es:

Mayor de 2: Se reportará la mayor dilución.

Menor de 2: Se reportará la menor dilución.

d) Cuando existen más de 100 colonias por cm 2 se reporta la mayor dilución, multiplicada
por el número de colonias que presenta y se agrega la palabra de: Valor estimado.

III.- Cuando no hay crecimiento en las cajas, nunca se reporta cero colonias, en este caso el
reporte será de menos de 10 UFC.

Cuando el análisis es cualitativo, se reporta que no se encontró el número buscado.

Nota: Los valores de referencia de 25 -250 y 30- 300 son valores establecidos en las NOM
dependiendo del grupo bacteriano que se analiza.